《Veterinary Microbiology》：Epidemiological insights into the prevalence of, and risk factors for,
Eimeria species in Australian dairy goats
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本横断面研究调查了澳大利亚乳山羊艾美耳球虫（Eimeria）感染的流行率、虫种构成及风险因素。通过对71个牛群1188份粪便样本的收集与分析，结果显示个体水平调整流行率为71%，牛群水平流行率高达97%。在羔羊中观察到最高的流行率（86%）和卵囊排出量（中位OPG 240）。研究鉴定出9种艾美耳球虫，其中E. arloingi、E. ninakohlyakimovae和E. alijevi最为常见。多变量分析识别出年龄、性别、气候带、饲养密度、垫料类型及更换频率是显著的风险因素。该研究证实艾美耳球虫感染在澳大利亚乳山羊群中高度流行，尤其在年轻动物中形成显著聚集，强调了实施年龄靶向和管理控制策略的重要性。改进饲养管理可减少环境污染，减轻山羊球虫病对生产的影响。
在全球畜牧业中，球虫病是一种长期存在的挑战，尤其对幼年反刍动物的健康和生产构成显著威胁。尽管艾美耳球虫在禽业的重要性已被广泛认知，但其作为牛、羊、山羊等家养反刍动物的重要健康和生产制约因素，正逐渐受到重视。在山羊中，全球已鉴定出超过26种艾美耳球虫，其中仅有9种被认可为有效种。像E. arloingi、E. ninakohlyakimovae这类高致病性虫种，可导致羔羊发生临床球虫病，表现为腹泻、里急后重、卧地不起、脱水和体重减轻等症状，严重时甚至造成高死亡率。然而，对山羊球虫病的诊断和控制常常面临困难，因为单一宿主常感染多种艾美耳球虫，并且感染通常是亚临床的，高卵囊计数未必等同于临床疾病。
进入21世纪以来，澳大利亚乳山羊产业经历了显著增长，集约化和半集约化管理的牛群数量增加，以满足国内外对乳山羊产品的需求。然而，这种集约化也带来了挑战，特别是在控制传染性疾病方面，如球虫病。先前的研究要么集中于单一地区的野化山羊，要么是在三十多年前进行的。因此，当前对于艾美耳球虫在澳大利亚多样化气候带的乳山羊中的流行率、风险因素和虫种分布缺乏全面了解。为了填补这一知识空白，一项全国性的横断面研究得以开展，旨在：(1) 确定牛群内艾美耳球虫的流行率；(2) 对艾美耳球虫虫种进行形态学鉴定；(3) 识别增加山羊艾美耳球虫阳性可能性的相关特征。
这项横断面研究于2023年11月至2024年7月间进行。研究针对在澳大利亚乳山羊协会注册的乳山羊养殖场。采用两阶段整群抽样方法，从71个牛群中随机收集了1,188只山羊的粪便样本。研究人员向畜主发放采样包，详细说明了采样和运送步骤。每个样本的卵囊数（OPG）采用改进的McMaster技术进行定量。对于卵囊计数至少达到1,000 OPG的样本，按牛群进行混合，并用2.5%重铬酸钾溶液室温孵育7-14天，使其孢子化，以便进行形态学鉴定。虫种鉴定基于已发表的形态学鉴定指南。此外，通过在线问卷（使用REDCap开发）收集了与牛群、畜栏和环境相关的风险因素数据。统计分析包括使用混合效应逻辑回归模型计算调整流行率和识别风险因素，并利用有向无环图来指导建模，以进行因果推断。
结果
3.1. 样本和问卷的描述性统计
研究共收集了来自澳大利亚71个牛群的1,188只山羊的样本。样本在冬季降雨带（40%）、夏季降雨带（25%）、地中海型降雨带（18%）和非季节性降雨带（17%）均有分布。大部分样本（63%）在秋季采集。样本中68%为成年山羊，18%为羔羊，14%为断奶羊。82%的样本来自雌性山羊。在线问卷的回复率为85%（60/71）。
3.2. 艾美耳球虫的流行率和卵囊强度
艾美耳球虫的个体动物水平调整流行率为71%（95% CI 63%至77%）。牛群水平流行率高达97%（95% CI 93%至100%）。卵囊计数中位数为60 OPG（范围0至2.4×106）。按年龄组划分，羔羊的调整流行率（86%，95% CI 80%至91%）和卵囊计数中位数（240 OPG）最高，断奶羊次之，成年山羊最低。雄性山羊的流行率和卵囊计数中位数也显著高于雌性山羊。不同气候带间存在显著差异，冬季降雨带的调整流行率（75%，95% CI 65%至84%）和卵囊计数中位数（60 OPG）最高，夏季降雨带最低。饲养密度高（<3 m2/只）的畜群流行率和卵囊计数也显著更高。
3.3. 鉴定的艾美耳球虫虫种
在32个牛群的混合粪便样本中，共形态学鉴定出9种艾美耳球虫，包括E. alijevi、E. arloingi、E. aspheronica、E. caprina、E. caprovina、E. christenseni、E. hirci、E. jolchijevi和E. ninakohlyakimovae。牛群水平流行率最高的虫种是E. arloingi（100%），其次是E. ninakohlyakimovae（94%）、E. alijevi（91%）、E. hirci（87%）和E. christenseni（78%）。所有样本均存在三种或以上艾美耳球虫的混合感染，平均虫种丰富度为5.7。
3.4. 风险因素分析
通过有向无环图指导的多变量混合效应逻辑回归模型，确定了6个与艾美耳球虫阳性显著相关的风险因素：
- 1.
年龄：与成年山羊相比，羔羊（OR 3.6，95% CI 2.3-5.6）和断奶羊（OR 2.3，95% CI 1.4-3.7）呈阳性的比值比显著更高。
- 2.
性别：雄性山羊呈阳性的比值比是雌性山羊的1.5倍（95% CI 1.0-2.2）。
- 3.
气候带：冬季降雨带山羊呈阳性的比值比是夏季降雨带的2.4倍（95% CI 1.1-5.4）。
- 4.
饲养密度：高饲养密度（<3 m2/只）畜群的山羊呈阳性的比值比是低饲养密度畜群的8.8倍（95% CI 2.9-26.6）。
- 5.
垫料类型：与实心地面相比，漏缝地面畜群的山羊呈阳性的比值比为7.4（95% CI 1.1-49.8）。
- 6.
垫料更换频率：与每月更换超过4次相比，每月仅更换1次垫料的畜群，其山羊呈阳性的比值比为7.2（95% CI 3.3-15.4）。
3.5. 组内相关系数和设计效应
基于本研究数据，山羊艾美耳球虫感染的组内相关系数估计值为0.3（95% CI 0.1-0.5），设计效应为5.8（95% CI 2.8-8.8）。
结论与讨论
本研究表明，艾美耳球虫感染在澳大利亚乳山羊中广泛流行，个体和牛群水平流行率均很高。研究结果填补了当前知识的空白，提供了关于流行率、虫种分布和风险因素的关键信息。羔羊是感染和排虫的主要群体，尤其在冬季和非季节性降雨带。鉴定的9种虫种中，E. arloingi和E. ninakohlyakimovae这两种已知的高致病性虫种普遍存在，提示临床疾病风险不容忽视。
该研究在方法论上有所创新，通过应用有向无环图指导因果推断，使风险因素的识别和量化更加严谨，避免了因混杂、中介或碰撞变量引起的偏倚。研究识别出的六个关键风险因素（年龄、性别、气候带、饲养密度、垫料类型和更换频率）具有明确的动物管理意义。例如，高饲养密度、不合适的垫料类型（如漏缝地面）和低频次的垫料更换，都与感染风险显著增加相关。这强调了改进畜舍管理和卫生实践对于控制球虫病的重要性。
研究指出，球虫病是一种“人为制造的疾病”，其发生与饲养管理条件密切相关。在澳大利亚乳山羊产业集约化发展的背景下，本研究结果为制定基于证据的疾病控制计划提供了科学依据。作者建议实施年龄靶向的控制策略，重点关注羔羊和断奶羊的管理，通过改善饲养密度、优化垫料管理和加强畜舍卫生，来减少环境中的卵囊污染，从而降低感染压力。尽管研究中未报告临床球虫病病例，但高流行率和普遍存在的致病性虫种意味着亚临床感染可能对生产性能造成潜在影响。未来的研究需要进一步阐明不同艾美耳球虫虫种在山羊中的具体致病作用，以指导更精准的防控。总体而言，这项全面的流行病学调查为理解和管理澳大利亚乳山羊的球虫病奠定了重要基础，其发现对全球其他地区的山羊养殖业也具有借鉴意义。
