《Journal of Equine Veterinary Science》：Taohong Siwu Decoction Alleviates Hand-Foot Skin Reaction by Regulating RAGE-mediated Keratinocyte Apoptosis and Autophagy
编辑推荐：
基于 Sorafenib 建立手足皮肤反应大鼠模型，通过外用桃红四物汤（THSWD）治疗，结合质谱分析、转录组测序及分子对接技术，证实 THSWD 通过调控 RAGE/PI3K/AKT 通路，抑制过度凋亡并促进自噬，改善皮肤屏障结构及功能，其疗效优于尿素霜。
董慧静|刘振宁|于福环|贾莉|郑玉敏|沈玉蕾|王奥琳|吴代西|王新萌|崔慧娟|彭艳梅
北京中医药大学，中国北京
摘要
背景
血管内皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（VEGFR-TKIs）被广泛用于治疗实体瘤，但常引起手足皮肤反应（HFSR），这会降低患者的生活质量并影响药物耐受性。传统中药方剂“桃红四物汤”（THSWD）已被批准用于缓解TKI相关的HFSR，但对其作用机制仍需进一步研究。
方法
使用索拉非尼（VEGFR-TKIs之一）建立HFSR大鼠模型。将Sprague–Dawley大鼠随机分为对照组、模型组、尿素霜组以及低/中/高浓度THSWD组。THSWD和尿素霜分别外用于大鼠的爪部。通过质谱分析鉴定THSWD的成分，并利用RNA-seq、网络药理学和分子对接技术预测其潜在作用机制。随后通过测量足底机械撤退阈值（PWT）、临床皮肤评分、苏木精-伊红染色和Masson三色染色、透射电子显微镜观察、Western blotting以及TUNEL检测等方法，比较各组之间的细胞凋亡、自噬和RAGE/PI3K/AKT信号分子的变化。此外，还通过局部（足底）AAV2/9介导的RAGE过表达或敲低实验来验证THSWD的作用靶点。
结果
THSWD显著改善了大鼠爪部的病变情况，并提高了PWT值，效果优于尿素霜。组织学检查显示角化过度和胶原紊乱得到改善。超微结构观察发现线粒体肿胀减轻，自噬体数量增加。与模型组相比，THSWD下调了Bax和caspase-3的表达，上调了Bcl-2的表达，提高了LC3B-II/LC3B-I比值，并恢复了PI3K和p-AKT的表达，表明THSWD通过RAGE/PI3K/AKT轴抑制了过度凋亡并促进了保护性自噬。TUNEL阳性细胞显著减少。网络药理学和分子对接结果支持THSWD的多组分、多靶点作用机制，涉及AGE–RAGE和PI3K–AKT通路。RNA-seq分析显示THSWD显著改变了HFSR相关的转录组谱型，增强了与脂质代谢调节和炎症抑制相关的通路。RT–qPCR进一步在转录水平上验证了这些结果。在AAV介导的RAGE调控实验中，足底皮肤中的RAGE免疫荧光显示AAV2/9成功实现了过表达和敲低；RAGE过表达增强了THSWD的保护作用，而敲低则减弱了这种效果，从而证实了RAGE在THSWD中的作用。
结论
THSWD能有效缓解索拉非尼诱导的HFSR。通过调节RAGE/PI3K/AKT信号通路，THSWD促进了皮肤屏障结构和功能的整体恢复。这些发现揭示了THSWD治疗VEGFR-TKI诱导的HFSR的潜在机制。
引言
抗血管生成疗法已成为分子靶向癌症治疗的主要焦点。其中，血管内皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（VEGFR-TKIs）取得了显著进展（Vimalraj, 2022）。索拉非尼、舒尼替尼和阿西替尼等药物被广泛用于治疗肾细胞癌、结直肠癌和乳腺癌等实体瘤，显著延长了患者的生存期（Elebiyo等, 2022）。
手足皮肤反应（HFSR）是服用VEGFR-TKIs时最常见的不良反应之一；不同药物的发病率各不相同，中度至重度HFSR的发生率可达62%（Lacouture等, 2021）。长期口服VEGFR-TKIs治疗期间，HFSR通常会持续存在，表现为水疱、脱皮、疼痛和角化病变。这些症状严重影响患者的生活质量，可能限制活动能力和手部功能，甚至需要降低剂量或停药（Iimura等, 2025; Ren等, 2015; Tan等, 2023）。
晚期糖基化终产物（RAGE）受体是一种多配体受体，在通过与晚期糖基化终产物（AGEs）、高迁移率族盒1（HMGB1）等物质的结合，在介导炎症和免疫反应中起重要作用（Radziszewski等, 2024）。HMGB1激活的RAGE参与皮肤伤口修复，因此这一信号通路近年来成为皮肤病学中的新型治疗策略，在白癜风、银屑病和特应性皮炎等多种皮肤病中发挥关键作用（Watanabe等, 2020）。SIRT1已被证实是HFSR中皮肤反应的重要调节因子（Luo等, 2020），它通过抑制HMGB1从细胞核向细胞质的转运和释放来防止皮肤损伤（Wang等, 2025）。目前HFSR的常规治疗方法包括使用含尿素的制剂；其他药物还包括外用皮质类固醇（Lacouture等, 2021; Naeem等, 2024）。由于HFSR患者存在角蛋白异常，因此使用尿素霜。角质形成细胞作为表皮的主要细胞类型，通过分泌细胞因子、趋化因子和生长因子来调节皮肤炎症和免疫反应（Jiang等, 2020）。角质形成细胞的异常增殖、分化和凋亡直接导致HFSR，而VEGFR-TKIs会干扰这些过程，从而诱发或加重HFSR（Ai等, 2019; Hasan Alshammari等, 2022; Jiang等, 2020）。
传统中医文献通常将HFSR归类为“药物毒性”和“血瘀痛证”，认为其发病机制与气血不足、皮肤和四肢营养不足以及气血瘀滞有关（刘等, 2025）。桃红四物汤（THSWD）最早记载于清代《妇科病证》，最初用于治疗月经不调。该方剂被认为具有消瘀活血、促进组织再生和调和血液的功效。遵循“同病异治”的中医原则，近年来其适用范围已扩展到多种以血瘀为关键机制的疾病（Chen等, 2020; Xie等, 2023）。赵等的研究表明，与标准西医疗法相比，THSWD足浴疗法显著减轻了索拉非尼诱导的HFSR患者的疼痛并改善了日常生活活动能力（Zhao等, 2014）。然而，THSWD在HFSR中的具体作用机制仍不明确。
因此，本研究结合转录组学、网络药理学和HFSR大鼠模型，评估了THSWD的治疗效果，并探讨了其对角质形成细胞凋亡和自噬的影响。
实验动物和药物干预
从北京维塔河实验动物技术有限公司（生产/使用许可证编号：SCXK [Jing] 2021-0011）购买了7周大的雌性Sprague–Dawley（SD）大鼠。大鼠被饲养在北京中医药大学的SPF设施中（使用许可证编号：SYXK [Jing] 2020-0033），环境条件为23–25°C、相对湿度50%–60%，可自由摄取食物和水。经过5天的适应期后，大鼠被随机分配到各组。
THSWD可缓解大鼠的机械性疼痛并改善皮肤组织结构
不同剂量的THSWD均显示出显著的缓解HFSR的效果。中等和高剂量的THSWD（TH-M和TH-H）显著改善了大鼠爪部皮肤的状况，降低了机械性疼痛阈值，组织学分析显示角质形成细胞异常明显减少，从而减轻了HFSR。图1A展示了不同处理组爪部皮肤的变化。
讨论
选择性抑制肿瘤生长和转移的靶向疗法显著提高了癌症预后。这些药物通过干扰涉及癌症突变靶点（Tan和Tan, 2022）、血管生成（Liu等, 2023）和衰老（Fane和Weeraratna, 2020）等特定分子通路来抑制肿瘤发生、疾病进展和扩散。靶向疗法相关的皮肤毒性已被认为是预后的重要指标。
结论
THSWD显著提高了机械性疼痛阈值，改善了HFSR引起的表皮角化过度和结构紊乱。虽然尿素霜也被批准用于治疗HFSR的角化过度症状，但其效果不如THSWD。我们的研究结果表明，联合使用多种治疗方法可能提高治疗效果。转录组和分子分析的结果表明，THSWD通过调节RAGE/PI3K/AKT信号通路实现了治疗效果。
作者贡献声明
吴代西：数据可视化。王新萌：数据可视化。沈玉蕾：实验研究。王奥琳：数据可视化。郑玉敏：数据整理。于福环：实验研究。贾莉：实验研究。董慧静：撰写初稿、方法学设计、实验研究、概念构建。刘振宁：实验研究。崔慧娟：撰写及审稿编辑、撰写初稿、方法学设计、实验研究、概念构建。彭艳梅：撰写及审稿编辑、撰写初稿、方法学设计。
未引用参考文献
H等, 2025; K, Yamamoto等, 2014; Lacouture等, 2023.
伦理批准
所有实验程序均获得了北京中医药大学实验动物中心的批准（伦理批准编号：BUCM-2024011602-1106）。
利益冲突
作者声明没有利益冲突。
资助
本研究得到了国家高水平医院临床研究基金（编号：2025-NHLHCRF-JBGS-A-WZ-16）、非传染性疾病-国家科技重大专项（编号：2023ZD0502500）、国家自然科学基金（编号：82104879）以及北京“高精尖人才计划”青年骨干项目（20250490）的资助。
利益冲突声明
作者声明没有可能影响本文研究结果的已知财务利益或个人关系。
