抑制由死亡配体诱导的Epstein-Barr病毒编码的小RNA表达人类T细胞系中的凋亡

《Infectious Agents and Cancer》：Inhibition of death-ligand-induced apoptosis in Epstein-Barr virus-encoded small RNAs-expressing human T-cell line

EBV感染T/NK细胞导致淋巴增殖性疾病，研究显示EBERs和LMP1通过cFLIP增强和NF-κB通路激活分别使Jurkat细胞对TRAIL/Apo2L和sFasL诱导凋亡抵抗，EBERs可能促进非B细胞淋巴瘤发生。

　　

摘要

背景

在慢性活动性Epstein-Barr病毒（EBV）（CAEBV）疾病中，EBV会感染T细胞或自然杀伤（NK）细胞，患者常出现多种与EBV相关的T/NK细胞淋巴增生性疾病，包括多克隆、寡克隆和单克隆增生，有时还会发展为EBV阳性的NK/T细胞淋巴瘤。在恶性肿瘤的发展过程中，获得抵抗细胞死亡的能力是一个重要因素。

方法

我们利用含有EBV编码的小RNA（EBERs）或潜伏膜蛋白（LMP）1编码序列的质粒，通过携带EBV核抗原1的表达质粒载体，将其引入病毒-I阴性的代表人T细胞系中，从而建立了稳定的转化细胞株。利用这些稳定转化细胞株，我们评估了表达潜伏EBV基因、EBERs或LMP1的T细胞系对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）/Apo2L或可溶性FasL（sFasL）诱导的凋亡敏感性的变化。

结果

在检测的五种人类T细胞系中，Jurkat细胞系对Apo2L和sFasL诱导的细胞死亡最为敏感；而表达EBERs（Jurkat/E6）或LMP1（Jurkat/L）的Jurkat细胞稳定转化株则表现出对这两种凋亡诱导因子的抗性。在Jurkat/E6细胞中，抑制caspase-8激活和凋亡的cFLIP_S表达略有增强；而在Jurkat/L细胞中，IκBα的磷酸化持续上调，这会引发细胞存活信号。此外，在未使用质粒选择抗生素培养6个月后，EBERs表达降低的Jurkat/E6细胞部分恢复了对其它凋亡诱导因子的敏感性，而LMP1表达降低的Jurkat/L细胞则没有这种恢复。

结论

EBERs可能负责诱导对凋亡诱导因子的抗性，并可能促进非B细胞谱系的EBV阳性淋巴瘤的发展。