平行CRISPR筛选技术揭示了调控细胞表面吸引剂受体FPR1水平的信号通路

《Communications Biology》：Parallel CRISPR screens reveal pathways controlling the cell surface levels of the attractant receptor FPR1

　　

摘要

化学趋化因子通过激活相应的受体，在免疫细胞中引发强烈的趋化反应和细胞毒性反应。细胞表面受体的水平控制着这些反应的敏感性，这对于在不引发过度炎症的情况下实现有效反应至关重要。趋化因子受体FPR1的表面水平通过其合成与清除之间的平衡来调节，这种平衡会受到受体激活和其他刺激的影响。尽管这种调节对于产生适当的免疫反应非常重要，但其背后的机制仍不明确，包括经典的内吞作用调控因子的作用。我们采用聚焦方法和全基因组水平的研究方法来探讨这些问题。研究发现，受体激酶GRK6与GRK2和GRK3协同作用触发FPR1的内吞过程；内吞途径既包括不依赖于β-阻遏素的路径，也包括涉及β-阻遏素1和β-阻遏素2的路径。此外，我们通过两项并行的CRISPR/Cas9筛选实验，对调控FPR1生物发生、表面表达、回收及内吞过程的因子进行了分类分析。我们确定了formin蛋白mDia1和小GTP酶ARF6是FPR1内吞过程的特异性调节因子，并通过化学抑制剂在原代人中性粒细胞中验证了这一发现。最后，我们发现ARF6参与了不依赖于β-阻遏素的内吞途径。综上所述，我们的研究结果不仅系统性地阐明了FPR1表面水平的调控机制，还为化学趋化因子受体所利用的其他内吞途径提供了新的见解。