蚊子直接叮咬皮肤的生物测定方法：马里地区15年的经验与标准化操作流程

《Malaria Journal》：Mosquito direct skin feeding bioassay: 15 years of experience and a standardised approach in Mali

疟疾性阶段阻断疫苗（TBV）的DSF生物assay评估。15年期间在马利开展大规模队列研究，2,796名参与者完成37,984次DSF检测，证实其安全性（0.8%拒绝率，0.032%不良反应）和可扩展性（日处理120例）。DSF阳性率差异显著（1.6%vs18.4%），显示其作为TBV替代终点的有效性。

　　

摘要

背景

迫切需要新的疟疾控制工具。阻断传播的疫苗（TBVs）针对蚊子体内的寄生虫性成熟阶段，以防止疾病传播。测试这些疫苗需要专门的蚊子传播检测方法，例如直接皮肤喂食（DSF）生物检测法。DSF是一种异种诊断工具，可以模拟寄生虫在蚊子体内的自然传播过程，但此前尚未实现大规模应用或标准化，因此无法用于临床试验。

方法

在马里巴马科周边地区进行的15年观察性和干预性研究中，对大量参与者（包括5岁及以上的儿童）进行了DSF生物检测。研究人员监测了人类、蚊子和寄生虫的相关参数，以评估DSF的安全性和可接受性、媒介昆虫的表现以及个体和群体层面的传播动态。为DSF开发的标准化程序包括蚊子种群维护、蚊子准备、喂食过程、质量控制指标、伦理考量以及志愿者的后续跟踪。

结果

2011年至2025年间，在马里的两个研究地点，对2,796名5岁及以上的农村研究参与者共进行了37,984次DSF生物检测。该检测方法被广泛接受且安全性良好，拒绝率较低（疫苗研究中的受试者拒绝率为0.8%），出现的不良事件（AE）也很罕见（11例，占比0.032%）。少数符合不良事件分级标准的即时和短期皮肤反应均为轻度或中度，均在48小时内消退。DSF的检测能力逐步提升至每天可进行120次检测，每周需要36,000只雌性蚊子。在已知感染恶性疟原虫（Plasmodium falciparum）的个体中进行喂食时，DSF阳性率最高（平均18.4%），而在不考虑血液涂片结果的所有参与者中进行喂食时，阳性率较低（平均1.6%）。

结论

DSF生物检测是一种用于检测可传播疟疾寄生虫的异种诊断工具，也是一种可扩展且安全的评估疫苗效果的方法。该方法具有多个优势：能够高度模拟自然传播过程、操作简便且易于标准化，并且具备足够的检测通量以支持疫苗的后期试验。尽管在马里研究地点测得的寄生虫传播率总体较低，但仍然产生了足够的传播数据来评估能够中断传播的干预措施的效果，从而支持将DSF生物检测作为疫苗研究中的替代效果评估指标。