《Hemoglobin》：SickleInAfrica Consortium: A Seven-Country Study Evaluating the Performance of Dried Blood Spot Point-of-Care Testing in Newborn Screening for Sickle Cell Disease
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为解决非洲地区镰状细胞病（SCD）新生儿筛查（NBS）因标准诊断方法（如IEF、HPLC）存在物流壁垒而难以普及的问题，SickleInAfrica联盟在七国开展研究，评估基于干血斑的床旁检测（DBS-POCT）技术HemoTypeSC的诊断准确性。研究证实DBS-POCT在多数环境中检测HbAA、HbAS具有高灵敏度，且在多个国家检测SCD亚型时表现优于标准POCT。这为在资源有限地区扩大SCD新生儿筛查提供了可行、可扩展的解决方案。
在撒哈拉以南非洲，镰状细胞病（Sickle Cell Disease, SCD）是严峻的公共卫生挑战，每年约有20万新生儿受影响。若不进行早期诊断和干预，高达50%的患儿可能在五岁前夭折。虽然新生儿筛查（Newborn Screening, NBS）项目已被证明能有效提高患儿生存率，但在非洲的广泛实施却面临重重障碍。传统的实验室诊断方法，如等电聚焦（Isoelectric Focusing, IEF）、高效液相色谱（High-Performance Liquid Chromatography, HPLC）和醋酸纤维素电泳，通常价格昂贵，需要稳定的电力供应、专业的操作人员及集中的实验室设施，这些在资源有限的环境中构成了难以逾越的物流和成本壁垒。因此，寻找一种稳定、简单、可大规模推广的替代筛查方法，成为突破非洲SCD防治瓶颈的关键。
为了应对这一挑战，SickleInAfrica联盟的研究人员将目光投向了干血斑床旁检测（Dried Blood Spot Point-of-Care Testing, DBS-POCT）。这种方法巧妙结合了床旁检测（Point-of-Care Testing, POCT）的即时性与干血斑样本的稳定性和便于运输的优势。其流程是，在免疫诊所或产后病房通过足跟采血获取新生儿血样，滴在滤纸上制成干血斑，干燥后既可现场用快速检测试纸条（如HemoTypeSC）进行分析，也可批量运送到中心实验室进行检测。这为整合到现有的公共卫生项目（如预防艾滋病母婴传播项目）中提供了可能。然而，DBS-POCT在实际大规模筛查中的诊断性能如何？与标准POCT相比孰优孰劣？在不同国家和操作环境下表现是否稳定？这些问题尚未在非洲多国范围内得到系统评估。
为此，一项在非洲七国（尼日利亚、马里、坦桑尼亚、加纳、乌干达、津巴布韦和赞比亚）开展的多中心研究于《Hemoglobin》期刊上发表。该研究旨在评估基于HemoTypeSC试剂的DBS-POCT，在新生儿（0-3月龄）中筛查SCD的诊断准确性，并与标准POCT以及金标准实验室方法（IEF或HPLC）进行对比，以期为在资源有限的撒哈拉以南非洲地区推广SCD新生儿筛查提供关键证据。
研究人员开展了一项探索性序贯混合方法评估。研究在七个国家的免疫接种门诊、产房和产后病房招募了705名0-3月龄的新生儿。首先，在现场使用标准HemoTypeSC POCT对足跟血进行即时检测，结果当天告知参与者家属。同时，采集新生儿的干血斑样本，在空气中干燥至少3小时后，运送到临床实验室。在实验室中，对干血斑样本进行洗脱，然后同样使用HemoTypeSCTM标准流程进行检测（即DBS-POCT）。所有经DBS-POCT或标准POCT初筛为SCD阳性的样本，均通过IEF或HPLC进行确认。通过比较标准POCT、DBS-POCT与金标准（IEF/HPLC）的结果，计算灵敏度、特异性、阳性预测值（PPV）和阴性预测值（NPV）等指标，以全面评估两种筛查方法的性能。
研究结果揭示了DBS-POCT在非洲多国环境下的诊断表现、国别差异及其相对于标准POCT的优势。
在研究人群与SCD亚型分布方面，共纳入了705名新生儿，男女比例均衡。金标准检测显示，大多数新生儿（80.6%）为正常血红蛋白类型（HbAA），12.6%为镰状细胞特征（HbAS），镰状细胞病（HbSS）和血红蛋白C特征（HbAC）分别占1.3%和3.0%，亚型频率在不同国家间存在差异。
关于DBS-POCT与POCT的整体诊断性能，与金标准相比，DBS-POCT在联盟总体水平上对HbAA和HbAS表现出高灵敏度（分别为0.95和0.93），对HbSS为中等灵敏度（0.78），对HbAC灵敏度较低（0.39）。其特异性在所有亚型中均很高（≥0.89）。相比之下，标准POCT对HbAA的灵敏度很高（0.98），但对HbAS、HbSS和HbAC的灵敏度均有降低（分别为0.85， 0.50， 0.50）。两种方法的阴性预测值（NPV）在所有亚型中都很强（≥0.90）。
在国家层面的性能分析中，DBS-POCT在多个国家的表现优于或等同于标准POCT。例如，在尼日利亚，两种方法对HbAA、HbAS和HbSS都表现出近乎完美的诊断性能。在坦桑尼亚，DBS-POCT对HbAA、HbAS和HbSS展现出完美或接近完美的灵敏度，而标准POCT则未能检测出任何HbSS病例。在乌干达，DBS-POCT检测HbSS的灵敏度为100%，而标准POCT为67%。在马里，DBS-POCT对HbAC的灵敏度（0.88）高于标准POCT（0.67）。然而，在加纳，两种方法对罕见亚型（如HbSS和HbAC）的诊断性能均有限。
检验一致性与统计比较显示，尽管两种方法在大多数病例上分类一致，但DBS-POCT比标准POCT识别出更多的新生儿患有SCD。麦克尼马尔检验（McNemar’s test）表明，这两种方法在分类上存在显著差异，DBS-POCT检出SCD的几率是标准POCT的3.7倍，提示DBS-POCT在筛查中可能具有更高的灵敏度。
在医护人员培训方面，各国参与研究的医护人员类别不同，包括医生、护士、实验室技术员和数据收集员等。所有关键人员均在研究开始前接受了基于制造商官方指南的标准化协议和DBS-POCT操作培训，但各国在操作人员经验、现场监督和实践强度上可能存在差异，这可能是导致国别间检测性能差异的因素之一。
研究的讨论与结论部分对上述发现进行了深入剖析并总结了其重要意义。总体而言，这项多国研究证实，DBS-POCT在检测HbAA和HbAS方面表现出高灵敏度，对HbSS具有中等灵敏度，但对HbAC灵敏度较低。其特异性在所有SCD亚型中始终保持在高水平，且阴性预测值很强，表明DBS-POCT阴性结果高度可靠。更重要的是，在大多数参与国，DBS-POCT在检测HbAA、HbAS和HbSS方面比标准POCT更有效。
性能的国别差异凸显了实施环境的重要性。DBS-POCT通常在受控的实验室环境中由训练有素的人员操作，减少了光照、湿度和用户判读等现场干扰因素带来的误差。而标准POCT则在繁忙的临床区域进行，条件和操作者专业知识参差不齐。虽然DBS-POCT涉及延迟检测和较长的结果返回时间，但它在质量保证、批量处理和集中监督方面具有优势，特别是当整合到用于早期婴儿HIV诊断的现有干血斑运输网络中时。尽管缺乏分子遗传学确认作为额外金标准是本研究的局限性之一，但IEF/HPLC在非洲常规条件下仍是标准的确认检测方法。
本研究最重要的意义在于，其结果为在资源有限的撒哈拉以南非洲地区扩大SCD新生儿筛查提供了一个切实可行且可扩展的方案。DBS-POCT结合了POCT的便利性与干血斑的稳定性，使得在偏远诊所采集样本并集中检测成为可能，有助于扩大筛查覆盖面。将其整合到现有的妇幼保健服务中，可以显著改善SCD患儿的早期诊断和护理，从而降低五岁以下儿童死亡率，为应对非洲这一沉重的公共卫生负担带来了新的希望。
