《Transboundary and Emerging Diseases》：Bluetongue in China: Current Status of Viruses, Vectors, Detection Methods, and Vaccines
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本文是一篇关于中国蓝舌病的系统性综述，全面阐述了该人畜共患病毒病在中国的研究现状与发展挑战。文章从蓝舌病病毒（BTV）的病原学、流行病学、传播媒介（库蠓）、多种检测技术（如PCR、ELISA）以及疫苗（灭活苗、弱毒苗、基因工程苗）研发等多个维度进行深入梳理，总结了我国自1979年首次发现该病以来的防控进展，并针对当前监测体系、基础研究和综合防控策略的不足，提出了未来加强公众认知、完善一体化防控技术体系及深化相关研究的建议，对保障我国畜牧业健康发展和公共卫生安全具有重要参考价值。
引言：蓝舌病概述
蓝舌病（Bluetongue， BT）是一种由蓝舌病病毒（Bluetongue virus， BTV）引起、经媒介传播的传染性非接触性病毒病，可感染多种野生及家养反刍动物。由于其对反刍动物健康和国家经济的显著影响，世界动物卫生组织（WOAH）将其列为须通报的多物种疫病。在中国，蓝舌病被列为二类动物疫病。该病主要通过库蠓属（Culicoides）昆虫的叮咬传播，羊是最易感的动物，发病率与死亡率最高，牛则常为无症状携带者，是潜在的病毒储存库。BTV是一种无囊膜病毒，属于呼肠孤病毒科环状病毒属，其基因组由10条双链RNA（dsRNA）节段组成，编码多个结构蛋白（如VP2、VP5、VP7）和非结构蛋白（如NS3）。VP2蛋白是决定病毒血清型的主要蛋白，也是中和抗体的主要靶标。
蓝舌病在中国的血清学监测
中国拥有庞大的牛羊养殖规模，边境贸易活跃，复杂多样的自然环境为虫媒病毒的传播提供了条件。自1979年云南省师宗县首次证实BTV存在以来，BTV抗体阳性样品已在全国大部分地区被检出。监测数据显示，BTV阳性率存在地域和季节差异，南方低纬度地区（如广西、云南）阳性率通常高于北方高纬度地区，第三季度（7-9月）的阳性率也最高，这与媒介库蠓的活动规律密切相关。即使在最北部的黑龙江省，研究也发现了BTV抗体阳性样本及疑似BTV-1型的流行毒株，表明BTV的分布范围已相当广泛。
蓝舌病病毒在中国的分离与分型
中国已从11个省份（自治区、直辖市）分离出17种血清型的BTV（BTV-1, 2, 3, 4, 5, 7, 9, 11, 12, 14, 15, 16, 17, 20, 21, 24和29），其中BTV-16和BTV-1是主要流行血清型。云南省分离到的血清型最多。值得一提的是，2014年在新疆分离到的V196/XJ/2014毒株，经基因组分析发现其Seg-2/VP2与已知所有BTV血清型的同源性均低于63.4%，被确认为一种新的推定血清型，即BTV-29。此外，中国的研究者还首次从云南的库蠓中分离到了BTV-1毒株。BTV的基因重配现象在中国毒株中较为常见，例如广东分离的BTV-7 GD008株，其部分基因节段属于西方拓扑型（与南非株相似），另一部分则属于东方拓扑型（与国内流行株相似），证实了不同来源毒株间的遗传重配事件。
传播媒介——库蠓
库蠓是蓝舌病的主要传播媒介。中国已记录库蠓属昆虫480种，其中18种被证实可有效传播BTV，如C. homotomus、C. arakawai等，这些物种分布广泛。研究表明，库蠓的分布与活动受气候因素影响，如降水量、温度等。了解不同生态环境下媒介的种类组成和吸血习性，是制定有效防控策略的基础。近年来，病毒组学等新技术也被应用于库蠓携带病毒的监测，为深入研究媒介-病毒互作关系提供了新视角。
检测方法
针对BTV的检测技术主要包括病毒分离、特异性血清学检测和病毒核酸检测。
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针对病毒抗原/核酸的检测：中国研究者开发了多种高灵敏度、高特异性的方法，包括针对特定血清型（如BTV-29）或多种血清型的RT-PCR、实时荧光定量PCR（qRT-PCR）、多重PCR技术。此外，还有环介导等温扩增（RT-LAMP）、生物条形码检测法（BCA）、荧光定量BCA（FQ-BCA）、抗原捕获ELISA（AC-ELISA）、纳米探针检测法、液相芯片法、实时荧光RT重组酶辅助扩增（RT-RAA）以及GeXP-PCR等多种方法。例如，针对国内流行的12种血清型BTV建立的RT-LAMP方法，检测下限可达4.5拷贝/微升。
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针对抗体的检测：常用方法包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、病毒中和试验（VN）和琼脂凝胶免疫扩散试验（AGID）。中国学者开发了多种ELISA方法，如利用重组NS3蛋白建立的间接ELISA（I-ELISA），可用于区分疫苗免疫与自然感染动物；利用BTV-16重组核心样颗粒（CLP）建立的阻断ELISA（B-ELISA）；以及符合WOAH推荐的竞争ELISA（C-ELISA）方法。此外，还研制了胶体金免疫层析试纸条，可在10分钟内完成检测，便于现场快速筛查。
疫苗研发
免疫接种是控制蓝舌病最有效的策略之一。
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弱毒疫苗与灭活疫苗：中国早期曾研究鸡胚适应弱毒疫苗和灭活疫苗，用于疫情控制。近年来，在BTV-8灭活疫苗的初步研发中，探索了β-丙内酯（BPL）灭活与ISA15VG佐剂的组合方案。
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基于反向遗传系统的疫苗：中国成功建立了BTV的反向遗传操作系统，为研究病毒致病机理和开发新型疫苗提供了平台。例如，基于国内高致病性BTV-16/V158毒株构建的反向遗传系统，通过替换其Seg-2和Seg-6节段，成功拯救出具有新血清型特征的病毒株，为研发工程化疫苗奠定了基础。还有研究利用该系统拯救了携带流感病毒HA标签的重组BTV-16，为开发区分感染与免疫动物（DIVA）的灭活疫苗提供了可能。
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病毒样颗粒（VLPs）：VLPs不含病毒基因组，安全性高，能有效模拟天然病毒的免疫原性。研究表明，BTV16 VLPs免疫小鼠后可刺激产生特异性抗体和中和抗体，显示出作为候选疫苗的潜力。
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活载体疫苗：将BTV16的VP2基因整合到重组痘苗病毒基因组中构建的活载体疫苗，在小鼠模型中显示出良好的安全性和激发特异性免疫应答的能力。
尽管中国在蓝舌病疫苗研究方面开展了多方面工作，但尚无强制免疫要求，商业化的疫苗应用仍有限。
蓝舌病防控建议
面对全球气候变化、国际贸易增加和病毒频繁重组的背景，需要加强蓝舌病的防控。
- 1.
提高对蓝舌病危害的认识：尽管近年动物死亡率报告减少，且中国在202年将其调整为二类疫病，但不应放松警惕。BTV血清型多、易变异，历史上曾造成巨大损失。需持续关注，开展必要的基础研究和技术储备。
- 2.
采用一体化防控技术体系：蓝舌病作为虫媒病，防控需综合施策。措施包括：加强血清学监测，及时发现和处理感染动物；在疫区限制动物移动；在重点流行区设置哨兵动物；在媒介活动季节杀虫、减少放牧、进行环境消毒；加强入境动物检疫，防止境外疫情传入。建议参考澳大利亚的全国虫媒病毒监测体系（利用哨兵动物）和欧盟的区域化管理经验，建立和完善适合中国的监测与防控体系。
- 3.
加强蓝舌病相关研究：需在以下几个方面深化研究：
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BTV的越冬机制：探究病毒如何在媒介不活动的“静默期”后再次引发疫情，是有效防控的关键。
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传播媒介研究：除了库蠓，是否还有其他吸血昆虫参与传播？需在全国范围内开展系统调查，明确媒介种类、分布及传病能力。
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疫苗和药物研发：推动新型多价、安全、具备DIVA特性的疫苗（如基因工程疫苗、VLPs疫苗）的研发与商业化。同时，探索针对蓝舌病的特异性治疗药物，例如有研究发现组蛋白去乙酰化酶6（HDAC6）的特异性抑制剂Tubacin对BTV-13感染有一定抑制作用。
