《Cellular Oncology》：Strategies to target PD-1/PD-L1 in the tumor microenvironment
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这篇综述系统梳理了肿瘤微环境中PD-1/PD-L1免疫检查点通路的调控机制与靶向策略。文章深入解析了PD-1在T细胞及PD-L1在肿瘤/非肿瘤细胞中的多重调控网络（如转录、翻译后修饰、非编码RNA等），并概述了以单抗、双抗、ADC为代表的新型抗体疗法。它为理解免疫治疗耐药机制、开发联合/新型疗法提供了全面视角，是肿瘤免疫治疗领域的重要参考。
在肿瘤免疫治疗飞速发展的今天，针对程序性死亡受体1（PD-1）及其配体PD-L1的免疫检查点阻断疗法已成为癌症治疗的革命性手段。然而，临床应答率有限及耐药问题促使科学家们深入探究肿瘤微环境中PD-1/PD-L1信号通路的精细调控网络，以期开发出更高效的新策略。
靶向T细胞中PD-1的调控机制
PD-1是T细胞上关键的抑制性受体，其表达受多重机制精密调控。一方面，多种因素可上调PD-1表达。例如，肿瘤细胞分泌的转化生长因子-β（TGF-β）可通过SMAD3增强PD-1转录，或通过p38/p-Ser-H3轴增加剪接因子SRSF3/5表达，进而促进PD-1 mRNA的核外转运与稳定。在肿瘤浸润淋巴细胞中，TOX蛋白与PD-1结合，促进其内吞与循环，维持其在CD8+T细胞表面的高表达。此外，二酰基甘油激酶ζ（DGKζ）、缺氧诱导因子1α（HIF-1α）通路、乳酸-NFAT1轴以及Notch1诱导的长链非编码RNA lncNDEPD1等，均被发现能在不同肿瘤模型中上调PD-1，加剧T细胞耗竭。
另一方面，也存在多种下调PD-1表达的机制。例如，蛋白原转化酶的失活可通过抑制Notch、钙离子/NFAT和NF-κB通路来降低PD-1表达。在蛋白稳定性层面，E3泛素连接酶FBXO38和c-Cbl可介导PD-1蛋白的泛素化降解。茶多酚表没食子儿茶素-3-没食子酸酯（EGCG）通过抑制NF-κB核转位降低PD-1。D-甘露糖通过促进PD-1的溶酶体降解途径降低其膜表达。细胞因子白介素-2（IL-2）则可通过其下游转录因子STAT5A竞争性结合PD-1启动子区域，抑制NFAT1的激活作用，从而降低PD-1转录。
这些研究表明，靶向调控PD-1表达的上游通路，是超越传统抗体阻断、旨在“釜底抽薪”的新兴治疗策略。
靶向肿瘤微环境中PD-L1的调控机制
PD-L1在肿瘤细胞上的表达同样受到多层级、多维度的复杂调控。
遗传与表观遗传调控扮演着“总开关”的角色。染色体9p24.1区段的扩增（包含CD274基因）是经典霍奇金淋巴瘤、小细胞肺癌等肿瘤中PD-L1高表达的重要原因。基因组的结构性变异可破坏PD-L1 mRNA的3‘-非翻译区（3’-UTR），增强其稳定性。超级增强子的存在也能同步驱动PD-L1和PD-L2的表达。在表观层面，组蛋白甲基转移酶MLL1催化形成的H3K4me3修饰、BRD4蛋白对超级增强子的识别以及组蛋白乙酰化水平的升高，均可激活PD-L1的转录。
转录水平调控是响应肿瘤微环境信号的关键环节。干扰素γ（IFN-γ）通过JAK-STAT-IRF1信号轴是诱导PD-L1表达的核心通路。核因子κB（NF-κB）、HIF-1α、c-Myc、Hippo通路效应分子YAP/TAZ以及激活蛋白1（AP-1）家族成员c-Jun等众多转录因子，都能在EGFR/MAPK、PI3K/AKT、DNA损伤应答等不同上游信号激活后，结合到PD-L1启动子区，驱动其表达。上皮-间质转化（EMT）过程也通过ZEB1、Snail等转录因子与PD-L1表达形成关联。
非编码RNA（如microRNA和长链非编码RNA）构成了转录后调控网络。miR-34a、miR-200、miR-142-5p、miR-424(322)等可直接结合PD-L1 mRNA的3‘-UTR促进其降解。反之，一些长链非编码RNA（如SNHG14、GATA3-AS1）可作为竞争性内源RNA“海绵”吸附这些miRNA，或通过稳定PD-L1蛋白，间接导致PD-L1水平升高。
翻译后修饰直接决定了PD-L1蛋白的“寿命”与功能。糖基化修饰（由STT3、B3GNT3等酶催化）可保护PD-L1免受糖原合酶激酶3β（GSK3β）介导的泛素化-蛋白酶体降解。棕榈酰化修饰（在C272位点）能稳定PD-L1膜蛋白。相反，磷酸化修饰（如AMPK在S195位点的磷酸化）会导致PD-L1异常糖基化和内质网相关降解。去泛素化酶CSN5、以及膜蛋白CMTM6/4则通过抑制PD-L1的泛素化降解或溶酶体途径，维持其蛋白稳定性。
值得注意的是，PD-L1并非肿瘤细胞“专属”。在肿瘤微环境中，巨噬细胞、树突状细胞、调节性T细胞以及癌症相关成纤维细胞等多种非肿瘤细胞也高表达PD-L1，它们共同构成了一个复杂的免疫抑制生态，影响着免疫检查点抑制剂的疗效与副作用。
靶向PD-1/PD-L2轴的调控
PD-1的另一个配体PD-L2同样不容忽视。PD-L2对PD-1的亲和力高于PD-L1，且还能结合排斥性导向分子b（RGMb），发挥独特的免疫调节功能。研究发现，PD-L2在多种肿瘤中独立于PD-L1表达，其高表达与不良预后及免疫治疗反应相关。例如，基质硬度可通过SMYD3/H3K4me3通路促进PD-L2表达。靶向PD-1/PD-L2轴，为克服PD-1/PD-L1单药耐药提供了新的思路。
靶向PD-1/PD-L1相互作用的抗体依赖性疗法
直接阻断PD-1与PD-L1的结合，是目前最成熟的临床策略，其药物形式也在不断革新。
单克隆抗体是奠基者。靶向PD-1的帕博利珠单抗（Pembrolizumab）、纳武利尤单抗（Nivolumab）等，以及靶向PD-L1的阿特珠单抗（Atezolizumab）、度伐利尤单抗（Durvalumab）等，已在多种癌症中获批应用，彻底改变了治疗格局。
双特异性抗体是升级方向。它们能同时阻断两个靶点，实现“一石二鸟”。例如，同时靶向PD-L1和TGF-β的双功能融合蛋白（如M7824），旨在同步解除免疫抑制信号和抑制纤维化微环境。靶向PD-L1/EGFR、PD-1/CTLA-4、PD-1/CTGF（结缔组织生长因子）等的双抗也展现出增强抗肿瘤免疫、改善肿瘤基质的潜力。
抗体偶联药物（ADC）与免疫刺激抗体偶联物（ISAC）是精准打击的“生物导弹”。它们将靶向PD-1/PD-L1的抗体与细胞毒药物（如MMAE）或免疫激动剂（如β-葡聚糖）相连，旨在将杀伤或激活效应精准递送至肿瘤微环境，在阻断检查点的同时直接杀伤肿瘤细胞或激活先天免疫。
此外，给药方式也在进化，皮下注射剂型（如恩沃利单抗，Envafolimab）的出现极大提升了用药便捷性与患者生活质量。
总结与展望
对PD-1/PD-L1通路在肿瘤微环境中复杂调控网络的深入揭示，不仅解释了现有免疫检查点抑制剂疗效差异与耐药机制，更为开发下一代疗法指明了方向。未来，结合表观遗传药物、靶向代谢、调控翻译后修饰、使用双特异性抗体或ADC等联合策略，或将能够更精准、更有效地重振机体抗肿瘤免疫，为更多癌症患者带来希望。
