《Journal of Ethnopharmacology》：Sanhuang Xiexin Decoction Ameliorates Gastric Ulcers by Activating EGFR/PI3K/AKT Pathway Based on “Drug-Target-Metabolite” Network
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三黄泻心汤（SHXD）通过网络药理学和代谢组学揭示了其治疗胃溃疡（GU）的多靶点机制，证实EGFR和PIK3CA为核心靶点，抑制凋亡并促进上皮增殖，同时增强胃黏膜屏障功能。
刘新宇|吴学渊|王浩|方春林|范波|王晓|白瑞曦|刘玉彤|李文|韩莉
中国成都中医药大学现代中药产业学院药学院西南中药资源国家重点实验室，611137
摘要
民族药理学相关性
经典草药方剂三黄泻心汤（SHXD）被广泛用于治疗消化性溃疡。然而，其在胃溃疡（GU）中的具体治疗机制尚不清楚，需要进一步探索。
研究目的
本研究旨在基于“药物-靶点-代谢物”网络，阐明SHXD对胃溃疡的治疗作用。
材料与方法
通过UPLC-MS技术鉴定了大鼠血液中SHXD的主要成分。随后利用网络药理学和代谢组学方法，根据这些成分确定SHXD治疗胃溃疡的潜在靶点。生物信息学结果通过体内实验进行了验证。通过溃疡指数、病理评分、氧化应激和炎症反应来评估治疗效果。使用AB-PAS染色和免疫组化检测胃黏膜屏障功能。对胃组织进行Western blotting和RT-qPCR分析，以进一步研究SHXD治疗胃溃疡的机制。最后，通过分子对接验证活性成分与关键靶点的结合稳定性。
结果
在胃溃疡的治疗过程中，鉴定了SHXD中22种被血液吸收的成分。通过网络药理学和代谢组学分析发现，SHXD通过调节EGFR和PIK3CA关键靶点发挥抗胃溃疡作用。SHXD能够上调核心靶点EGFR，进而激活PI3K/AKT通路，促进上皮细胞增殖并抑制细胞凋亡。
结论
SHXD在缓解胃溃疡症状方面表现出显著疗效。这些发现为中医治疗胃溃疡的复杂机制提供了新的视角，突显了其同时作用于多条通路的能力。
引言
胃溃疡（GU）是指影响黏膜和肌肉层的穿透性坏死损伤（Baiubon等，2016）。由于其发病时间长、易复发和并发症多，患者常面临严重的心理和健康问题。胃溃疡的发生和发展是由于防御机制与破坏因素之间的平衡被打破所致（Almadi等，2024）。内源性侵袭因素主要包括胃酸和胃蛋白酶的过度分泌，以及幽门螺杆菌（Helicobacter pylori）的感染。外源性侵袭因素也与胃溃疡的形成有关，如吸烟和饮酒（Dunlap和Patterson，2019；Mota等，2009）。特别是酒精滥用是胃肠道疾病的常见诱因。过量饮酒会破坏胃黏膜的防御屏障，使黏膜直接暴露于胃酸和胃蛋白酶中，损伤上皮细胞并破坏黏液层（Ye等，2023）。此外，酒精还会刺激胃上皮细胞凋亡，增强中性粒细胞浸润，并引发炎症反应和氧化损伤（Hu等，2021）。胃溃疡的治疗主要涉及抑制胃酸和根除幽门螺杆菌（Sun等，2024）。尽管这些方法有效，但仍有显著的副作用。长期使用抑酸药物可能导致严重副作用，包括头痛和肠道菌群感染风险增加。长期使用抗生素还会导致耐药性的产生。停药后溃疡复发率可达60-80%（Gong等，2024）。因此，迫切需要安全有效的替代疗法来保护胃肠道。
中药在治疗胃溃疡方面越来越受到重视，因为它们具有多靶点作用、成分多样且副作用较少。三黄泻心汤（SHXD）是一种经典方剂，最早记载在张仲景的《金匮要略》中。它包含三种草药：大黄（Rhei Radix et Rhizoma）、黄连（Coptis chinensis Franch）和黄芩（Scutellaria baicalensis Georgi）（Wu等，2022）。SHXD具有苦寒性质，具有清泻胃火的功能（Chen等，2016）。当前的药理学研究表明，SHXD具有多种益处，包括抗炎（Gao等，2024）、抑菌、止血、保护胃黏膜和抑制肿瘤生长（Qi等，2024）。三黄泻心汤在中国临床试验中被广泛用于治疗消化系统疾病，如上消化道出血、慢性胃炎和消化性溃疡。组成SHXD的三种草药也对治疗消化性溃疡有效（He等，2021）。最近的研究表明，SHXD在溃疡性结肠炎中具有强大的抗炎作用，它可以抑制TLR4-MyD88-NF-κB信号通路，维持肠道屏障的完整性（Wu等，2022）。此外，SHXD还通过抑制炎症、氧化应激和胆汁淤积，显示出对DSS诱导的小鼠肝损伤的治疗潜力（Li等，2022）。值得注意的是，新兴证据表明，其全身效应与肠道微生物群的调节密切相关。SHXD可以丰富有益菌群，如乳酸菌和Muribaculaceae菌属，并促进短链脂肪酸的产生，从而发挥抗炎和屏障保护作用（Wei等，2018；Wu等，2022）。这些发现表明，SHXD对消化系统具有多靶点调节作用，为进一步研究其在胃溃疡中的分子机制提供了坚实的理论基础。
中医的理论框架基于整体观、系统化和网络理论，以“整体观念”和“基于中医辨证论治”为核心（Zhou等，2020）。这些特点也与网络药理学和代谢组学相一致。近年来，利用网络药理学和代谢组学技术研究了中药方剂的治疗效果，将药物靶点与特定代谢物联系起来，以阐明分子机制。
因此，本研究将结合网络药理学和代谢组学构建“药物-靶点-代谢物”网络，分析SHXD的作用靶点并探索其在胃溃疡中的潜在机制。
材料
SHXD的制备
根据记录，按重量比2:1:1将大黄（#1912062）、黄连（#2005052）和黄芩（#2006079）（由成都中医药大学药学院的金佩教授鉴定）混合。将这些草药浸泡在超纯水中（药物:水 = 1:10）30分钟，然后煮沸，再保持微沸40分钟。
血液中SHXD主要成分的鉴定
图1展示了SHXD处理后的血清在离子化模式下的UPLC-Q-TOF-MS结果。与自建数据库和参考物质的信息进行比较，确定了SHXD总离子色谱图中的成分离子峰。结果鉴定出22种原型化学成分，其中7种来自大黄（DH），5种来自黄连（HL），12种来自黄芩（HQ）。此外，HL和HQ有一个共同的成分。
讨论
胃溃疡在胃肠道疾病中较为常见。饮酒会损伤胃细胞，导致胃溃疡的发展，严重情况下可能引发胃癌。近年来，中医因其多成分、多靶点和多通路的作用而受到全球关注。作为治疗消化性溃疡的经典方剂，三黄泻心汤具有抗炎和抗菌作用。
结论
本研究通过网络药理学、代谢组学和体内验证，阐明了SHXD对胃溃疡的治疗作用，建立了“药物-靶点-代谢物”网络。药效学分析表明，SHXD不仅具有强烈的抗炎和抗氧化作用，还能通过上调紧密连接蛋白增强胃黏膜屏障功能。结合网络药理学和代谢组学分析，发现EGFR和PIK3CA可能是关键靶点。
作者贡献声明
刘玉彤：研究、数据管理。
李文：撰写-审稿与编辑、资金获取、概念构思。
韩莉：撰写-审稿与编辑、监督。
刘新宇：撰写-初稿、方法学、研究、数据管理。
吴学渊：研究、数据分析。
王浩：方法学、研究。
方春林：监督。
范波：研究、数据分析。
王晓：方法学、研究。
白瑞曦：研究。
资助声明
本研究得到了国家自然科学基金（81903812）、四川省自然科学基金（2025ZNSFSC0599）和四川省中医药管理局科技计划（2023MS532）的支持。
利益冲突声明
? 作者声明没有已知的财务利益或个人关系可能影响本文的研究结果。
