用于测定葫芦巴碱的绿色RP-HPLC方法：基于AQbD的开发、验证及其在纳米制剂中的应用

《BMC Chemistry》：Green RP-HPLC method for estimation of trigonelline: AQbD based development, validation, and application to nanoformulations

开发并验证了基于AQC与AQbD原则的绿色RP-HPLC法用于三萜宁纯品及纳米制剂的定量分析，优化流动相比例与流速，线性良好（r2=0.9986），检测限0.628 μg/mL，降解实验显示对酸碱敏感，绿色评估工具证明方法环保且适合常规分析。

　　

摘要

三角芥碱（Trigonelline）是一种从植物中提取的生物活性化合物，具有多种药理活性。近年来，在药物开发中对该化合物的利用取得了显著进展，这突显了建立一种可重复且高效的分析方法的重要性，以便准确测定其纯形式以及配制成纳米系统后的含量。当前的研究旨在通过整合“分析质量设计”（Analytical Quality by Design, AQbD）与“绿色分析化学”（Green Analytical Chemistry）的理念，开发并验证一种用于测定三角芥碱（TRG）的绿色RP-HPLC方法。色谱条件的优化采用了旋转中心复合设计（rotatable central composite design），以流动相的用量及其流速作为关键变量，尾峰因子（T_f）、保留时间（R_t）和理论板数作为响应指标。使用乙醇和水（40:60, v/v）在Phenomenex C18（250 × 4.6 mm, 5 μm）柱子上，在264 nm波长下进行色谱分离，最终在1.5 mL/min的流速下于5.60分钟处得到一个清晰、对称的峰。所开发的方法在5–15 μg/mL的范围内表现出优异的线性（r2 = 0.9986），相对标准偏差（%RSD）小于2%；检测限（LOD）和定量限（LOQ）分别为0.628 μg/mL和1.90 μg/mL。强制降解实验表明，在酸性介质中8小时后降解率为12%，在碱性介质中为9%，说明该化合物对水解具有中等敏感性。此外，该方法还根据ICH Q2(R1)指南进行了验证。通过AES、GAPI、AGREE、AMGS和AGSA等工具进行了全面的绿色性评估，证实了新开发的方法在绿色性能方面优于现有方法，并适用于可持续的常规分析。

图形摘要

三角芥碱是一种从植物中提取的生物活性化合物，具有多种药理活性。近年来，在药物开发中对该化合物的利用取得了显著进展，这突显了建立一种可重复且高效的分析方法的重要性，以便准确测定其纯形式以及配制成纳米系统后的含量。当前的研究旨在通过整合“分析质量设计”（Analytical Quality by Design, AQbD）与“绿色分析化学”（Green Analytical Chemistry）的理念，开发并验证一种用于测定三角芥碱（TRG）的绿色RP-HPLC方法。色谱条件的优化采用了旋转中心复合设计（rotatable central composite design），以流动相的用量及其流速作为关键变量，尾峰因子（T_f）、保留时间（R_t）和理论板数作为响应指标。使用乙醇和水（40:60, v/v）在Phenomenex C18（250 × 4.6 mm, 5 μm）柱子上，在264 nm波长下进行色谱分离，最终在1.5 mL/min的流速下于5.60分钟处得到一个清晰、对称的峰。所开发的方法在5–15 μg/mL的范围内表现出优异的线性（r2 = 0.9986），相对标准偏差（%RSD）小于2%；检测限（LOD）和定量限（LOQ）分别为0.628 μg/mL和1.90 μg/mL。强制降解实验表明，在酸性介质中8小时后降解率为12%，在碱性介质中为9%，说明该化合物对水解具有中等敏感性。此外，该方法还根据ICH Q2(R1)指南进行了验证。通过AES、GAPI、AGREE、AMGS和AGSA等工具进行了全面的绿色性评估，证实了新开发的方法在绿色性能方面优于现有方法，并适用于可持续的常规分析。

图形摘要