采用“端到端”方法去除两种“问题性”宿主细胞蛋白的策略

《Biotechnology Progress》：Strategies for removing two “problematic” host cell proteins, using an “end-to-end” approach

宿主细胞蛋白（HCPs）是重组蛋白生物制药的关键工艺相关杂质，本研究在CHO细胞系IgG1单抗中鉴定出HSP90β和perilipin-4-like两种HCPs，通过风险评估确定其为 problematic物种，并建立目标水平。采用端到端工艺优化策略，上游调整温度和铁/柠檬酸盐浓度，下游优化Protein A洗涤和色谱纯化参数，有效将两种HCPs降至目标水平。

　　

摘要

宿主细胞蛋白（HCPs）是重组蛋白生物制药产品中的关键过程相关杂质，可能会影响产品的安全性和有效性。在这项研究中，在开发一种晚期阶段的免疫球蛋白G亚类1（IgG1）单克隆抗体工艺过程中，从CHO细胞系中检测到了两种残留的HCPs：热休克蛋白90β和类似perilipin-4的蛋白。进行了风险评估，包括识别这些HCPs、它们与人类相应蛋白的相似性以及之前的非临床和临床经验。评估结果认为这两种蛋白“存在问题”，并确定了目标去除水平以指导相应的去除方法。鉴于上游和下游工艺的高生产力，研究目标是探索能够将偏离平台标准的情况降至最低的条件。采用了一种端到端的方法，评估了下游处理措施，包括使用Protein A进行洗涤、优化色谱操作参数以及研究深层过滤介质的效果。同时也探讨了上游因素，评估了温度变化以及调节铁和柠檬酸浓度对控制这两种HCPs水平的影响。本研究的结果表明，通过调整上游和下游工艺条件，可以有效去除这两种HCPs，从而达到药物物质的质量标准。

利益冲突声明

所有作者在本研究工作期间均受雇于Biogen公司，因此关于本手稿不存在需要声明的利益冲突。

同行评审

为保证透明度，与本文相关的同行评审文件可在此链接查看：https://doi.org/10.1002/btpr.88514。

第二轮评审
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第一位审稿人的报告	2026/04/04
第一轮评审
编辑决定函	2025/11/20
第四位审稿人的报告	2025/11/19
第二位审稿人的报告	2025/11/16
第二位审稿人的报告附件1	2025/11/16
第三位审稿人的报告	2025/11/15
第一位审稿人的报告	2025/11/15

数据可用性声明

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