一种简化的腺苷乙烯基磺酰胺探针合成方法，用于模拟NRPS中的氨基酰-AMP

《ChemBioChem》：A Streamlined Synthesis of Adenosine Vinylsulfonamide Probes for Aminoacyl-AMP Mimicry in NRPS

本研究开发了一种以N-叔丁氧羰基氨基酸醇为起始物的三步合成法，在低温和开放空气中通过Ba(OH)2介导的Horner反应高效制备具有高立体选择性的Adenosine vinylsulfonamide探针，有效抑制差向异构化，适用于多种氨基酸衍生物（如电子富集L-色氨酸），LC-MS/MS证实其与SfmC共价结合并保持功能。

　　

摘要

腺苷乙烯基磺酰胺（AVS）探针通过模拟氨基酰-AMP中间体，为稳定非核糖体肽合成酶（NRPSs）中的硫酯化状态提供了一种有效的方法。现有的合成策略使得这类探针得到了广泛的应用，但它们通常依赖于强碱性条件来构建关键的C?C键，而α-氨基醛作为底物本身容易发生差向异构化。这些特性限制了从非蛋白质生成氨基酸制备AVS衍生物的可能性，而许多这类氨基酸在NRPS介导的天然产物生物合成中起着核心作用。为了解决这些问题，我们开发了一种简洁的三步合成方法，该方法从N-Boc氨基醇开始，在操作简单且立体化学可控的条件下进行。在接近0°C的温度下，使用预先组装好的腺苷磷酰磺酰胺作为Ba(OH)₂介导的Horner反应的偶联伙伴，能够在温和的开放空气条件下高效地形成AVS，并且差向异构化程度极低。该方法能够耐受多种氨基酸衍生的底物，包括与四氢异喹啉生物合成相关的富电子L-酪氨酸衍生物。通过LC–MS/MS进行的功能评估证实，L-酪氨酸衍生的探针能够与NRPS的SfmC发生共价结合，表明通过此方法制备的AVS构建体仍保持完全的生化活性。这种简化的合成方法提高了获得立体化学性质明确的AVS探针的可靠性，并支持了对多种NRPS系统的结构和机制研究。

图形摘要

一种简洁的三步合成方法可以在温和条件下制备出氨基酸衍生的腺苷乙烯基磺酰胺（AVS）探针。Ba(OH)₂介导的偶联反应抑制了差向异构化，从而获得了立体化学性质明确的探针，这些探针能够与非核糖体肽合成酶（NRPS）的硫酯化状态发生共价结合。LC–MS/MS的结果证实了AVS探针与NRPS SfmC之间的功能性相互作用，为机制和结构研究提供了支持。

利益冲突

作者声明没有利益冲突。

数据可用性声明

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