摘要
传统中药处方具有复杂的化学成分和成分含量的广泛差异，这给对其进行全面分析带来了很大挑战。黄芩汤（Huangqintang Decoction, HQD）是一种以清热解毒功效著称的经典中药方剂，主要由黄芩（Scutellariae Radix）、赤芍（Paeoniae Radix Rubra）、甘草（Glycyrrhizae Radix et Rhizoma）和红枣（Jujubae Fructus）组成。在本研究中，我们开发了一种离线二维液相色谱技术，解决了传统分析法对未分离提取物的局限性（如峰容量有限，容易导致微量成分被掩盖的问题）。通过将该技术与超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱（UHPLC-Q-TOF/MS）结合使用，成功快速识别并分析了Huangqintang Decoction的完整化学成分谱。该方法不仅实现了高通量识别，还利用特征碎片离子和反相色谱行为区分了某些黄酮苷类和三萜皂苷的异构体，展示了其在结构鉴定方面的深度能力：黄酮苷类异构体通过特征中性丢失现象进行区分；黄烷酮和查尔酮类化合物则分别通过Retro-Diels–Alder（RDA）反应和β-重排反应进行鉴定；三萜皂苷异构体则通过苷元特异性裂解途径及RDA反应进行推断。最终共鉴定出192种化合物，包括88种黄酮类、80种三萜类、7种单萜糖苷、3种脂肪酸酰胺、3种苯乙醚糖苷、4种香豆素、3种糖类、1种有机酸以及其他3种化合物。本研究证明，离线二维液相色谱技术显著提高了色谱分辨率，并扩大了对微量成分的检测范围，为复杂中药方剂中的化合物进行全面鉴定提供了有效方法。
