螺旋藻（Spirulina platensis）和抹茶绿茶对感染艾美球虫（Eimeria stiedae）的兔子的保护肝脏作用及营养保健效果：一种结合体内实验和计算机模拟的研究方法

《Veterinary Parasitology》：Hepatoprotective and nutraceutical effects of Spirulina platensis and Matcha green tea on Eimeria stiedae Infected Rabbits: An integrated in vivo and in silico approach

本研究评估了螺旋藻（SP）和抹茶（MGT）对兔肝球虫病（Eimeria stiedae）的治疗效果，通过63只新西兰兔实验，发现单独或联合使用SP和MGT可改善体重增长、降低卵囊排出、减轻氧化应激、修复肝肠组织及调节炎症反应，其联合效果与托拉珠南相当。分子对接显示SP和MGT活性成分对寄生虫靶点酶有强结合力。摘要结束。

　　

马尔瓦·A·萨利赫（Marwa A. Saleh）|诺尔汉·W·哈利勒（Norhan W. Khalil）|雷达·H·阿卜杜拉（Reda H. Abdullah）|雷哈姆·I·菲沙（Reham I. Fishah）|扎伊纳布·S·阿卜杜勒哈菲兹（Zeinab S. Abdelhafez）|阿拉·E·阿尔-塞梅拉维（A’laa E. Al-Semelawy）|阿斯玛·I·德苏基（Asmaa I. Desouky）

埃及本哈大学（Benha University）兽医学院寄生虫学系

摘要

肝球虫病对兔子的影响极为严重，导致全球范围内巨大的经济损失。近年来，由于天然产品副作用小且抗药性风险较低，它们作为传统抗球虫药的替代品受到了关注。本研究探讨了螺旋藻（Spirulina platensis，简称SP）和抹茶（Matcha green tea，简称MGT）在感染Eimeria stiedae的兔子体内的治疗效果，重点研究了它们的抗氧化、抗炎和保肝作用。63只新西兰兔子被分为7组：对照组（CN）、未感染的SP–MGT组、感染但未治疗的组、SP感染组、MGT感染组、SP–MGT联合感染组以及接受托特拉祖里尔（Toltrazuril）治疗的组。治疗在感染前5天开始，并持续整个实验过程。第6天通过每只兔子口服1×10?个孢子化的E. stiedae卵囊来诱导感染。单独或联合使用SP和MGT显著改善了兔子的体重增长和饲料转化率，减少了卵囊的排出量，缓解了氧化应激，使生化指标恢复正常，降低了血清细胞因子水平，并减轻了肝脏损伤。分子对接分析支持了体内实验结果，显示SP和MGT活性成分与寄生虫目标酶具有很强的结合亲和力，这暗示了它们的潜在作用机制。总体而言，螺旋藻和抹茶均改善了兔子的健康状况和表现；其中抹茶的抗球虫效果更为显著，表现为卵囊排出量显著减少。两者联合使用产生了最全面的保护作用，效果可与托特拉祖里尔相媲美，通过支持肝脏和肠道恢复、增强抗氧化防御机制以及减轻炎症来实现。需要进一步的研究来阐明其协同作用的分子机制，并确认它们作为控制兔子肝球虫病的天然替代品的安全性和有效性。

引言

兔子养殖是埃及畜牧业中一个成熟的产业，在支持国家经济方面发挥着关键作用（Imam等人，2020年）。根据联合国粮食及农业组织（FAO）的数据，2020年埃及是全球第三大兔肉生产国（FAO，2020年）。然而，兔子养殖的集约化带来了传染病风险的增加。其中，由多种Eimeria物种引起的球虫病是一种影响肝脏和肠道的寄生虫病，对兔子养殖构成了严重的健康和经济挑战（Jankovská等人，2010年；Shahawi等人，2012年）。值得注意的是，Eimeria stiedae被认为是最具致病性的物种，会在家兔体内引发严重的肝脏病变（Abu-Akkada等人，2010年；Bochyńska等人，2022年）。E. stiedae会攻击胆管上皮细胞，引发严重的肝球虫病，从而对兔子生产造成重大经济损失（Maziz-Bettahar等人，2018年）。受感染的兔子通常会出现食欲下降、生长受阻、腹泻、黄疸和腹部膨胀等症状，同时发病率和死亡率也会升高（Eladl等人，2020年）。此外，Eimeria感染还会削弱宿主的免疫系统，使兔子容易受到继发感染（Yin等人，2016年）。由于这种寄生虫的顽固性和难以根除的特性，Eimeria感染对兔子养殖构成了重大挑战（Vancraeynest等人，2008年）。有效的管理和控制策略对于减轻这种寄生虫病的影响以及提高兔子养殖场的生产力至关重要（Williams，2006年）。尽管球虫病是通过饮水或土壤传播的，但卫生和一般管理措施对于其控制至关重要（Shivaramaiah等人，2014年）。通常，这些措施会与抗球虫药物的预防性或治疗性使用相结合（Bawm和Htun，2021年；Hussain等人，2022年）。抗球虫药物的不良反应包括抗药性的产生甚至毒性（Noack等人，2019年）。此外，长期在饲料中添加抗球虫药物可能导致饲料中残留抗球虫成分，从而对健康构成威胁（Srinivasu等人，2019年）。因此，人们越来越关注寻找新型且安全的抗球虫化合物。包括天然产品在内的潜在抗球虫剂已被研究用于降低化疗相关的风险（Hussain等人，2021年）。许多药用植物富含生物活性物质，如黄酮类、香豆素、苷类、三萜类和生物碱，这些物质具有抗氧化、抗炎和保肝作用。这些特性可能增强宿主的抵抗力，并在寄生虫感染期间减轻组织损伤（Gul等人，2024年）。富含抗氧化剂的植物提取物在实验研究中也显示出抗球虫效果。例如，Morus macroura和Lepidium sativum的酒精提取物显著改善了感染Eimeria stiedae的兔子的临床状况和体重，同时减少了卵囊的排出量（Saleh等人，2023年）。同样，青蒿素液体提取物以及肉桂和丁香的精油也被认为对肝球虫病具有保护作用（Sorour等人，2018年）。此外，富含黄酮类、香豆素、苷类、三萜类和生物碱的Phyllanthus amarus叶提取物显著提高了感染禽类的生长性能，并剂量依赖性地抑制了卵囊的孢子化，表明植物来源的化合物具有作为天然抗球虫剂的潜力（Dauda等人，2024年）。

Spirulina platensis（SP）是一种天然存在的螺旋形多细胞蓝绿藻，因其丰富的营养成分（包括碳水化合物15–25％、蛋白质55–70％、甾醇和多不饱和脂肪酸18％）而被广泛用作人类和动物的膳食补充剂（Chamorro等人，2002年）。此外，SP还含有藻蓝蛋白、β-胡萝卜素、类胡萝卜素、γ-亚麻酸和多糖等生物活性成分，这些成分赋予了它多种生物功能。这些化合物显著增强了其抗氧化、抗炎和抗病毒活性以及免疫调节作用，最终支持宿主的防御机制并有助于清除活性氧（Bashir等人，2020年）。此外，螺旋藻作为新型草药抗寄生虫剂对Cryptosporidium parvum也显示出良好的潜力（Al-Shuwaili等人，2023年）。

绿茶（Camellia sinensis）在全球范围内被广泛饮用（Emoto等人，2014年）。其中多酚类儿茶素，如表儿茶素没食子酸酯、表儿茶素、表没食子儿茶素和表没食子儿茶素没食子酸酯，是其中最活跃的生物成分。这些成分具有广泛的 therapeutic效益，包括抗炎、抗氧化、驱虫和抗菌作用（Fujiki等人，2005年；Raoofi等人，2016年）。绿茶还被成功用于治疗Entamoeba histolytica（Shaker等人，2018年）、疟疾（Thipubon等人，2015年）、Trypanosoma cruzi（Güida等人，2007年）、Leishmania amazonensis（Inacio等人，2013年）和Cryptosporidium parvum（El-Wakil等人，2022年）。据我们所知，关于抹茶和Spirulina platensis对Eimeria stiedae感染的抗氧化和抗炎作用的研究有限。因此，本研究旨在通过评估实验感染兔子的临床表现、生化指标、氧化应激标志物、细胞因子谱型和组织病理变化，来评估它们与托特拉祖里尔（一种传统抗球虫药物）相比的治疗效果。

E. stiedae的来源

本研究中使用的Eimeria stiedae卵囊最初是在之前的实验工作中分离并形态学鉴定的。它们保存在2.5％的重铬酸钾溶液中。孢子化的卵囊用蒸馏水彻底清洗后，使用麦克马斯特计数技术（McMaster counting technique）计数至每毫升10?个卵囊的浓度，然后储存在4°C条件下直至使用（Levine，1973年）。

兔子

63只年龄在35–37天之间、体重在600–800克的新西兰兔子被随机分配到不同的组别中

卵囊排出量

未治疗的感染组在整个实验期间表现出最高的卵囊排出量，这清楚地反映了Eimeria stiedae感染的严重性。相比之下，所有接受治疗的组在减少卵囊排出量方面都表现出不同程度的效果。接受托特拉祖里尔治疗的组在感染后的第22、24、26和28天表现出最明显的减少效果。然而，同时接受抹茶和Spirulina治疗的组显示出更为显著的效果

讨论

兔子肝球虫病仍然是影响兔子养殖最重要的经济疾病之一。随着人们对替代抗球虫策略的兴趣增加，天然添加剂已成为有前景的控制措施。抹茶和螺旋藻被认为具有保肝、抗氧化和抗炎作用（Raoofi等人，2016年；Ramez等人，2021年；Al-Shuwaili等人，2023年）。因此，本研究旨在评估它们的抗球虫效果

结论

连续34天给予Spirulina platensis（SP）和抹茶（MGT）后，结果显示它们对兔子肝球虫病具有显著的保护作用，改善了生长性能，恢复了肝脏和肠道的完整性，使生化和抗氧化指标恢复正常，并调节了炎症反应。联合治疗的效果与托特拉祖尔相当，表明它们作为安全、天然的替代品或辅助治疗手段具有潜力

利益冲突声明

作者声明他们没有已知的财务利益或个人关系可能影响本文所述的工作。