低剂量的γ-分泌酶抑制剂DAPT通过调节C57BL/6雄性小鼠中的NaV1.6/Notch轴来改善学习和记忆能力

《British Journal of Pharmacology》：A low dose of the γ-secretase inhibitor DAPT improves learning and memory by regulating the NaV1.6/Notch axis in C57BL/6 male mice

本研究通过剂量依赖性分析发现，低剂量DAPT通过调节NaV1.6/Notch轴和促进神经发生改善C57BL/6小鼠认知功能，为阿尔茨海默病治疗提供新策略。

　　

摘要

背景与目的

认知障碍在神经退行性疾病和炎症性脑部疾病中是一个主要问题，因为治疗选择有限。电压门控钠通道Na_V1.6与APP/PS1小鼠的突触可塑性和认知衰退有关。DAPT是一种γ-分泌酶抑制剂，能够阻断Notch信号通路，其对认知的影响因剂量而异。本研究探讨了DAPT对C57BL/6雄性小鼠认知功能的剂量依赖性效应，并通过Na_V1.6通道、Notch信号通路、突触可塑性和神经发生机制来阐明其作用机制。

实验方法

小鼠在右半球接受了低剂量DAPT（1 μg·μl^?1）、高剂量DAPT（2 μg·μl^?1）或DMSO（对照组）的立体定向注射。通过Morris水迷宫和Y迷宫实验、Western印迹技术、免疫荧光以及RT-qPCR分析来评估认知能力，并检测Na_V1.6、突触蛋白、NMDA/AMPA受体和神经炎症标志物。通过Nissl染色和双皮质素（DCX）染色来评估神经发生情况。原代神经元实验研究了DAPT对Na_V1.6相互作用的影响。

主要结果

低剂量DAPT显著改善了认知功能，抑制了Notch通路相关基因的表达，降低了Na_V1.6的活性，并在体内和体外上调了突触蛋白、NMDA/AMPA受体及神经元相关标志物的表达。在原代培养的神经元中，DAPT能够抑制Notch-1/NICD的相互作用（使用TTX处理），但对ATX-II没有影响。炎症标志物和细胞因子水平没有变化。体外实验中，5-μM DAPT降低了Na_V1.6的活性，增加了Notch受体的表达，并减少了Notch-1/HES-1 mRNA的水平。低剂量DAPT促进了神经发生（增加了齿状回中的DCX⁺细胞数量）。分子对接实验证实了DAPT与Na_V1.6之间的有利相互作用。

结论与意义

低剂量DAPT通过调节Na_V1.6/Notch通路并促进神经发生，改善了C57BL/6雄性小鼠的认知功能，表明其可能作为治疗阿尔茨海默病相关认知衰退的策略。

图形摘要

利益冲突声明

作者声明没有利益冲突。

数据获取声明

本研究的数据可应合理要求向通讯作者索取。