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更正:“利用硼酸核碱替代物在活细胞中通过核酸FRET技术检测过氧化氢”
《ACS Applied Bio Materials》:Correction to “Nucleic Acid FRET Sensing of Hydrogen Peroxide in Live Cells Using a Boronic Acid Nucleobase Surrogate”
【字体: 大 中 小 】 时间:2026年02月18日 来源:ACS Applied Bio Materials 4.7
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二阶速率常数k2的单位存在错误(原报告为M?1s?1,应更正为M?1min?1),且pH7.4下BA6SI的ipso-羟基化相对速率误标为217倍,实际应为3.6倍。修订内容涉及反应机理、动力学参数及检测平台验证,但未改变研究核心结论。
| BA | k2 (M–1 min–1) | Tma (BA)/PhOH | Irelb | LOD (nM) |
|---|---|---|---|---|
| BA6SI | 2182 | –/– | – | ? |
| SS | 1501 | –/– | 8 | 1490 |
| DS | 1999 | 46/58 | 5 | 331 |
| HP | 456 | >80/>80 | 18 | 149 |
DS和HP寡核苷酸(2 mM)中 Tm 的值(以°C为单位)是在pH 7.4的1X PBS缓冲液中,使用260 nm波长测得的,加热速率为0.5 °C/min,误差范围为±1 °C。
相对发射强度,其中 lex = 390 nm 和 lem = 490 nm,用于含有PhOH6HI产物的NA支架(1 mM),这些支架在与过量的H2O2反应后在pH 8.0、37 °C条件下进行测量。
图1. (A) 28聚体2′-OMe-RNA HP的序列,其中包含BA6HI替代物,并标出了BA6HI向PhOH6HI的 ipso-羟基化过程。 (B) 在30分钟内产品PhOH6HI的荧光增强情况(每1分钟扫描一次,1 μM HP BA,pH 8.0,37 °C,0.1 M PBS缓冲液,添加100 μM H2O2)。(C) 监测在加入1–500 μM H2O2后HP BA的 ipso-羟基化的荧光动力学曲线(1 μM寡核苷酸,pH 8.0,0.1 M PBS缓冲液,37 °C,红色曲线代表无H2O2的背景)。(D) 从(C)中提取的二级反应速率常数(k2)。(E) 在10分钟时(dt = 8分钟)对H2O2的荧光响应进行定量,以确定LOD(插入图)。
图3. (A) 在加入250 μM H2O2后15分钟内KR28 FRET平台的荧光增强情况(PBS pH 8,37 °C)。插图:KR28 FRET平台的示意图。 (B) 0.5 μM KR28对各种竞争性ROS的荧光响应。数据在PBS(pH 7.4,20 °C)中获取,λex = 390 nm,λem = 580 nm。误差条表示基于三次测量的标准偏差。 (C) 监测在加入1–500 μM H22后KR28的 ipso-羟基化的荧光动力学曲线(0.5 μM寡核苷酸,pH 8.0,0.1 M PBS缓冲液,37 °C)。(D) 在加入5%人血清中,最终[H2O2浓度为50–250 μM时,监测KR28的 ipso-羟基化的荧光动力学曲线(0.5 μM寡核苷酸,pH 8.0,0.1 M PBS缓冲液,37 °C)。(E) 在PBS(pH 8.0,37 °C)和5%人血清PBS(pH 8.0,37 °C)中KR28 H2O2检测的LOD定量。(F) 从(C)和(D)中提取的KR28在PBS(pH 8.0,37 °C)和5%人血清PBS(pH 8.0,37 °C)中的二级反应速率常数(k2)。
本文尚未被其他出版物引用。