在兽医诊所环境中评估犬只的压力：行为分析与热成像技术

《Journal of Veterinary Behavior》：Assessing Canine Stress in a Veterinary Clinic Setting: Behavioral and Thermographic Analysis

　　维罗妮卡·波科尔纳（Veronika Pokorna）| 伊娃·沃斯拉罗娃（Eva Voslarova）| 伊维塔·贝达诺娃（Iveta Bedanova）| 露西亚·科蒂亚诺娃（Lucia Kotianova）| 弗拉基米尔·韦切雷克（Vladimir Vecerek）
捷克共和国布尔诺兽医科学大学兽医卫生与生态学院动物保护与福利及兽医公共卫生系，Palackeho街1946/1号，612 42布尔诺

**摘要**
已知兽医诊所的就诊对许多狗来说是一种压力源，然而结合行为和生理指标的定量评估仍然有限。本研究旨在通过行为观察和红外热成像技术来评估狗在常规兽医就诊期间的应激反应。共有96只临床健康的狗在四个特定时间段内被观察：候诊室、检查前、检查中以及检查后。通过直接观察记录了21种与压力相关的行为。使用红外热成像技术测量了45只狗的左侧泪阜表面温度，并在检查过程中记录了直肠温度，以评估其与眼表温度的相关性。大多数狗都表现出与压力相关的行为，其中检查阶段的频率最高。最常见的行为包括舔嘴唇、夹尾巴和身体颤抖。体重≤5公斤且年龄在2至6岁之间的狗表现出更多的压力迹象。泪阜表面温度在检查期间也显著升高，但与直肠温度无关。2个月至1岁的年轻狗的眼表温度高于年长的狗。常规兽医就诊，尤其是检查阶段，会引发狗的可测量压力。行为迹象结合热成像技术提供了一种非侵入性和实用的方法来评估应激反应。减少等待时间和优化操作程序可以降低狗在就诊期间的压力。

**引言**
兽医就诊常常伴随着伴侣动物（尤其是狗）的焦虑和压力，这是由于不熟悉的环境、处理方式以及医疗程序（Dawson等人，2016；Lind等人，2017；Dawson等人，2018；Edwards等人，2019）。恐惧和压力不仅会对动物的健康产生负面影响，还可能导致其他不良后果。恐惧的动物往往不那么合作，需要更多的时间和人力，从而降低效率和生产力（Anseeuw等人，2006；Rodan等人，2011）。因此，有时无法进行或只能部分完成检查。在Glardon等人（2010）的研究中，100只健康的狗中有24%只能接受部分检查，而6%的狗根本无法得到适当检查。狗在医疗程序中的压力可能导致对饲养员的攻击性或危险行为（Herron和Shreyer，2014；Dawson等人，2016），并且在检查过程中观察到攻击行为以及狗咬伤兽医工作人员的报道（Fritschi等人，2006；Glardon等人，2010）。此外，过度或长期的压力反应可能会影响接种后的免疫反应、对感染的抵抗力、伤口愈合，并可能增加肿瘤的风险（Broadbent等人，2003；Glaser和Kiecolt-Glaser，2005；Godbout和Glaser，2006；Kiank等人，2007）。识别压力指标对于改善动物福利和优化兽医护理至关重要。在兽医诊所环境中，经常观察到狗因压力而产生的行为（D?ring等人，2009；Mariti等人，2017）。应激评估不应仅依赖于观察到的行为，因为行为可能受到多种因素的影响，如性格、以往的兽医诊所体验、年龄、现有疾病或治疗、体力活动水平以及当前的动机（V?is?nen等人，2005；Hiby等人，2006；D?ring等人，2009；Okamoto等人，2009；Herkman等人，2014；Gilbert-Gregory等人，2016；Espinosa等人，2025）。此外，一些压力行为表现可能容易被忽视（Landsberg等人，2011；Srithunyarat等人，2017；Packer等人，2019；Sundman等人，2019；Kartashova等人，2021）。生理指标（如心率、皮质醇水平或心率变异性）提供了有价值的补充信息，但它们也可能具有误导性，因为它们可能同时反映积极兴奋和消极压力（V?is?nen等人，2005；Haubenhofer和Kirchengast，2006；Edwards等人，2022）。将这些测量方法与行为观察相结合可以提高解释的准确性（Squair等人，2023；Squair等人，2024）。因此，建议结合行为和生理评估方法以更准确地了解狗的情绪状态（Dreschel和Granger，2005；Srithunyarat等人，2018；Edwards等人，2022）。然而，即使同时考虑了行为和生理测量，对压力反应的解释也可能受到个体狗之间生物学特征的影晌。选择性繁殖导致狗在形态和行为上存在显著差异，这可能会使压力相关行为的解释变得复杂。解剖学上的改变（如短头畸形或耳朵、眼睛和四肢的构造变化）可能会限制狗表现出典型的压力行为指标（包括面部表情、喘息或耳朵和尾巴的姿势），并影响生理参数（如心率和呼吸频率）（Stone等人，2016；Davis等人，2017；Hecht等人，2021；Martvel等人，2025）。已经观察到某些形态特征（如头指数和体型）与不良行为（包括过度反应和恐惧）的普遍性之间存在关联（Stone等人，2016），极端的形态特征还可能与影响情绪处理和压力反应的神经解剖学改变有关（Hecht等人，2021）。这些因素共同作用可能会破坏生理和行为应激反应之间的同步性，从而挑战基于行为的压力评估的可靠性。这突显了结合客观、非侵入性的生理方法（如红外热成像）的重要性，这些方法能够独立于个体狗的形态和行为差异来进行压力评估。

**红外热成像（IRT）**
红外热成像（IRT）已成为一种用于评估应激生理反应的非侵入性方法。它能够检测由自主神经系统引起的体表温度变化，这种变化会改变血流（Stewart等人，2007；Travain等人，2015；Elias等人，2021）。眼睑后缘附近和泪阜的小区域对这些变化特别敏感，因为这些区域含有由交感神经系统调节的密集毛细血管网络（Pavlidis等人，2002；Stewart等人，2008）。压力会激活下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴。这种激活以及随初始交感反应而来的副交感神经活动引起的外周血管扩张可能导致眼温升高（Valera等人，2012；Travain等人，2015）。已报道多种物种在压力下眼表温度升高，包括牛（Stewart等人，2007）、山羊（Bartolomé等人，2019）、绵羊（Cannas等人，2018）、马（Valera等人，2012）、猫（Foster和Ijichi，2017）和狗（Travain等人，2015；Rigterink等人，2018；Elias等人，2021），这表明IRT在压力评估中的广泛应用性。除了监测与压力相关的变化外，温度本身也是兽医医学中常规评估的生理参数。测量体温是狗的临床检查的重要组成部分，因为偏离正常值（如由感染引起的变化）会显著影响诊断和治疗（Gomart等人，2014；Smith等人，2015；Cugmas等人，2020）。直肠温度被认为是评估核心体温的标准方法，但它可能会引发动物的防御行为，从而可能影响其他生理参数（如心率和血压）（Gomart等人，2014；Bragg等人，2015）。理想情况下，替代的温度测量方法应准确且能最小化压力（Sousa，2016）。在这方面，红外热成像作为一种非侵入性方法已被研究，有研究探讨了狗的直肠温度和表面温度之间的相关性（Travain等人，2015；Zanghi，2016；Rizzo等人，2017）。Travain等人（2015）报告了眼温和直肠温度之间的强正相关（r = 0.66），而Zanghi（2016）观察到眼温和耳温在运动后显著跟随直肠温度变化。相比之下，Rizzo等人（2017）发现直肠温度与多个非眼部表面区域之间没有显著关联，这表明这种关系的强度取决于测量的解剖部位和生理背景。

**研究目的**
本研究旨在使用非侵入性方法（结合行为观察和眼表温度的红外热成像）来评估狗在兽医诊所不同停留阶段的应激反应。虽然兽医环境中的压力已通过行为指标得到广泛记录，但关于IRT作为临床实践中补充的客观压力测量方法的可靠性知之甚少。通过同时评估与压力相关的行为和眼表温度，我们旨在确定IRT是否是一种敏感且实用的工具，用于检测狗的急性压力，并评估核心体温。此外，我们还研究了性别、年龄、体型和体重等个体因素如何影响行为和热成像反应，以识别潜在的变异来源并改进异质犬群中压力测量的解释。

**材料与方法**
**动物和兽医诊所**
测量在捷克共和国的一家选定兽医诊所进行，具体在候诊室和检查室。候诊室有一个接待台，由一名工作人员负责患者登记；一张小桌子；两把供主人等待进入检查室的椅子；以及一个用于称重的秤。检查室配备了检查台、一张供主人使用的椅子、一个药品柜、一张桌子和一张供兽医使用的椅子。

**数据收集**
数据收集在春季和秋季进行，此时室外平均温度为15°C（±3°C），相对湿度在57–60%之间。候诊室和检查室的室内温度平均为20°C（±2°C），相对湿度在38–40%之间。温度和湿度使用SWS 300 W气象站（Sencor，FAST ?R a.s.，捷克共和国）进行记录。

**研究对象**
仅包括那些因常规接种疫苗而访问诊所的狗（年龄2个月至16岁，体重1–46公斤）。所有研究对象在检查时都处于临床健康状态，未接受任何药物治疗，且未表现出对人类的攻击行为。它们至少与当前主人共同生活了四周，并且在之前的访问中未接受任何侵入性程序（例如手术）。只有那些之前在兽医诊所接受过非侵入性或微创程序的狗被纳入研究，例如接种疫苗、蜱虫清除、剪指甲、献血、常规临床检查或基本的眼科或皮肤科检查。记录了每只狗之前访问诊所的原因，以排除那些可能影响其研究期间行为或生理反应的侵入性或高度压力性程序。

**数据收集过程**
**行为观察和红外热成像**
在狗到达候诊区五分钟后开始行为观察和红外热成像，以使体表温度在诊所条件下稳定。这一时间间隔最小化了与运输方式相关的潜在温度变化，并确保了所有后续观察的时间框架标准化。如果无法按照标准化协议完成临床检查，则将狗排除在研究之外。没有狗表现出需要提前终止检查的攻击行为或其他行为。

**行为记录**
在四个不同的5分钟时间间隔内收集每只狗的行为数据，这些时间间隔对应于兽医就诊的不同阶段（表1）。每个观察阶段持续5分钟。如果由于操作困难导致检查时间超过这个时长，该狗将被排除在研究之外。所有预约都是提前安排的，兽医确保每只狗和主人在经过标准化的10分钟等待时间后进入检查室。因此，所有狗都经历了相同的等待时间，并且在明确定义的5分钟间隔内收集行为数据，以保持所有受试者之间的一致性。

**表1. 兽医就诊期间的测量时间点**
| 测量时间点 | 时间间隔定义 | 描述 |
| --- | --- | --- |
| 候诊室 | 从到达候诊室后5分钟开始，直到进入检查室之前 | 在进入兽医诊所的候诊室后，主人在接待处登记，然后与狗一起坐下。行为观察在进入后5分钟开始（以便适应环境），并持续到狗和主人进入检查室。 |在等待期间，狗被拴在主人的身边，主人被要求尽量减少与狗的互动。

**检查室 - 之前**
从进入检查室到开始临床检查（即狗被放在检查台上）。

狗和主人进入检查室后等待，兽医从主人那里了解健康史（即进行访谈）。

**检查室 - 期间**
从检查开始到接种疫苗的过程，直到处理完毕并从检查台上下来。

主人将狗放在检查台上后，兽医进行了常规的临床检查，包括使用听诊器听心音、测量心率和呼吸频率、检查结膜、耳朵和口腔黏膜、触摸淋巴结和腹部，以及测量直肠温度。检查最后进行了皮下疫苗接种。整个过程在处理方式（仅由兽医温和地手动固定狗）、环境（相同的检查室、照明和温度条件）以及使用的设备方面都是标准化的。所有狗都在检查台上接受检查；检查台的高度可以调节，因此即使是大型的狗也能安全地放置。如果无法按照协议完成检查，该狗将被排除在研究之外。

**检查室 - 之后**
从从检查台上下来到离开检查室。

狗要么自己跳下来，要么由主人扶下来，然后主人和兽医交谈结束检查过程。

在每个时间段内，通过直接观察持续监测狗的行为。观察者是由熟悉犬类肢体语言的训练有素的行为学家进行的，以避免观察者偏差。观察者与狗保持大约1.5-2米的距离，并在数据收集过程中避免任何互动。

对于每个时间段，记录了21种预先定义的与压力相关的行为指标（见表2）的存在与否。每种行为在给定的观察期间被评分为1（存在）或0（不存在）。然后计算每个访问阶段中与压力相关的行为的总频率。

**表2. 研究中监测的与压力相关的行为**
| 行为 | 定义 |
|-------|---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------|
| 舔嘴唇 | 将舌头伸出并沿着上唇移动（Schilder和Van Der Borg, 2004, Csoltova等人, 2017, Krau?和Maue, 2023） |
| 抬起爪子 | 用三条腿站立，其中一条前腿明显离地（Beerda等人, 1998, Csoltova等人, 2017） |
| 打哈欠 | 张大嘴巴深吸一口气，然后闭上嘴巴快速呼气（Csoltova等人, 2017） |
| 颤抖 | 身体、皮肤和肌肉明显颤抖（Dreschel和Granger, 2005） |
| 排尿 | 狗自发排尿（Dreschel和Granger, 2005） |
| 蹲姿 | 狗的四肢弯曲，背部向头部倾斜（Beerda等人, 1998, Krau?和Maue, 2023） |
| 毛发竖立 | 毛发竖起，尤其是在背部和尾巴区域（Beerda等人, 1999） |
| 发声 | 狗的任何声音表达，尤其是呜咽或吠叫（Dreschel和Granger, 2005, Csoltova等人, 2017） |
| 喘息 | 强迫性吸气，嘴巴张得很大（Dreschel和Granger, 2005, Csoltova等人, 2017） |
| 抓挠 | 一只或两只前肢来回移动，朝向主人和/或周围的物体（Dreschel和Granger, 2005） |
| 抵抗行走 | 在牵引绳上挣扎，前腿明显僵硬 |
| 鲸眼 | 狗直视人或物体，导致眼白可见（Krau?和Maue, 2023） |
| 自抓 | 一只后腿在身体上前后移动（Somppi等人, 2022, Girault等人, 2022） |
| 尾巴夹在腿间 | 狗将尾巴夹在两条后腿之间和腹部下方（Krau?和Maue, 2023） |
| 过度流口水 | 狗表现出过度吞咽，唾液湿润可见（Dreschel和Granger, 2005） |
| 旋转 | 狗以小圆圈行走（Beerda等人, 1998, Rooney等人, 2007） |
| 躲藏 | 狗试图爬到家具或主人身后（Dreschel和Granger, 2005） |
| 耳朵向后 | 耳朵向后贴紧，耳垂向外，耳尖向下（Krau?和Maue, 2023） |
| 试图离开 | 狗拉扯主人朝向出口（Dreschel和Granger, 2005） |
| 跳向主人 | 狗主动走向主人并直接接触，可能只用前肢放在主人腿上或用全部四肢跳上去（Dreschel和Granger, 2005） |
| 过度移动/踱步 | 狗不安地来回走动，无法在同一个地方停留较长时间（Dreschel和Granger, 2005） |

同一位兽医按照标准化的协议执行所有临床程序。主人被要求在所有观察期间尽量减少与狗的言语或身体互动，以减少主人引起的行为差异并确保条件标准化。即使在检查过程中，也仅在对狗进行必要的限制以防止其离开检查台。这种方法允许狗自发地表现出与压力相关的行为，同时保持安全性和程序的一致性。

**温度测量**
表面温度使用热成像相机（Testo 890-2；Testo SE & Co. KGaA，德国）测量，设置发射率为0.97（分辨率640×480像素，温度范围-30至100°C）。捕获的热成像图像使用IRSoft软件（Testo SE & Co. KGaA，德国）进行分析。狗头部的红外热成像图像与行为观察在同一时间段内拍摄（见表1）。所有成像工作由同一位训练有素的操作员完成，以确保一致性。相机与狗之间的距离保持在1米，拍摄角度为90°。没有使用闪光灯或外部光源。在候诊室，狗在等待5分钟后和进入检查室前再次扫描。在检查室，分别在进入后5分钟、开始临床检查后5分钟以及处理完毕后的5分钟进行成像。每个时间点拍摄两张图像，并计算左眼泪阜的平均表面温度。

对于无法获取图像或图像质量不符合标准的狗，将其排除在热成像分析之外，以确保测量结果的可靠性。根据这些标准，共有14只狗被排除。

在每只狗的临床检查期间，使用兽医电子直肠温度计（Kruuse；J?rgen Kruuse A/S，丹麦）测量直肠温度。在检查过程中评估了直肠温度和表面温度之间的相关性。

**统计分析**
为了统计分析，狗根据性别、肩高、体重和年龄进行分类。性别类别包括雌性、绝育雌性、雄性和绝育雄性。肩高分为三组：≤39厘米、40-59厘米和≥60厘米。体重类别为：≤5公斤、5.1-20公斤和>20公斤。年龄组定义为：2个月至1岁、>1至2岁、>2至6岁、>6至11岁和>11岁。所有统计分析使用UNISTAT 6.5 for Excel（Unistat Ltd., London, UK）进行。使用Kolmogorov–Smirnov检验（n > 50）和Shapiro–Wilk检验（n < 50）评估数据的正态性。由于与压力相关的行为频率不符合正态分布，因此使用非参数Friedman检验（Zar, 1999）进行分析。对于成对比较，使用基于秩和的t分布（Zar, 1999）进行非参数多重比较。

使用Kruskal-Wallis检验分析性别、肩高、体重和年龄对与压力相关行为频率的影响，随后使用秩和进行事后非参数多重比较（Zar, 1999）。对于正态分布的左眼泪阜表面温度数据，使用参数重复测量ANOVA进行分析，然后使用Tukey HSD检验（Zar, 1999）进行多重比较。使用一般线性模型（GLM）ANOVA和Tukey HSD进行性别、肩高、体重和年龄对眼表面温度的影响评估，并进行事后比较。

计算皮尔逊相关系数，以评估临床检查期间测量的泪阜表面温度和直肠温度之间的关系。由于行为变量是非正态分布的并且以频率表示，因此使用Spearman等级相关系数来评估泪阜温度与与压力相关行为频率之间的关系。P值<0.05被认为具有统计学意义。

**行为测量**
表3总结了纳入行为分析的狗的人口统计特征。样本包括多种品种、年龄（2个月至16岁）和体重（1-48公斤），雄性和雌性的比例大致相等。

表3. 纳入行为分析的狗的人口统计特征（n=96）
| 变量 | 类别 | n |
|--------------|-----------------|-----------|
| 性别 | 雌性（未绝育） | 35 |
| | 雌性（绝育） | 14 |
| | 雄性（未绝育） | 41 |
| | 雄性（绝育） | 6 |
| 年龄（岁） | 0–1 | 7 |
| | >1–2 | 33 |
| | >2–6 | 22 |
| | >6–11 | 11 |
| | >11–16 | 11 |
| 体重（公斤） | 0–5 | 27 |
| | 5.1–20 | 42 |
| | >20 | 27 |
| 品种 | 混合品种 | 11 |
| | 吉娃娃 | 8 |
| | 边境牧羊犬 | 6 |
| | 德国牧羊犬 | 6 |
| | 蟒蛇犬 | 5 |
| | 波美拉尼亚犬 | 4 |
| | 斯塔福德郡斗牛梗 | 3 |
| | 约克夏梗 | 3 |
| | 西施犬 | 3 |
| | 法国斗牛犬 | 3 |
| | 拉布拉多寻回犬 | 3 |
| | 其他品种（每种不超过2只） | 4 |

表4显示了各个压力相关行为的发生频率。在所有测量阶段中，最常观察到的行为是舔嘴唇、尾巴夹在腿间和身体颤抖。兽医诊所访问的各个阶段之间，与压力相关的行为总体频率有显著差异（P<0.05），其中临床检查阶段的频率最高。在检查室之前和之后的频率显著较低，这两个阶段之间没有统计学差异（P≥0.05）。

表4. 压力相关行为的发生频率
| 行为 | 每个兽医访问阶段表现出该行为的狗的数量（n） |
|-----------------|--------------------------------------|
| 舔嘴唇 | 6 | 8 |
| 抬起爪子 | 14 | 20 |
| 打哈欠 | 24 | 11 |
| 颤抖 | 4 | 36 |
| 排尿 | 10 | 10 |
| 蹲姿 | 12 | 14 |
| 毛发竖立 | 0 | 0 |
| 发声 | 16 | 7 |
| 喘息 | 35 | 25 |
| 抓挠 | 0 | 11 |
| 抵抗行走 | 9 | 4 |
| 鲸眼 | 30 | 26 |
| 自抓 | 3 | 13 |
| 尾巴夹在腿间 | 3 | 34 |
| 过度流口水 | 4 | 10 |
| 旋转 | 2 | 20 |
| 躲藏 | 15 | 15 |
| 耳朵向后 | 3 | 37 |
| 试图离开 | 11 | 11 |
| 跳向主人 | 16 | 9 |
| 过度移动/踱步 | 16 | 8 |

表5显示了四个观察阶段中表现出压力相关行为的狗的数量。在候诊室有91只狗表现出一种或多种压力相关行为，在临床检查前有84只狗，在检查中有94只狗，在检查后有88只狗。任何阶段中一只狗表现出的压力相关行为最多为12种。

表5. 四个观察阶段中表现出压力相关行为的狗的数量

**温度测量**
表6总结了纳入热成像分析的狗的人口统计特征。这个子集包括各种品种、年龄（3个月至16岁）和体重（1-48公斤）的狗，性别分布均衡。

表6. 纳入热成像分析的狗的人口统计特征（n=45）
| 变量 | 类别 | n |
|--------------|-----------------|-----------|
| 性别 | 雌性（未绝育） | 18 |
| | 雌性（绝育） | 5 |
| | 雄性（未绝育） | 18 |
| | 年龄（岁） | 0–1 | 12 |
| | >1–2 | 20 |
| | >2–6 | 20 |
| | >6–11 | 6 |
| | >11–16 | 5 |
| 体重（公斤） | 0–5 | 13 |
| | 5.1–20 | 19 |
| | >20 | 13 |
| 品种 | 混合品种 | 7 |
| | 吉娃娃 | 5 |
| | 波美拉尼亚犬 | 3 |
| | 德国牧羊犬 | 3 |
| | 西施犬 | 2 |
| | 美国斯塔福德郡斗牛梗 | 2 |
| | 白色瑞士牧羊犬 | 2 |
| | 蟒蛇犬 | 2 |
| | 拉布拉多寻回犬 | 2 |
| | 其他品种（每种不超过2只） | 17 |

表2显示了兽医访问不同阶段左眼泪阜的平均表面温度。临床检查期间的温度最高。检查前和检查后的温度显著较低（P<0.05），在候诊室等待10分钟后测量的温度也与此相同。然而，在候诊室等待5分钟后测量的温度显著低于后续所有测量结果。

图2. 不同阶段狗的泪阜表面温度。狗在兽医就诊不同阶段时左眼泪阜的平均表面温度。未观察到性别、肩高或体重对泪阜表面温度有显著影响。在年龄方面，2至6岁的狗的平均表面温度（36.62°C）显著低于2个月至1岁的狗（37.31°C；P=0.041）。最年轻的组（2个月至1岁）的温度也显著高于11岁以上的狗（36.11°C；P=0.009）。未发现泪阜表面温度与临床检查时测量的直肠温度之间存在显著相关性（P=0.305）。泪阜的平均表面温度（37.46°C）与平均直肠温度（38.71°C）有显著差异（P<0.001）。此外，Spearman等级相关性分析显示泪阜温度与压力相关行为的发生频率之间没有显著关联（P=0.376）。

**讨论**
在动物中，特别是在临床环境中，评估压力是兽医医学的一个关键方面，因为压力可以影响生理反应、行为和整体福利。我们的结果证实，去兽医诊所对狗来说是一个重要的压力源，尤其是在临床检查阶段。在我们的研究中，97.9%（n=94）的狗在检查过程中表现出至少一种与压力相关的行为，75%（n=72）的狗表现出四种或更多此类行为。即使在处理之前，87.5%（n=84）的狗在检查室里就已经表现出压力的行为迹象，表明它们有预期性焦虑。最常见的行为包括舔嘴唇（84.4%，n=81）、身体颤抖（66.7%，n=64）、尾巴夹在两腿之间（61.5%，n=59）、耳朵向后贴（51%，n=49）、鲸眼征（55.2%，n=53）、躲藏（44.8%，n=43）和呼吸急促（31.3%，n=30）。这些结果与先前的研究一致，表明狗在兽医就诊期间经常表现出恐惧或焦虑的迹象。61%到80%的健康狗在等待或进行兽医程序时表现出与压力相关的行为，其中一些狗在观察时间内至少表现出一种与压力相关的行为（V?is?nen等人，2005年；D?ring等人，2009年；Mariti等人，2015年）。这些发现共同支持了行为指标在兽医环境中评估急性压力的可靠性。然而，我们的结果也表明，即使是常规程序也可能引发显著的应激反应。这强调了早期检测压力和实施低压力处理措施的重要性，以改善犬类的福利和兽医护理的质量。

我们的结果揭示了在兽医就诊的不同阶段，与压力相关的行为频率存在显著差异，这也反映在热成像数据中。行为指标的最高频率和眼睛表面温度的最大升高发生在临床检查期间，这证实了处理和约束对大多数狗来说是最大的压力源。检查前后观察到的行为频率和眼睛表面温度显著较低，这两个阶段之间没有统计学差异。我们的结果表明，泪阜的红外热成像是一种敏感的非侵入性指标，可以检测狗的急性压力。这些发现与先前的研究一致，Travain等人（2015年）报告称检查期间眼睛表面温度显著升高，而Csoltova等人（2017年）观察到无论狗是否与主人直接接触或仅从远处观察，眼睛温度都会升高。然而，在候诊室中就已经存在与压力相关的行为和升高的泪阜温度，表明预期性压力可能在进入检查区域之前就开始了。重要的是，表面温度随着暴露时间的延长而升高：仅等待5分钟后测量的泪阜平均温度就显著低于等待10分钟后的温度，表明在临床检查开始之前就已经出现了可测量的外围热量散发增加。这种时间模式支持了预期性压力不是静态的，而是随着狗在诊所环境中的停留时间而逐渐加剧的解释。我们的结果强调了减少在诊所停留时间的重要性。例如，安排预约和限制等待时间等策略可能有助于减少预期性压力并提高动物福利。

然而，需要注意的是，观察到的压力信号数量较多并不一定对应于更高的实际压力水平。正如Gilbert-Gregory等人（2016年）指出的，压力的行为指标并不总是线性反映潜在的情绪或生理状态的强度，因为有些狗可能会抑制或表现出较少的明显症状，尽管它们经历了显著的压力。因此，虽然与压力相关的行为数量提供了关于压力表达的宝贵信息，但应将其与生理测量结果（如热成像温度变化）一起解释，并考虑个体应对策略的差异。在行为迹象更多的阶段，眼睛温度的同时升高进一步支持了这两种方法捕捉到同一压力反应的不同维度的观点：一种通过明显行为表现出来，另一种通过自主生理变化表现出来。

为了进一步研究行为表达与生理压力反应之间的关系，我们评估了与压力相关的行为频率是否与眼睛表面温度相关。未发现这两者之间存在显著相关性，表明热成像检测到的生理唤醒增加并不一定对应于更多的可观察压力信号。这一发现强化了热成像和行为观察捕捉到压力反应互补方面的观点，而不是重复的方面，并强调了在临床评估中结合这两种方法的价值。

在所有阶段中，舔嘴唇的行为出现频率最高，占84.4%（n=81）的狗在检查期间有这种行为。尽管这种行为很常见，但不应单独将其解释为压力的唯一指标。然而，它在处理过程中的增加支持了Csoltova等人（2017年）的发现，他们也报告说无论主人是否在场，检查期间舔嘴唇的频率都更高。结合其他行为迹象（如颤抖、尾巴夹在两腿之间和回避），舔嘴唇可以作为犬类压力更广泛行为谱系的一个有价值的组成部分。在这些相同阶段观察到的眼睛表面温度的同步升高进一步支持了舔嘴唇和其他行为作为潜在生理唤醒的外在表现的作用。

我们观察到，无论是行为上的还是热成像上的压力反应，在临床检查后都持续了一段时间，这与先前的生理证据一致。除了Csoltova等人（2017年）报告的心率显著升高外，临床程序期间的心率升高也在多个情境中被记录到，包括咨询室中的心率高于候诊区（Edwards等人，2022年）、在没有主人的情况下接受检查的狗（Stellato等人，2020年）以及更活跃的个体（V?is?nen等人，2005年）。重要的是，尽管检查后立即眼睛表面温度下降，但它仍高于初次等待期间记录的基线值，表明生理唤醒没有恢复到就诊前的水平。相比之下，检查后的与压力相关的行为频率低于候诊室时的频率，可能反映了行为恢复得更快。这种差异表明行为和生理指标并不一定以相同的速度消退，这支持了使用互补措施解释压力反应的必要性。

狗对压力的敏感性可能受到多种个体因素的影响。在我们的研究中，体重不超过5公斤的狗表现出更多的与压力相关的行为，而体重在5.1至20公斤之间的狗则较少，这表明较小的狗可能对临床处理更加敏感或耐受性更低。然而，也有可能较小的狗比较大的狗更容易表现出压力，或者不同的应对方式（例如冻结反应）导致某些个体的压力相关行为表现不足。这一发现与Stanford（1981年）的报告一致，他发现较小的狗更可能表现出恐惧和排尿行为，而较大的狗则更愿意进入诊所，并表现出较少的焦虑迹象。

未观察到肩高对行为或热成像压力指标有显著影响，这表明仅凭身高无法可靠地预测兽医环境中的压力反应性。虽然身高和体重相关，但身高并不能完全反映在处理密集情况下较小体重的行为影响。同样，性别也没有影响我们样本中的行为或热成像反应，这与先前的临床和表现研究结果一致（Stanford，1981年；Elias等人，2021年）。尽管D?ring等人（2009年）注意到雄性狗的恐惧感较低，但绝育状态与压力表达无关，激素对急性压力反应性的影响仍不清楚。

2至6岁的狗表现出比2个月至1岁的狗和6至11岁的狗更多的与压力相关的行为。相反，2至6岁和11岁以上的狗的平均泪阜温度低于2个月至1岁的狗。几种假设可以解释这种差异。年轻的狗可能表现出更明显的生理反应（反映在温度变化中），但由于缺乏经验或行为应对策略未完全发展，表现出较少的明显行为迹象（Starling等人，2013年；Lensen等人，2019年；Puurunen等人，2020年）。相反，成年狗可能表现出更多的行为指标，因为它们已经将诊所与之前的负面经历联系起来（Mongillo等人，2013年；Kubinyi和Iotchev，2020年；Wallis等人，2020年），即使它们的生理唤醒程度相当或更低。此外，个体之间的毛发特征差异（Redaelli等人，2014年；Kwon和Brundage，2019年）也可能导致了不同年龄组之间的观察结果差异。这些结果强调，红外热成像捕捉到了压力反应的一个特定方面——生理唤醒——但可能并不完全对应于所有个体的行为表现。这并不削弱其作为压力指标的可靠性，而是强调了需要将热成像数据与行为观察结合起来解释。

在我们的研究中，还测量了直肠温度，以探讨在潜在压力较大的临床检查期间中枢（核心）和外围（表面）热反应之间的关系。与先前的研究一致，左泪阜的平均表面温度低于直肠温度（例如，Travain等人，2015年；Zanghi，2016年）。然而，我们未发现这两者在检查期间存在显著相关性，表明眼睛表面温度的变化并不直接反映核心体温。这与在休息或运动条件下的先前发现相反，在那些情况下报告了弱相关或依赖情境的相关性（Travain等人，2015年；Zanghi，2016年），并强调眼睛温度应被视为情绪而非核心生理状态的非侵入性指标。在我们的研究中包括这两种测量方法澄清了这一区别，并加强了从行为和情绪角度解释表面温度变化的意义。

尽管这种方法具有实际潜力，但仍有一些研究局限性需要考虑。我们只包括了接受常规或微创程序的狗，并排除了具有攻击性或高度反应性的个体，这可能限制了结果的普遍性。具有更强烈或防御性反应的狗在临床压力下可能会表现出不同的行为和生理模式，因此排除这些个体限制了我们的发现适用于更广泛的临床人群。与压力相关的行为被记录为存在或不存在，而不是量化其持续时间和频率，可能忽略了强度的变化。这种二元方法可能掩盖了行为的更微妙变化，阻止我们检测到压力水平与行为表达之间的剂量-反应关系。此外，包括幼犬和老年狗引入了潜在的发育和老年相关混淆因素：幼犬的行为和感官感知不成熟，而老年狗可能会经历感官衰退、慢性疼痛或认知功能障碍，这些都可能影响压力表达。为了最小化这些影响，我们只包括了临床健康的狗，但无法完全排除年龄相关的影响。未来的研究应考虑详细的健康和认知筛查或对极端年龄组进行单独分析，并采用定量行为评分来捕捉压力反应的完整谱系。

在我们的研究中，同时测量了直肠温度和眼睛表面温度，以探讨在潜在压力较大的临床检查期间中枢（核心）和外围（表面）热反应之间的关系。与先前的工作一致，左泪阜的平均表面温度低于直肠温度（例如，Travain等人，2015年；Zanghi，2016年）。然而，我们未发现这两者在检查期间存在显著相关性，表明在这种情况下眼睛表面温度的变化并不直接反映核心体温。这与在休息或运动条件下的先前发现相反，在那些情况下报告了弱相关或依赖情境的相关性（Travain等人，2015年；Zanghi，2016年），并强调眼睛温度应被视为情绪而非核心生理状态的非侵入性指标。在我们的研究中包括这两种测量方法澄清了这一区别，并加强了从行为和情绪角度解释表面温度变化的意义。

尽管这种方法具有实际潜力，但仍有一些研究局限性需要考虑。我们只包括了接受常规或微创程序的狗，并排除了具有攻击性或高度反应性的个体，这可能限制了结果的普遍性。具有更强烈或防御性反应的狗在临床压力下可能会表现出不同的行为和生理模式，因此排除这些个体限制了我们的发现适用于更广泛的临床人群。与压力相关的行为被记录为存在或不存在，而不是量化其持续时间和频率，可能忽略了强度的变化。这种二元方法可能掩盖了行为的更微妙变化，阻止我们检测到压力水平与行为表达之间的剂量-反应关系。此外，包括幼犬和老年狗引入了潜在的发育和老年相关混淆因素：幼犬的行为和感官感知不成熟，而老年狗可能会经历感官衰退、慢性疼痛或认知功能障碍，这些都可能影响压力表达。为了最小化这些影响，我们只包括了临床健康的狗，但无法完全排除年龄相关的影响。未来的研究应考虑详细的健康和认知筛查或对极端年龄组进行单独分析，并采用定量行为评分来捕捉压力反应的完整谱系。尽管这种方法反映了典型的临床实践，但它可能会在检查过程中加剧狗狗的压力反应。同样，虽然修剪指甲被认为是一个侵入性较小的就诊原因，但它仍然可能在一些狗狗中引发可测量的压力反应，在解释行为数据时应予以考虑。

**结论**
本研究证实，前往兽医诊所，尤其是临床检查阶段，对狗狗来说是一个重要的压力源，这一点通过行为指标和眼睛表面温度的变化得到了证实。经常观察到舔嘴唇、身体颤抖、夹尾巴等与压力相关的行为，尤其是在检查台上被处理时。值得注意的是，在检查过程中泪阜的温度显著升高，并在检查结束后仍然保持较高水平，这支持了使用红外热成像技术作为监测狗狗急性压力反应的补充性、非侵入性工具。行为观察捕捉到了压力反应的明显表现，而红外热成像则提供了关于生理状态的视角。尽管观察到一些差异，例如年轻的狗狗表现出更强的热反应但行为迹象较少，但这些发现强调了结合多种测量方法以更全面地了解狗狗压力的重要性。红外热成像不能替代行为观察，但它可以为临床环境中检测急性压力提供一个额外的、客观的维度。

**个体因素对压力反应的影响**
年龄对这两种测量方法都有影响：2至6岁的狗狗表现出更多的与压力相关的行为，且眼睛表面温度低于年轻和年长的狗狗。体重仅影响行为反应，因为体重较小的狗狗（≤5公斤）表现出明显更多的与压力相关的行为。性别和肩高没有显著影响。这些结果表明，在解释压力的行为和生理指标时，应考虑个体特征，特别是年龄和体重。

**实际应用**
结合行为和生理指标可以帮助兽医更准确地识别压力，优化处理程序，并在临床环境中实施改善动物福利的策略。在候诊室中检测到的预期性压力表明，压力在诊所访问的早期就开始了。通过减少等待时间或调整处理方案等措施可能有助于缓解压力水平。

**未来研究方向**
未来的研究应验证更大、更多样化的犬群中的具体压力行为和生理标志物，并探索不同就诊类型、医疗状况和处理情境下压力反应的动态变化。

**未引用的参考文献**
(Farrar et al., 2020; Hekman et al., 2014)

**伦理声明**
在研究开始前对项目进行了评估，由于该研究的观察性质，布尔诺兽医科学大学的动物福利机构认为无需伦理批准。本研究未涉及《防止虐待动物法》（该法律实施了欧盟议会和理事会关于用于科学目的的动物保护的2010/63/EU指令）所规定的任何干预措施。

**作者贡献声明**
Iveta Bedanova：撰写、审阅与编辑、数据分析
Vladimir Vecerek：撰写、审阅与编辑、验证、监督、资金获取
Lucia Kotianova：撰写、审阅与编辑、方法学、调查
Eva Voslarova：撰写、审阅与编辑、方法学、概念化
Veronika Pokorna：撰写、初稿撰写、资源准备、调查

**利益冲突声明**
作者声明没有利益冲突。该项目未接受任何研究资助。