摘要
可靠的参考材料(RMs)对于准确、可追溯和定量检测转基因(GM)作物及其产品至关重要。在本研究中,使用转基因木瓜“焕农1号”(HN1)和非转基因木瓜“台农2号”(TN2)的叶片作为原料,制备了两种不同浓度的基因组DNA(gDNA)认证参考材料(CRMs)。采用数字PCR(dPCR)技术评估了这些参考材料的均匀性和稳定性,并进行了协同表征分析。制备的25%和5% HN1 gDNA CRMs表现出良好的均匀性和稳定性。通过九个实验室的协同表征和不确定性评估,确定了三个关键参数:HN1特异性序列的拷贝数浓度、papain基因的拷贝数浓度以及拷贝数比值。对于25% HN1 gDNA CRM,这三个参数分别为6.91×10?拷贝/μL、2.63×10?拷贝/μL和2.64×10?1;对于5% HN1 gDNA CRM,这三个参数分别为1.27×10?拷贝/μL、2.50×10?拷贝/μL和5.08×10?2。使用这些CRMs所需的最小样本量为2 μL。这些材料为转基因木瓜HN1及其加工产品的定性和定量检测提供了准确可靠的基准,同时所建立的方法也为其他CRMs的制备提供了理论依据。
可靠的参考材料(RMs)对于准确、可追溯和定量检测转基因(GM)作物及其产品至关重要。在本研究中,使用转基因木瓜“焕农1号”(HN1)和非转基因木瓜“台农2号”(TN2)的叶片作为原料,制备了两种不同浓度的基因组DNA(gDNA)认证参考材料(CRMs)。采用数字PCR(dPCR)技术评估了这些参考材料的均匀性和稳定性,并进行了协同表征分析。制备的25%和5% HN1 gDNA CRMs表现出良好的均匀性和稳定性。通过九个实验室的协同表征和不确定性评估,确定了三个关键参数:HN1特异性序列的拷贝数浓度、papain基因的拷贝数浓度以及拷贝数比值。对于25% HN1 gDNA CRM,这三个参数分别为6.91×10?拷贝/μL、2.63×10?拷贝/μL和2.64×10?1;对于5% HN1 gDNA CRM,这三个参数分别为1.27×10?拷贝/μL、2.50×10?拷贝/μL和5.08×10?2。使用这些CRMs所需的最小样本量为2 μL。这些材料为转基因木瓜HN1及其加工产品的定性和定量检测提供了准确可靠的基准,同时所建立的方法也为其他CRMs的制备提供了理论依据。