《Applied Animal Behaviour Science》：A novel behaviour-based stress score for donkey – horse hybrids during restraint
编辑推荐：
本研究开发并评估了用于骡子（马与驴杂交种）压力水平的行为评分系统，通过改进观察者间可靠性（ICC从0.74提升至0.78），为提升杂交动物福利和操作安全性提供工具。
作者：Kayna Prescott、Hannah Boocock、Laura Kubasiewicz
研究地点：Equine Behaviour，The Donkey Sanctuary，Sidmouth，Devon EX10 0NU。联系电话：07815 431193
摘要
驴与马的杂交后代（骡子和母驴）是研究最少的马科动物之一，目前关于它们行为的认知大多基于经验性观察。这些杂交后代同时表现出两种亲本物种的行为特征，这可能导致在压力较大时行为被误判，并可能引发攻击性行为。因此，开发一种通过行为指标来评估压力水平的方法对于提高杂交后代的福利和人类安全至关重要，尤其是在进行兽医操作时。基于对马和驴的行为学研究及疼痛反应指标，我们开发并评估了一种用于评估杂交后代在处理过程中压力水平的行为评分系统。在初步测试中，由受过培训的处理人员对20只杂交后代进行了评估；在评分系统完善后，又对50只杂交后代进行了测试。评分系统的可靠性从“中等”（ICC=0.74，95% CI=0.62-0.84）提高到了“良好”（ICC=0.78，95% CI=0.72-0.83）。这种评分系统有助于更深入地了解这些较少被研究的马科动物，并能在训练和兽医操作中改善它们的福利。
引言
驴与马的杂交后代（以下简称“杂交后代”）在行为学和饲养管理方面的研究相对较少（McLean等人，2019b；McLean等人，2019a；Orth等人，2020）。尽管人们对马（McDonnell，2003；Kelly、McDuffee和Mears，2021）以及驴（Seganfreddo等人，2022；De Santis等人，2021）的研究较多，但关于杂交后代行为的知识主要来自饲养人员的经验性描述。当两种亲本物种杂交时，杂交后代会表现出两种亲本的特征，这些特征因个体差异而异，使得行为解读变得复杂（McLean等人，2019a；McLean等人，2019b；Proops等人，2009）。在压力下，杂交后代可能会从驴典型的忍耐行为转变为马典型的逃避行为。由于杂交后代兼具两种亲本的生理优势，饲养人员常常使用强制性的设备和训练方法来控制它们（McLean等人，2019a）。研究表明，杂交后代并非天生具有攻击性，而是由于不良的训练或粗暴的对待方式才表现出攻击行为（McLean等人，2019a；Ali等人，2019）。与熟悉的饲养人员相比，它们会对陌生人员表现出更高的攻击性，包括咬伤和踢打等威胁行为。研究表明，通过改善训练和饲养方式，可以减少这些行为的发生。杂交后代对熟悉饲养人员的反应通常更为积极，有利于日常管理和医疗护理（McLean等人，2019b；McLean等人，2019a）。然而，对于不熟悉的饲养人员，它们可能会表现出强烈的抵触情绪，增加了工作的难度。由于饲养人员和专业人士往往难以察觉杂交后代的疼痛或恐惧信号，因此了解它们的行为特征和压力指标对于保护它们的福利和确保饲养人员的安全至关重要。
行为可以通过多种方式进行测量，包括生理指标和行为评分。观察行为是一种非侵入性、客观且易于实施的方法（Minero等人，2018；Young等人，2012）。虽然已经有一些评分系统用于评估马和驴的疼痛、福利和压力水平（Young等人，2012；Regan等人，2014；Raw等人，2020；Orth等人，2020），但目前尚缺乏专门针对杂交后代的评分系统。开发一种可靠的评分系统，能够从细微的生理变化到明显的行为表现全面反映压力情况，有助于饲养人员和专业人士及时识别潜在的问题，从而预防不良行为的升级。
本研究旨在开发一种易于使用的评分系统，以便在处理过程中准确评估杂交后代的压力水平，从而改善它们的心理状态和整体福利。在人员流动频繁的慈善机构环境中，这种系统有助于监控训练进展，并帮助那些不熟悉杂交后代行为的人做出是否继续进行处理的决策。
研究目的：开发一种可供不同评估人员使用的评分系统，以准确识别杂交后代的压力行为。
伦理审批
本研究获得了The Donkey Sanctuary的研究与伦理审查委员会（RERC）的批准，项目代码为TDS_I_2024_01-07，批准日期为2024年7月1日。所有参与研究的工作人员均收到了项目详细信息，并签署了知情同意书。整个研究过程严格遵循了The Donkey Sanctuary的动物研究伦理准则。
动物与管理
本研究使用的杂交后代由一家慈善机构拥有和饲养。
结果
在初步测试阶段，“关闭门”处理措施获得了20个评分，“触摸颈部”处理措施获得了18个评分；在评分系统完善后，“关闭门”处理措施获得了50个评分，“触摸颈部”处理措施获得了44个评分。其中仅有一只杂交后代在测试过程中拒绝进入处理区域。评分系统的评分者间可靠性在系统完善前为“中等”（ICC=0.74，95% CI=0.62-0.84），完善后为“良好”（ICC=0.78，95% CI=0.72-0.83）。讨论
我们开发了一种具有良好评分者间可靠性的行为评分系统，使受过培训的饲养人员能够实时评估杂交后代的压力水平，从而在可能引发行为误解、增加压力或影响动物和饲养人员福利的情况下，实现客观、一致的评估。通过识别杂交后代的压力信号，饲养人员可以及时调整饲养和训练方式。研究的局限性
该评分系统的开发是在特定的处理环境中进行的，这可能会影响某些行为的表达。未来需要在不同环境和不同类型的杂交后代群体中进一步验证其可靠性。此外，该评分系统由经验丰富的饲养人员开发和完善，未来还需要在不同类型的饲养人员中进行更多测试。
结论
我们开发的评分系统是首个标准化工具，可用于评估杂交后代的压力水平，帮助饲养人员根据评估结果调整训练和饲养方法，从而提高人类和动物的安全与福利。该系统为评估杂交后代的压力相关行为提供了结构化的框架，且评分结果在不同评估者之间具有较高的一致性。未来需要在更多场景下对该系统进行进一步测试，例如在不同类型的约束条件下。未引用的参考文献
(Carlson等人，2019；de S. Arruda等人，2022；McDonnell，2003；Prescott等人，2002)
CRediT作者贡献声明
Kayna Prescott：负责撰写、审稿与编辑、初稿撰写、项目管理、方法论设计及概念框架构建。
Laura Kubasiewicz：负责撰写、审稿与编辑、数据验证及正式分析。
Hannah Boocock：负责撰写、审稿与编辑、初稿撰写、方法论设计及概念框架构建。
利益冲突声明
作者声明不存在可能影响本研究结果的财务利益或个人关系。
致谢
感谢慈善农场的所有工作人员，他们为杂交后代的照顾付出了巨大努力，并在信息收集方面给予了我们大力支持。特别感谢那些自愿参与讨论压力评分系统的人员。本研究未获得任何公共、商业或非营利机构的资助。
