《ACS Omega》：Separation, Purification, Component Identification, and Bioactivity Analysis of Polyphenols from Aronia melanocarpa
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本综述系统探讨了利用超声辅助低共熔溶剂（DES）萃取、AB-8大孔树脂纯化技术高效获取黑果腺肋花楸（AMP）多酚的创新工艺。研究通过UPLC-QTOF-MS/MS精确鉴定出49种多酚组分，并证实DES-AMP在体外抗氧化、抑制α-葡萄糖苷酶（α-glucosidase）和胰脂肪酶（pancreatic lipase）活性方面均显著优于传统有机溶剂提取法及蓝莓多酚（BP），为开发具有降血糖、降血脂功能的健康产品提供了坚实的科学依据。
引言：黑果腺肋花楸——功能成分的宝库
黑果腺肋花楸，一种富含生物活性物质的蔷薇科植物，是研究植物功能成分的重要资源。其核心功能组分多酚，包括花青素、原花青素、黄酮类和酚酸等，因其卓越的抗氧化、抗炎、调控糖脂代谢等潜在健康效益而备受关注。然而，传统有机溶剂提取法存在效率较低、环境友好性差等问题，因此，开发高效绿色的提取纯化技术，并深入阐明其活性成分与功能之间的关系，成为当前研究的关键。
材料与方法：高效绿色技术体系的构建
本研究建立了一套从提取、纯化到活性评价的系统性技术方案。首先，采用超声辅助低共熔溶剂（DES，由氯化胆碱和乳酸以1:3摩尔比构成，含80%水）作为主要提取方法，并与传统的80%甲醇和60%乙醇提取法进行对比。DES凭借其可调节的氢键网络和极性，有望更高效、选择性地溶解多种多酚。随后，通过对四种大孔树脂（AB-8, D101, DM-130, NKA-9）的静态吸附-解吸附性能筛选，确定AB-8树脂对AMP粗提物具有最佳的吸附率（91.2%）和解吸附率（82.32%），因而被选为纯化AMP的介质。纯化后的多酚组分利用超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱（UPLC-QTOF-MS/MS）进行定性与定量分析。最后，通过体外化学法（清除ABTS+、DPPH、羟基自由基）评估其抗氧化能力，并通过模拟体外消化后，测定其对α-葡萄糖苷酶和胰脂肪酶的抑制活性，以评价其潜在的降血糖和降血脂功能。
结果与分析
1. 树脂筛选与多酚含量测定
四种大孔树脂的性能比较显示，AB-8树脂在AMP的吸附与解吸附方面均表现最佳，其吸附量与解吸附量显著高于其他树脂。采用优化的DES提取法获得的AMP，其总多酚含量高达84.56 ± 3.85 mg/g，分别是80%甲醇提取法和60%乙醇提取法获得含量的3.91倍和6.11倍，证明了DES提取法在获取高得率AMP方面的显著优势。
2. 体外抗氧化活性评估
DES提取的AMP在所有三种自由基清除实验中均展现出最强的抗氧化活性。其对ABTS+自由基的清除率达到100 ± 4.04%，对羟基自由基的清除率为96.77 ± 3.56%，对DPPH自由基的清除率也为100 ± 2.99%，均显著高于两种传统溶剂提取的AMP。这与其更高的总多酚含量以及更丰富的多酚组分构成直接相关。
3. 多酚组分鉴定与分析
UPLC-QTOF-MS/MS分析从AMP中共鉴定出49种主要多酚化合物，包括16种花青素、3种原花青素、20种黄酮类和10种酚酸。其中，DES提取法检出了46种化合物，远多于甲醇法的36种和乙醇法的12种。主要生物活性成分包括原花青素B1、表儿茶素、矢车菊素-3-O-半乳糖苷、矢车菊素-3-O-葡萄糖苷、绿原酸、新绿原酸、槲皮素-3-O-芸香糖苷等。定量分析显示，原花青素部分是总多酚的主要组成部分，占比达65.37%。研究还首次在AMP中鉴定出异鼠李素-3-O-β-d-葡萄糖苷-7-O-β-d-龙胆二糖苷和山奈酚-3-O-龙胆二糖苷两种新化合物。
4. 体外降血糖与降血脂活性评价
为了评估AMP在模拟消化后的生物可利用活性，研究比较了经DES提取的AMP和蓝莓多酚（BP）在模拟消化前后对α-葡萄糖苷酶和胰脂肪酶的抑制能力。结果显示，未消化的AMP对α-葡萄糖苷酶的抑制率为76.4 ± 1.2%。经过模拟胃消化后，抑制活性大幅下降至15.1 ± 0.4%，但在随后的肠消化阶段部分恢复至30.4 ± 1.2%。相比之下，BP在三个阶段的抑制率分别为68.2 ± 0.9%，5.9 ± 0.2%和9.1 ± 0.2%。在消化后的两个阶段，AMP的抑制活性分别是BP的2.56倍（胃消化后）和3.34倍（肠消化后），表明AMP具有更强的潜在降血糖能力。这种活性变化与多酚在消化环境中的稳定性、转化及生物可及性密切相关，其中富含的矢车菊素糖苷、槲皮素衍生物、绿原酸及复杂的没食子酰基葡萄糖衍生物是主要贡献者。
在胰脂肪酶抑制实验中，未消化的AMP和BP均表现出完全的抑制（100%）。模拟胃消化后，AMP的抑制率仍为100%，BP为95.5%；模拟肠消化后，AMP抑制率为92.7%，BP为89.3%。AMP在各阶段均表现出略优于BP的抑制效果。这种强效且稳定的抑制活性，主要归因于AMP中富含的高聚合度原花青素，其复杂的结构能抵抗消化降解，并能通过多种机制有效抑制胰脂肪酶，显示出显著的潜在降血脂功效。
结论
本研究成功验证了超声辅助低共熔溶剂（DES）提取结合AB-8大孔树脂纯化是一种高效、绿色的AMP制备工艺。该工艺不仅能获得更高得率、更多样化的多酚组分，而且所得DES-AMP提取物在体外表现出卓越的抗氧化活性，以及经模拟消化后更强的α-葡萄糖苷酶和胰脂肪酶抑制能力，其综合生物活性显著优于传统溶剂提取的AMP及常见的蓝莓多酚。这些发现为将黑果腺肋花楸开发成具有明确降血糖、降血脂功能的膳食补充剂或功能性食品添加剂，提供了坚实的科学理论依据和极具前景的应用方向。
