在KGN颗粒细胞中敲除filamin A蛋白会损害细胞的增殖能力、细胞周期进程、迁移能力以及在机械应力作用下的细胞骨架结构

《Biological Research》：Knockout of filamin A in KGN granulosa tumor cells impairs proliferation, cell cycle progression, migration, and cytoskeletal organization under mechanical stress

　　

摘要

背景

Filamin A（FLNA）是一种与肌动蛋白结合的蛋白质，能够调节细胞的机械敏感性，并在多种细胞类型中充当细胞内信号传导的支架。它还与肿瘤生长有关。我们最近在人类卵巢颗粒细胞以及KGN细胞（一种颗粒细胞肿瘤）中检测到了FLNA的表达。

结果

对51个KGN样本进行的免疫组化分析显示，FLNA的表达存在异质性：约20%的样本中FLNA表达较弱，18%的样本中表达较强，而大多数样本中表达水平适中。因此，我们使用CRISPR/Cas9基因编辑技术在KGN细胞中进行了功能研究。蛋白质组学分析发现，在FLNA被敲除后，蛋白质的丰度发生了显著变化：表达增加的蛋白质主要与细胞黏附、细胞骨架组织、细胞形态调控和脂质代谢过程相关；而表达减少的蛋白质则与DNA复制、细胞分裂和细胞周期调控有关。FLNA敲除细胞的细胞体积增大，增殖能力减弱，类固醇生成也受到轻微影响。FLNA的缺失进一步降低了细胞的迁移速度，改变了细胞在流动条件下的肌动蛋白骨架排列，并影响了参与细胞骨架构建、细胞黏附以及在剪切应力下机械感应的基因的表达。

结论

我们的研究结果表明，FLNA在塑造KGN细胞的细胞结构、运动能力和增殖过程中起着关键作用。因此，FLNA表达的变化可能会影响细胞内的信号传导以及对机械刺激的反应，无论是在生理还是病理情况下。