雄性鱼对半人工繁殖方法的反应（包括使用或不使用激素刺激剂），以及这种方法对非洲鲶鱼（Clarias gariepinus）亲鱼体内血液类固醇激素浓度、繁殖指标和生产效率的影响

《Italian Journal of Animal Science》：Response of males to semi-artificial spawning with or without the use of hormonal stimulants and its effect on concentrations of blood steroid hormones, fecundity indicators, and productive efficiency of African catfish Clarias gariepinus broodstock

　　摘要：迄今为止，对于在半人工条件下雄性非洲鲶鱼（Clarias gariepinus）交配时使用的激素诱导方法及其剂量的有效性评估关注甚少。因此，本研究旨在探讨对雄性非洲鲶鱼进行激素注射的可行性及其对生殖生理、繁殖能力和幼鱼产量的影响。实验设计了四种处理方式，并各重复两次：对照组（T0）：不向雄性和雌性注射激素；T1：雄性和雌性注射相同剂量的激素；T2：雄性注射雌性剂量一半的激素；T3：仅向雌性注射激素。亲鱼以每立方米水10条的比例随机放入产卵池中，性别比为1:1。注射标准剂量的人绒毛膜促性腺激素（hCG：1500 IU）后24小时，采集血液样本并测量一些形态学参数（亲鱼重量、性腺重量和卵粒直径），以研究生理变化并计算性腺体指数。结果表明，激素诱导是促进非洲鲶鱼雌性产卵并生产高质量幼鱼的重要手段。此外，接受hCG处理的组在大多数血液性激素、形态学和繁殖参数指标上没有显著差异，但T3组的每公斤亲鱼所产生的幼鱼数量最少。本研究为最大化激素刺激在鲶鱼养殖中的经济效益提供了关键信息。

**亮点：**
- 激素诱导是促进非洲鲶鱼产卵的有效方法。
- 激素处理是提高种子生产成本的重要因素。
- 对雌性非洲鲶鱼（Clarias gariepinus）进行激素诱导是获得适当数量和质量的鱼苗的唯一途径。

**关键词：**非洲鲶鱼亲鱼；激素诱导；繁殖能力；类固醇激素；hCG

**引言：**非洲鲶鱼（Clarias gariepinus）是一种具有巨大潜力的物种，能够显著满足许多国家（尤其是非洲的尼日利亚和乌干达）对动物蛋白的需求（FAO引用2004）。它们能够适应多种恶劣的环境条件（Kánainé Sipos等引用2019），具有较高的抗病能力和对水质恶化的耐受性。此外，非洲鲶鱼的生长速度较快，既可用于混养也可用于单养系统（Ntsama等引用2018）。在埃及，由于其价格相对低于罗非鱼（Oreochromis niloticus），非洲鲶鱼具有竞争优势。然而，鲶鱼养殖面临诸多挑战，其中最突出的是幼鱼供应有限及对激素注射的依赖（El-Naggar引用2008）。此外，C. gariepinus被归类为一次性产卵的鱼类（Tyler和Sumpter引用1996）。众所周知，鱼类的繁殖过程受三个主要因素调节：生理因素（如性成熟度、血液中性激素水平）、亲鱼的营养状况以及生态因素（如温度、光照和水深）。这些因素可能不足以促使某些鱼类达到最佳繁殖状态或产生足够数量的幼鱼。因此，需要通过人工干预，通过注射激素来促使亲鱼排卵。激素刺激已成为全年持续生产鱼苗的关键手段。目前使用多种合成激素类似物来提高人工繁殖的成功率，例如鱼垂体提取物（Natea等引用2017），而人绒毛膜促性腺激素（hCG）可直接刺激性腺（Ahmed引用2018；Zidan等引用2020）。其他外源性激素（如促黄体生成激素类似物LHRH-a或促性腺激素类似物GnRHa，Alcántar-Vázquez等引用2017；Shokr引用2020；Oliveira等引用2024）则主要作用于亲鱼的垂体，加速促性腺激素（GTH）的分泌。

在非洲鲶鱼（Clarias gariepinus）的商业养殖中，激素处理是一种有效的方法，可以确保高产卵率并实现全年生产鱼苗，因为自然产卵在人工环境下受到限制，该物种具有畏光行为、孵化率低以及高品质幼鱼供应不足等问题。许多研究者已证明人绒毛膜促性腺激素（hCG）能促进C. gariepinus的最终卵子成熟、排卵和产卵（Saadony等引用2014；El-Hawarry等引用2016；Ahmed引用2018）。人绒毛膜促性腺激素（hCG）是最常用的促性腺激素，用于诱导产卵。这种纯化的激素可以直接作用于卵巢和睾丸。尽管需要较大剂量和频繁注射，但其刺激效果显著（Rottmann等引用1991）。根据Attia等（引用2023）的研究，激素诱导有助于成功繁殖C. gariepinus，且较高剂量的hCG（1500 IU）可提高种子产量，从经济角度来看更为高效。然而，许多因素会影响鱼类的响应程度和孵化率，包括鱼类种类、使用的激素类型（Mehrim等引用2014；Attia等引用2024）、激素剂量（Zidan等引用2020）、饲养条件（Saleh等引用2020）、体型和年龄（Soltan等引用2007；Jokthan引用2013）、环境条件（Hubenova等引用2014）以及性别比例（Maradun等引用2018）。因此，需优化hCG注射剂量，以实现最佳受精率和孵化率，并降低成本，同时探讨不注射雄性是否会产生显著影响。许多研究表明，向雄性注射雌性剂量一半的激素（Maradun等引用2018；Zidan等引用2019、2020），或同时向雌雄双方注射相同剂量（Islam等引用2016）可提高效果；也有研究仅向雌性注射激素（Natea等引用2017；Saleh等引用2020）。众所周知，鱼精子的质量受其运动能力影响（Rurangwa等引用2004），外源性激素处理会对淡水和海水鱼类的精子运动能力产生影响（Pankhurst和Sharples引用1992；Attia等引用2024）。尽管hCG注射可增加精液量、血浆睾酮水平及交配欲望（Pankhurst和Sharples引用1992；Attia等引用2024），但对照组与激素处理组之间的差异并不总是明显（Mylonas等引用2017）。Cejko等（引用2012）的研究表明，使用特定制剂对Leuciscus leuciscus的激素处理并未改变精子运动能力等参数。为了提高激素诱导的效率并降低生产1000条幼鱼的成本，本研究探讨了向雄性注射相同剂量、一半剂量或不注射激素的可行性。

**材料与方法：**
本研究在埃及国家海洋与渔业研究所Fayoum研究站的孵化场进行。埃及国家海洋与渔业研究所的动物伦理委员会批准了本研究的实施，并提供了相应代码（NIOF-IACUC，代码：NIOF-AQ5-F-23–R-046）。

**实验过程：**
- 从埃及Fayoum的一家私人鱼场选取健康状况良好的C. gariepinus亲鱼，放入充氧罐（体积1立方米）中，运输至实验地点。用福尔马林以50–150 ppm/3小时的浓度消毒后，将鱼分置于两个混凝土池（各4立方米）中，并使用鼓风机和潜水扩散器持续通气，使它们适应孵化场环境一周。
- 通过检查从产卵鱼卵巢中取出的卵样确定雌鱼的成熟度。卵巢内卵粒的平均直径需大于900微米。雄鱼的成熟度则通过观察其红色带尖端的生殖突起或挤压腹部是否有精液流出来判断（El-Hawarry等引用2016；Natea等引用2017）。
- 实验采用半人工产卵方式，使用了80条性成熟的亲鱼（36条雌鱼和36条雄鱼，性别比为1:1），将它们分配到12个长方形混凝土池（尺寸1.75×1.75×1米，体积1.53立方米）中。每个池配备两个鼓风机（德国制造）进行持续充气，光照周期为12小时光照：12小时黑暗。每池配置3条雄鱼和3条雌鱼。实验包括四种处理方式，每种处理重复三次。处理方式如下：
- 对照组（T0）：雄性和雌性均不注射激素；
- T1组：雄性和雌性注射相同剂量的激素；
- T2组：雄性注射雌性剂量一半的激素；
- T3组：仅向雌性注射激素。
- 表1显示了雄性和雌性的初始平均重量（±标准误差）分别为968±25.49克和925±7.35克。
- 按照Attia等（引用2023）的建议，使用每公斤亲鱼1500 IU的标准hCG剂量。注射后，将亲鱼放回原池。每个池内放置两个棕榈叶巢以方便配对和产卵。幼鱼出生后收集起来，母鱼留在池中。随后清洗去除杂物并计数。
- 实验期间记录了一些水质参数，平均值为：水温25.2±0.52°C，pH值7.85±0.40，溶解氧7.2±1.02 mg/L（使用RK500-09多参数水质传感器，湖南瑞卡电子技术有限公司制造）。
- **激素制备：**使用CHORIOMON 5000 IU注射剂（每支含18 IU人绒毛膜促性腺激素hCG），需先将其溶解于蒸馏水中，然后注入含粉末的安瓿瓶中，充分混合后注射到肌肉中。
- **繁殖指标：**
- 性腺体指数（GSI）的计算：通过电子天平分别测量雄性和雌性的性腺重量和体重，根据Saadony等（引用2014）的方法计算GSI = (性腺重量/鱼体重) × 100。
- **卵粒直径：**从每条雌鱼中取卵样，用5%福尔马林固定后置于载物玻片上，使用目镜显微镜在10倍放大下观察（Zidan等引用2020）。
- **绝对繁殖能力：**绝对繁殖能力 = (性腺重量 × 子样本中的卵粒数) / 子样本重量（Yelden和Avsar引用2000）。
- **相对繁殖能力：**相对繁殖能力 = 每条雌鱼的卵粒数（Nikolsky引用1963）。
- **采样：**注射24小时后，随机选取3条雄鱼和3条雌鱼的样本放入100升通风池中，用丁香油（浓度50 μL/L）麻醉（El-Dakar等引用）。引文2020）提供了抽取血液和收集生殖腺以分析化学成分的方法。血液样本在注射后24小时从鱼的背静脉中采集（包括雄性和雌性），使用3毫升注射器在不到3分钟内完成，以减少处理过程中的压力。收集到的血液被放入Wasserman试管中，无需使用抗凝剂。为了分离血清，血液样本在室温下凝固45分钟后，以3500 x g/5分钟的速度离心（Mehrim等人，引文2014）。血清样本被转移到Eppendorf试管中，并保存在-80°C的深冷冻柜中，直到下次使用。

血清激素
使用CHROMATM Reader系统来定量性类固醇激素，如黄体生成素（LH）、促卵泡激素（FSH）、雌激素、睾酮和孕酮。Rinchard等人（引文1993）和Alvarado等人（引文2015）利用商业ELISA试剂盒，采用酶免疫测定法来测量标准雌二醇浓度（0、20、100、300、800和3200 pg/mL）（Check, Inc.，Foster City, CA 94404, 美国）。

血清生化分析
皮质醇的含量通过放射免疫测定法进行定量分析（Pankhurst和Sharples，引文1992）。根据Reitman和Frankel（引文1975）的方法，使用量热法测定天冬氨酸氨基转移酶（AST）和丙氨酸氨基转移酶（ALT）、肌酐和尿素；血清葡萄糖、白蛋白（Tietz等人，引文1995）以及胆固醇（Hodgson等人，引文1976），使用的是商业检测试剂盒（Bio-diagnostic, 埃及）。

基于注射剂量计算生产1000条幼体的成本
成本计算基于雌性鱼（种鱼）的体重和所用剂量的价格。CHORIOMON 5000 IU安瓿的价格为90埃及镑（L.E）。

生殖腺的化学成分
在注射后24小时，使用AOAC（引文2005）的标准方法对卵巢和睾丸进行化学分析。

统计分析
使用Wilk的Shapiro检验确认数据的正态性。所有数据以平均值±标准误差（SE）表示，并通过单因素方差分析（ANOVA）进行统计分析，随后使用SPSS统计软件包版本23进行Tukey多重比较检验，显著性水平p ≤ 0.05。

结果
图1显示了雄性以与雌性相同剂量、半剂量或不注射的情况下，对卵巢重量、雌性每条鱼的产卵数（GSI）、卵径、绝对繁殖力以及雄性GSI的影响。接受hCG处理的鱼在卵巢重量（图1a）、雌性GSI（图1b）、卵径（图1c）、绝对繁殖力（图1d）和雄性GSI（图1f）方面显著高于未处理的亲鱼组（T0）（p = 0.004）。此外，在这些指标中，除了绝对繁殖力外，各处理组之间没有显著差异，其中T3组的绝对繁殖力最高，其次是T1组，T2组的繁殖力最低。

图1. [1–a] 卵巢重量（p值 = 0.001）；[1–b] 雌性GSI（p值 = 0.004）；[1–c] 卵径（p值 = 0.033）；[1–d] 绝对繁殖力（p值 = 0.001）；[1–e] 相对繁殖力（p值 = 0.00）；[1–f] 雄性GSI（p值 = 0.001），分别表示雄性接受与雌性相同剂量、半剂量或不注射的情况。值为平均值±SE。不同条形图上不共享的上标字母表示在P < 0.05的水平上存在显著差异（n = 3）。
对照组：不注射雄性鱼和雌性鱼；T1：雄性和雌性鱼接受相同剂量注射；T2：雄性鱼接受雌性剂量的一半注射；T3：不注射雄性鱼，只注射雌性鱼。

血液性激素
雌性血液中的性激素水平在各组之间存在显著差异（p ≤ 0.05）。T1组和T3组之间的FSH和LH、睾酮水平没有显著差异，而这些激素的水平显著高于T2组，而T0组的这些激素水平最低（表2）。同样，T3组的孕酮浓度最高（P），其次是T1组，T0组最低。另一方面，雌激素水平不受不同处理的影响。

表2. 注射Clarias gariepinus雌性后24小时血液性激素的差异。

表3显示注射后24小时雄性血液中性激素水平的变化。LH、雌激素和睾酮的浓度在T2组和T3组之间没有显著差异，但显著高于T1组和T0组。孕酮在各组之间的变化不显著。而T3组和T0组的FSH水平低于T1组和T2组（p < 0.001）。

表4总结了注射非洲鲶鱼雌性后24小时血液生化指标的变化。除了血清葡萄糖和白蛋白外，所有血清生化指标（皮质醇、胆固醇、AST、ALT、肌酐和尿素）在注射hCG的雌性鱼和未处理的雌性鱼之间存在显著差异。

未处理的雌性鱼与接受hCG处理的雌性鱼相比，皮质醇、AST、ALT、胆固醇、肌酐和尿素的浓度最低（p ≤ 0.05）。然而，处理过的雌性鱼组在皮质醇、葡萄糖和白蛋白方面变化不显著。但AST和胆固醇在T3组显著低于T2组和T1组（p ≤ 0.05）。T2组的肌酐和尿素水平最高，其次是T3组，T1组的水平最低。

表5显示了注射非洲鲶鱼雄性后24小时血液生化指标的变化。T2组和T3组在皮质醇、葡萄糖和白蛋白方面没有显著变化（p ≤ 0.05），并且它们的水平显著低于T1组和T0组。胆固醇和ALT在处理过的雄性鱼中浓度最高。

表6展示了生产1000条幼体/千克亲鱼所需的hCG剂量成本的数据。然而，T2组每千克雌性鱼产生的幼体数量高于T3组。T2组和T3组之间每千克亲鱼产生的幼体数量没有显著差异，但这些处理的成本显著低于T1组。此外，未接受hCG处理的雌性亲鱼没有产生任何幼体。

表7和表8分别展示了注射后24小时卵巢和睾丸的化学成分。未处理的雌性鱼的卵巢水分和蛋白质含量显著高于其他组，反之亦然，而灰分含量在各组中没有变化。不同处理对睾丸的水分、蛋白质和灰分含量没有显著影响。

总体而言，我们的结果证实了hCG对C. gariepinus的激素刺激是促产的重要手段。未处理组血液中的性激素（FSH、LH、雌激素、孕酮和睾酮）和繁殖力指标（绝对繁殖力、相对繁殖力）水平最低。而接受注射的亲鱼完全产卵并产下了幼体。许多研究表明，激素疗法已成功用于诱导鱼类的排卵（Mylonas和Zohar，引文2001；Sahoo等人，引文2007）。在同样的背景下，接受激素处理的C. gariepinus亲鱼的卵细胞发育优于对照组，这与相关研究的观察结果一致（Mehrim等人，引文2014；Zidan等人，引文2020）。这种激素处理的优越性可能是由于它们能够调节鱼的繁殖力，并在这些激素对血液性激素和繁殖力指标方面具有显著作用（p ≤ 0.05）。此外，Rottmann等人（引文1991）描述的hCG激素疗法可能更有效，因为它通过直接刺激生殖腺来促进性类固醇激素的合成和释放，这对于卵细胞的最终成熟、精子发生和产卵至关重要。根据Biran和Levavi-Sivan（引文2018）的研究，FSH和LH激素由垂体储存和释放，作为调节生殖腺生长和产卵的主要调节剂，通过刺激三种性类固醇的合成：雌激素、11-酮睾酮（11-KT）和17α,20β-二羟基-4-孕烯-3-酮。Mehrim等人（引文2022）和Saleh等人（引文2020）发现，未处理的C. gariepinus雌性或雄性在接受hCG后，这些激素的水平最低。Attia等人（引文2023）的研究表明，使用鲤鱼垂体提取物（CPE）和hCG组合 dapat成功促进该物种的繁殖并产生更多幼体。他们还确认，接受1500 IU/hCG/kg注射的鱼群产生了最多的幼体，而使用CPE诱导的繁殖效果在经济上更为高效。因此，本研究旨在通过检查以与雌性相同剂量、半剂量或不注射雄性的方式，最大化使用激素剂量（1500 IU/hCG/千克亲鱼）来刺激C. gariepinus亲鱼生产高质量、高数量的幼体。

繁殖问题在雌性鱼类中通常更为严重（Zohar和Mylonas，引文2001）。因此，我们发现在T3组中，雌性的FSH、LH、孕酮和睾酮水平最高，这些激素在雄性中也是如此，而在T2组中除了FSH外，这些激素水平没有差异。FSH被认为负责卵细胞的发育调节。LH负责卵细胞的成熟和排卵（Yaron等人，引文2003）。先前的研究在其他鱼类中也表明，hCG能有效诱导精子释放并增加黑鲈鱼（Acanthopagrus schlegeli）的精液产量（Chang和Yueh，引文1990）。在鲶鱼P. bocourti中，hCG处理在注射后12小时导致精液产量短暂增加（Cacot等人，引文2003）。有趣的是，我们的结果显示，注射hCG对雄性或雌性的雌激素水平没有影响。雌激素在调节精子细胞的更新、促进生殖细胞增殖和生长以及卵黄发生方面起着关键作用（Biran和Levavi-Sivan，引文2018）。Woo等人（引文2021）发现，含有sGnRH的颗粒剂增加了雄性粗糙鳞鱼的精液体积，但对血浆性类固醇水平没有明显影响。许多早期研究也指出，GnRHa处理虽然不改变血浆中的性激素水平，但能成功增加精液体积（Lim等人，引文2004）。垂体在生殖腺刺激下分泌促性腺激素，用于合成11-KT（Woo等人，引文2021）。在粗糙鳞鱼中，11-KT水平与精子释放没有明显相关性。Canario和Scott（引文1991）认为，hCG疗法对黄鳍松鱼（Limanda limanda）的血浆11-KT和睾酮水平没有明显影响。受精能力是精子质量的最终指标，因为含有较高比例活动精子的精子能更有效地使更多卵子受精。在hCG处理后12至48小时，活动精子的比例下降表明hCG对精子质量有负面影响（Zadmajid等人，引文2018）。在半人工繁殖过程中，激素处理是提高水中精液量的有效方法（Vermeirssen等人，引文1998）。使用不同激素诱导精子释放也能改变精子的活动力（Mylonas等人，引文2017）。例如，某些鱼类物种的激素治疗能增加精子的活动力（Pérez等人，引文2017）。（这里提供了研究的详细引用和结论，但由于篇幅限制，未能完整翻译。如需要更详细的中文内容，请提供具体要求。）

**引用：**
2000年有研究表明，在某些鱼类物种中，接受激素处理的雄性鱼类的精子活动性与对照组无统计学差异（Cejko等人，2012年引用）。异常高密度的鱼精可能会降低hCG处理鱼类的精子活动率，从而导致受精率降低（Zadmajid等人，2018年引用）。其他鱼类也有类似的研究结果，发现鱼精质量较低可能是由于鱼精黏度过高所致。例如，在大比目鱼（Hippoglossus hippoglossus）中，精子活动率与精子浓度呈负相关（Scott等人，2010年引用），并且随着鱼精黏度的增加，受精率也会下降（Vermeirssen等人，2004年引用）。Denusta等人（2014年引用）指出，hCG能有效刺激并增加精子产量，但会降低精液的稀释度。经过激素处理的银色Leiopotherapon plumbeus鱼类的精子浓度和密度下降，这可能是由于激素促进了精液成熟，使其变得更加稀释（Miura等人，2002年引用）。

**繁殖力指标：**
繁殖力指标是评估亲鱼产卵质量的重要参数，其中性腺的生理活性受性腺-体指数（GSI）变化的影响。GSI的增加标志着鱼类繁殖季节的开始。例如，在 gariepinus 鱼类中，激素注射可以影响其繁殖力（Babin等人，2007年引用；Saadony等人，2014年引用）。接受外源性激素处理的 gariepinus 鱼类的类固醇激素（FSH、雌激素和睾酮）水平与卵巢重量等繁殖力参数呈线性关系（Mohammadzadeh等人，2020年引用）。此外，研究表明提高雌性体内的雌二醇水平可以激活卵黄形成过程，从而加速性腺发育（Zahri等人，2018年引用）。我们的研究结果显示，接受hCG处理的雌性和雄性鱼类的血清类固醇激素水平更高，其繁殖力指标（卵巢重量、雌性GSI、卵子直径、绝对生育能力和雄性GSI）也有所改善，而未接受处理的雄性鱼类则没有这些变化。

**血液生化指标：**
血液生化指标反映了鱼类的生理状态，受性成熟、年龄、物种、饮食、温度和繁殖等因素影响。在自然或人工产卵过程中，鱼类由于分泌内源性性激素或注射外源性性激素，其生理状态会发生显著变化（Suljevi?等人，2017年引用）。我们的研究发现，接受hCG处理的雌性鱼类的皮质醇、葡萄糖、AST、ALT、胆固醇、肌酐和尿素水平高于未处理组。此外，T2和T3激素处理的雌性在这些指标上的水平也高于其他处理组。这表明，在繁殖季节或人工产卵过程中，压力相关指标（如皮质醇、葡萄糖、肌酐、尿素和AST）会升高。皮质醇是与压力相关的关键激素，其水平与压力程度密切相关。Zidan等人（2020年引用）和Attia等人（2023年引用）也发现，接受外源性激素注射的鱼类这些指标有所升高。Svoboda等人（2001年引用）指出，应激状态下会释放皮质类固醇和儿茶酚胺，导致血糖浓度升高。Cahyono等人（2019年引用）认为，激素处理会提高卵巢成熟所需的能量需求，从而增加血液循环中的葡萄糖水平。Shokr（2020年引用）的研究表明，应激处理会促进蛋白质和脂质的合成，增加激素分泌。我们的研究发现，接受hCG处理的雌性 gariepinus 鱼类的血清白蛋白水平在处理组和未处理组之间没有显著差异，但T2和T3组的白蛋白水平较高，这可能是因为这些处理更多地影响了激素诱导和应激反应。

**结论：**
总体而言，激素注射是商业或经济上生产鱼苗的有效方法。然而，我们的研究旨在降低注射成本，并探索仅注射雌性而不注射雄性的可行性。研究表明，仅对雌性进行激素诱导是获得合适数量和质量的鱼苗的唯一途径。T2和T3组的雄性鱼类中，LH、雌激素和睾酮的浓度与T1和T0组相比没有统计学差异，但显著高于前者。在本研究条件下（性别比例1:1，雄性和雌性均注射1500 IU hCG），对雄性进行激素诱导在经济上不可行，且浪费了激素资源。未接受处理的雄性鱼类在每公斤亲鱼产生的鱼苗数量上并不优于接受相同剂量处理的雌性鱼类。此外，T2组的每公斤亲鱼产生的鱼苗数量与T3组无统计学差异，因此T3组在每公斤亲鱼生产1000条鱼苗方面的成本最低。

**卵巢和睾丸的化学成分：**
未处理雌性的卵巢水分和蛋白质含量高于接受hCG处理的雌性，但脂肪含量未受激素处理影响。睾丸的化学成分也未因激素处理而改变。这一结果与Attia等人（2023年）的先前研究一致，对照组在水分和蛋白质含量上最高。同时，CPE+ hCG处理组的蛋白质含量最低。此外，不同激素处理对睾丸的水分、蛋白质、脂肪和灰分含量影响不大（p≥0.05）。

**总结：**
本研究证实，激素注射是商业性生产鱼苗的主要方法之一。然而，我们的目标是通过减少注射成本来实现经济高效的生产方式，即仅注射雌性而不需要注射雄性。研究表明，仅对雌性进行激素诱导是获得高质量鱼苗的可靠方法。虽然T2和T3组的雄性鱼类在激素浓度上与T1和T0组无差异，但显著高于后者。因此，在当前条件下（性别比例1:1，雄性和雌性均注射1500 IU hCG），对雄性进行激素诱导在经济上不可行，且浪费了激素资源。未来需要进一步研究其他因素，以确定是否需要注射雄性，如亲鱼的大小和营养状况、激素注射剂量以及饲养条件等。

**数据获取：**
数据可向作者索取。