一种一锅法CRISPR/Cas12b检测技术，无需提取即可实现流感嗜血杆菌（Haemophilus influenzae）的可视化检测

《BMC Microbiology》：A one-pot CRISPR/Cas12b assay for extraction-free and visual detection of Haemophilus influenzae

　　

摘要

流感嗜血杆菌是一种主要的呼吸道病原体，尤其是在儿童人群中，其快速准确的检测对于早期诊断和针对性治疗至关重要。传统的诊断方法，如细菌培养和PCR，通常耗时较长且需要专用设备。在这项研究中，我们开发了Hi-ExCad检测方法，这是一种基于CRISPR/Cas12b技术的单步、无需提取样本的检测系统，能够快速、简便且准确地检测流感嗜血杆菌。该检测方法将环介导等温扩增和CRISPR/Cas12b检测集成在一个反应体系中，从而可以直接从临床痰液样本中检测目标病原体，无需进行核酸提取。Hi-ExCad检测方法表现出高度的特异性，能够在临床样本中准确识别流感嗜血杆菌，其检测限低至1皮克（pg）的基因组DNA。此外，该方法在实时检测和蓝光下的结果可视化方面也表现出色，非常适合用于即时检测（point-of-care testing）和资源有限的检测环境。这些结果表明，Hi-ExCad检测方法是一种快速、可靠且用户友好的流感嗜血杆菌检测手段，在临床应用中具有巨大潜力。