从香蕉果柄废弃物到多酚和生物乙醇:一种生物精炼方法及其在多酚抑制过程中的动力学研究

《Biomass and Bioenergy》:From banana peduncle waste to polyphenols and bioethanol: A biorefinery approach and phenolic inhibition kinetics

【字体: 大 中 小 】 时间:2026年04月08日 来源:Biomass and Bioenergy 5.8

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  香蕉茎作为双功能原料在生物精炼中用于生产乙醇和回收多酚。研究显示四阶段超声辅助提取可回收46.01 mg GAE/g dw多酚(如儿茶素、表儿茶素等),不影响乙醇产量达24 g/L(水解产率80%)。直接发酵浓缩汁液时,浓度倍增使乙醇产量从23.07增至35.41 g/L,但最大发酵速率从0.95降至0.21 g/L·h,表明高浓度多酚抑制发酵,抑制阈值IC50为0.49 mg GAE/g BP。提出选择性吸附多酚或利用耐受性酵母菌株的策略。

  
埃斯特·奥尔蒂斯-卢纳(Esther Ortiz-Luna)|塞萨尔·莫雷拉(Cesar Moreira)|克里斯蒂娜·阿尔瓦雷斯(Cristina Alvarez)|安娜·伊莎贝尔·苏斯莫萨斯(Ana Isabel Susmozas)|何塞·米格尔·奥利瓦(José Miguel Oliva)|A.索克拉特斯·帕拉西奥斯-庞塞(A.Sócrates Palacios-Ponce)
厄瓜多尔瓜亚基尔市,Gustavo Galindo校区,ESPOL滨海高等理工学院机械工程与生产科学学院,Perimetral公路30.5公里处,邮编090902

摘要

本研究评估了香蕉茎(BP)作为双用途原料在生物精炼厂框架中的潜力,用于生物乙醇生产和酚类化合物的回收,分析了多酚提取和酚类含量对发酵性能的影响。通过四阶段超声波辅助提取方法回收了大量的多酚(46.01毫克GAE/克干重),这一过程并未对后续的乙醇生产过程产生负面影响。最终乙醇产量约为24克/升,水解产率为80%(葡萄糖产量为52克/升),相当于理论最大值的93%。化学分析鉴定出多种酚类化合物,包括儿茶素、表儿茶素、芦丁、芹菜素、山柰酚以及邻苯二甲酸和丁香酸。这些结果表明,可以从香蕉茎中回收有价值的酚类化合物,而不会影响其作为生物乙醇生产原料的用途。此外,还评估了直接发酵提取和浓缩后的香蕉茎汁的效果,以减少固体处理所需的能量。结果表明,随着果汁浓度的增加,还原糖和酚类化合物的含量也随之增加,从而影响发酵性能。在5倍和10倍浓度下,乙醇产量分别达到了23.07克/升和35.41克/升。然而,动力学建模显示最大发酵速率(Vmax)逐渐下降,从5倍浓度时的0.95克/升·小时降至10倍浓度时的0.63克/升·小时,再到15倍浓度时降至0.21克/升·小时。估计出多酚的抑制阈值(IC50)为0.49毫克GAE/克香蕉茎,说明5倍浓度就已经达到了半最大抑制水平,而更高浓度则显著超过了这一阈值。采用选择性吸附酚类化合物或使用耐酚酵母菌株等策略可能有助于减轻这种抑制作用。

引言

香蕉是许多热带和亚热带国家的主要食物和出口商品。根据联合国粮食及农业组织(FAO)的数据,香蕉是全球交易最广泛的水果之一。香蕉生产促进了农业发展,创造了就业机会,并维持了复杂的国际供应链。
厄瓜多尔是全球最大的香蕉出口国,每年生产约720万吨卡文迪许(Cavendish)香蕉[1]。香蕉产业是该国第二大经济部门,每年创造约30亿美元的收入[2]。然而,大规模生产会产生大量的木质纤维素废弃物,包括香蕉皮、假茎和茎部。每生产一吨香蕉,大约会产生2.13吨废弃物[3]。在厄瓜多尔,这相当于265万吨干残余生物质,如果管理不当,这些废弃物会降低土壤质量、污染水源并增加温室气体排放[2,4]。
鉴于人口持续增长和对能源需求的增加,农业废弃物因其木质纤维素成分而被广泛用于生物乙醇生产[[5], [6], [7]]。生物乙醇被视为化石燃料的有效替代品,并因能减少净温室气体排放而获得广泛认可。自2020年以来,全球生物乙醇产量每年增长4.2%。虽然小麦秸秆、玉米秸秆和稻壳常用于生物乙醇合成[[8], [9], [11]],但香蕉茎(BP)仍是一种丰富但未得到充分利用的副产品。香蕉茎约占香蕉植物总生物量的13%[12]。由于其纤维含量[13,14]、生产细菌纳米纤维素的能力[4]以及用于纤维素乙醇生产的潜力[15](其中优化了水解参数,获得了适合用S. cerevisiae发酵的80克/升葡萄糖),香蕉茎已有多种应用前景。
处理香蕉茎的一个主要挑战是其高水分含量(约90%),这使得干燥过程成本高昂且能耗大。采用双流程生物精炼方法,先提取香蕉茎汁再处理剩余的固体木质纤维素部分,可以克服这一限制。由于香蕉茎提取物中的可发酵糖含量较低,因此需要对其进行浓缩。然而,先前的研究表明,在果汁发酵过程中酵母会受到天然多酚的抑制。虽然木质纤维素水解物中的抑制通常归因于预处理产生的降解产物,但香蕉茎汁中的抑制可能是由于其中特定类型的天然多酚会破坏酵母细胞膜并阻碍发酵[16]。尽管在自然环境中,某些多酚(如儿茶素和邻苯二甲酸)作为植物化学防御系统的一部分,保护组织免受微生物侵袭,并参与生物“军备竞赛”[17,18],但在发酵过程中,这些多酚可能会干扰或抑制乙醇生产。因此,控制微生物污染至关重要。在工业环境中,如果对竞争性微生物管理不当,乙醇损失可能超过1%体积比[19]。香蕉茎中的多酚含量具有杀菌作用,因此本研究不使用额外的杀菌剂。该方法评估了天然酚类化合物(以活性形式存在)对发酵过程的影响。
果汁提取后的剩余物质为木质纤维素。因此,在预处理过程中需要对其进行高温处理以释放糖单体。然而,由于高浓度的酚类化合物会干扰酵母膜完整性并影响发酵性能[[20], [21], [22]],本研究将酚类化合物的去除视为纤维预处理步骤,同时保留酚类化合物作为副产品。这种初步的酚类化合物提取方法有两个优点:既能回收高价值化合物,又能降低发酵前的底物中的酚类负荷。
将酚类化合物的回收作为初始步骤,使这种生物精炼模型能够将农业废弃物转化为食品、制药和化妆品行业的有价值产品[23,24],同时生产可持续的生物乙醇。这种循环策略减少了环境影响,满足了全球对可再生能源日益增长的需求。因此,控制生物质衍生底物中的酚类含量对于维持高效的发酵过程至关重要[19]。在此背景下,不应将酚类化合物的固相提取视为孤立步骤,而应视为多产品生物精炼过程中的战略第一步。
因此,本研究旨在通过生物精炼方法提高香蕉茎的附加值,具体内容包括:(i) 使用标准程序[15,25]中的乙醇红菌株(Ethanol red strain)研究纤维素乙醇的生产及其受先前酚类提取的影响;(ii) 直接发酵浓缩后的香蕉茎汁,重点研究酚类化合物在发酵抑制中的作用,使用从香蕉废弃物中分离出的野生S. cerevisiae菌株,基于这样的假设:本地适应的酵母可能对香蕉环境中存在的特定抑制剂具有更强的耐受性。

材料与方法

实验过程如图1所示。

多酚提取

根据2.2.1节中的协议,从香蕉茎内部核心提取多酚。初步测试表明,冷冻干燥结合超声波辅助提取(UAE)使用90%乙醇可以获得最高的多酚含量。虽然托盘干燥得到的结果略低,但差异不具有统计学意义。选择UAE方法是因为它可以通过破坏细胞壁促进酚类物质的释放[29],其中90%乙醇对酚类物质的亲和力最强

结论

本研究证明了顺序生物精炼方法的可行性,该方法可以全面利用丰富的未充分利用的香蕉茎废弃物。我们成功证明香蕉茎汁可以作为回收高价值生物活性化合物和生物乙醇的双用途原料。
化学分析鉴定出多种酚类化合物,包括儿茶素、表儿茶素、芦丁、芹菜素、山柰酚以及相应的酚酸

CRediT作者贡献声明

埃斯特·奥尔蒂斯-卢纳(Esther Ortiz-Luna):数据整理、正式分析、研究、方法论、验证、初稿撰写。塞萨尔·莫雷拉(Cesar Moreira):概念构思、正式分析、研究、监督、审稿与编辑。克里斯蒂娜·阿尔瓦雷斯(Cristina Alvarez):正式分析、资源准备、审稿与编辑。安娜·伊莎贝尔·苏斯莫萨斯(Ana Isabel Susmozas):正式分析、资源准备、审稿与编辑。何塞·米格尔·奥利瓦(José Miguel Oliva):正式分析、资源准备、审稿与编辑。A.索克拉特斯·帕拉西奥斯-庞塞(A.Sócrates Palacios-Ponce):概念构思。

利益冲突声明

作者声明没有已知的财务利益或个人关系可能影响本文的研究结果。

致谢

作者感谢滨海高等理工学院食品科学硕士项目提供的研究奖学金(决议编号:CAPMCA-FIMCP-2024-05-05-007)。作者还要感谢ESPOL的Joan Vera教授和UNEMI的Manuel Fiallos-Cárdenas教授对本项目的宝贵贡献,包括技术支持和实验室设施及设备的使用权。作者同时感谢CEPEDSA商业公司
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