利用新型PCRBIO/DIG-ELISA检测方法提高牛结核病诊断效力的策略

《Veterinary Research Communications》：Strategy for Improving the Diagnostic Efficacy of Bovine Tuberculosis Using a Novel PCRBIO/DIG-ELISA Assay

　　

摘要

牛结核病（BTb）是一种由Mycobacterium bovis引起的重要人畜共患病。在阿根廷，国家官方控制计划规定，当牛的结核菌素皮肤试验（TSTS）结果呈阳性时，必须对牛进行屠宰。每年两次检测结果均为阴性的牛群被视为无感染风险；然而，在某些无反应性的牛中观察到了许多假阴性病例。在我们之前的研究中，发现有16%的TSTS阳性牛群的牛奶通过聚合酶链反应插入序列6110（PCR_TD?IS6110）检测方法对Mycobacterium bovis呈阴性。为了优化这种诊断方法，我们开发了一种基于BIO（生物素）和DIG（地高辛）标记引物的PCR_BIO/DIG技术，并通过酶联免疫吸附测定（ELISA）来检测扩增的脱氧核糖核酸（DNA）。在以PCR_TD?IS6110和TSTS的结果作为复合金标准的情况下，确定了该方法的临界值、诊断特性和分析特性。其诊断灵敏度和特异性分别为97%和66%。PCR_BIO/DIG-ELISA的分析灵敏度是PCR_TD?IS6110的25倍，因为通过PCR_BIO/DIG-ELISA检测的16个牛奶样本呈阳性，而所有这些样本在PCR_TD?IS6110检测中均为阴性，其中9个样本的TSTS结果也为阴性。因此，所开发的PCR_BIO/DIG-ELISA技术对于识别感染牛群（尤其是那些TSTS结果为阴性的牛群）非常有用，因为这些牛群对流行病学控制构成风险。此外，该技术还可以通过分析具有与牛结核病相符病变的组织来帮助确认被屠宰但TSTS结果为阴性的牛的感染情况。

图形摘要

此图像的替代文本可能是由人工智能生成的。

牛结核病（BTb）是一种由Mycobacterium bovis引起的重要人畜共患病。在阿根廷，国家官方控制计划规定，当牛的结核菌素皮肤试验（TSTS）结果呈阳性时，必须对牛进行屠宰。每年两次检测结果均为阴性的牛群被视为无感染风险；然而，在某些无反应性的牛中观察到了许多假阴性病例。在我们之前的研究中，发现有16%的TSTS阳性牛群的牛奶通过聚合酶链反应插入序列6110（PCR_TD?IS6110）检测方法对Mycobacterium bovis呈阴性。为了优化这种诊断方法，我们开发了一种基于BIO（生物素）和DIG（地高辛）标记引物的PCR_BIO/DIG技术，并通过酶联免疫吸附测定（ELISA）来检测扩增的脱氧核糖核酸（DNA）。在以PCR_TD?IS6110和TSTS的结果作为复合金标准的情况下，确定了该方法的临界值、诊断特性和分析特性。其诊断灵敏度和特异性分别为97%和66%。PCR_BIO/DIG-ELISA的分析灵敏度是PCR_TD?IS6110的25倍，因为通过PCR_BIO/DIG-ELISA检测的16个牛奶样本呈阳性，而所有这些样本在PCR_TD?IS6110检测中均为阴性，其中9个样本的TSTS结果也为阴性。因此，所开发的PCR_BIO/DIG-ELISA技术对于识别感染牛群（尤其是那些TSTS结果为阴性的牛群）非常有用，因为这些牛群对流行病学控制构成风险。此外，该技术还可以通过分析具有与牛结核病相符病变的组织来帮助确认被屠宰但TSTS结果为阴性的牛的感染情况。

图形摘要

此图像的替代文本可能是由人工智能生成的。