一种基于荧光的高通量微孔板读取检测方法，用于测定植物组织中的总黄酮醇含量

《Plant Methods》：A high-throughput fluorescence-based microplate reader assay to quantify total flavonol levels in plant tissues

　　

摘要

背景

黄酮醇是植物特有的代谢物，能够调控植物的生长、发育以及应对胁迫的能力。由于其具有抗氧化作用，还能为人类健康带来益处。通常，检测植物组织中的黄酮醇含量依赖于高效液相色谱法或液相色谱-质谱法等色谱技术，或是利用二苯硼酸2-氨基乙酯（DPBA）染色进行显微镜观察。但这些方法耗时且需要大量资源。在此，我们提供了一种快速、高通量的基于荧光技术的微孔板读数法用于黄酮醇定量，该方法通过将针对黄酮醇的染料DPBA加入植物提取物中，形成荧光复合物。

结果

该检测方法经过优化以提高提取效率，并在灵敏度、准确性和重复性方面得到了验证。其检测结果与高效液相色谱法的测量结果一致。我们通过检测不同番茄品种以及不同植物物种的各类组织中的黄酮醇含量，证明了该方法的实用性。检测结果显示，番茄植株的生殖组织中的黄酮醇含量高于营养组织。此外，我们还发现不同实验室培育和商业培育的番茄果实表皮中黄酮醇含量存在差异，这表明我们的方法有望用于全基因组关联分析，以确定导致黄酮醇含量差异的遗传因素。最后，我们还检测了用于酿造饮料的不同植物的干叶中的黄酮醇含量。

结论

总之，该检测方法是一种简单、可靠且可大规模应用的黄酮醇筛查工具，可用于植物代谢、环境生理学、育种以及代谢工程等相关研究。