一种含有gE/gI/US9三重缺失基因的灭活疫苗能够提供针对新兴PRV变种感染的完全保护

《BMC Veterinary Research》：A gE/gI/US9-triple deletion inactivated vaccine provides complete protection against emerging PRV variant infection

　　

摘要

自2011年以来，中国出现了伪狂犬病病毒（PRV）的变异株，传统疫苗对这些变异株的保护效果不佳，导致了巨大的经济损失。因此，迫切需要开发一种新型疫苗来有效应对这一挑战。本研究采用了同源定向修复（HDR）-CRISPR/Cas9技术，特异性地敲除了gI、gE和US9基因，并将这些基因敲除后的病毒制备成了灭活疫苗。随后，对这些重组病毒以及之前构建的gE/gI/US9/US2缺失株进行了系统的评估。体外分析显示，所有突变体的病毒滴度和生长动力学与亲本株相当，但形成的菌斑较小。经过20次传代后未检测到基因回复现象，证实了其良好的遗传稳定性。动物实验表明，gE/gI/US9三基因缺失突变体能够诱导更强的gB特异性中和抗体，增强Th1细胞因子（IFN-γ、TNF-α）的分泌，并促进淋巴细胞增殖，同时不影响Th2细胞因子（IL-6、IL-4）的水平。此外，所有接受灭活病毒免疫的组均达到了完全的保护效果，保护率超过了商业灭活疫苗的80%。值得注意的是，三基因缺失组在感染后的体重损失较小，脑部和肺部的病毒载量也较低。综上所述，本研究认为三基因缺失株rPRV ΔgE/gI/US9是一种极具前景的灭活疫苗候选株，为伪狂犬病的预防和控制提供了新的策略。