首次通过实验方法表征的变形杆菌噬菌体内溶酶体具有独特的金属辅因子依赖性

《Applied Microbiology and Biotechnology》：First experimentally characterised Proteus phage endolysins have distinct metal cofactor dependencies

　　

摘要

Proteus mirabilis是一种革兰氏阴性泌尿系统病原菌，是导致许多导管相关尿路感染（CAUTIs）的罪魁祸首。由于CAUTI病原体对抗微生物药物的耐药性日益增加，因此迫切需要新的抗菌解决方案。噬菌体溶菌酶是一类新兴的抗菌剂，但迄今为止尚未有来自Proteus mirabilis噬菌体的溶菌酶被报道。在这里，我们描述了两种新的Proteus噬菌体溶菌酶LysPM1和LysPM2，它们分别含有Peptidase_M15_3和CHAP结构域。我们通过实验验证了这两种溶菌酶在与外膜通透剂（如EDTA、柠檬酸和氯仿）联合使用时对多种Proteus菌株的抗菌活性，同时也验证了它们对冷冻细菌的抗菌效果。这两种酶在pH 7–8时活性最强，并且能在高达60°C的温度下保持活性。当用EDTA处理时，这两种溶菌酶的裂解活性完全丧失，这表明二价阳离子参与了其催化机制；向LysPM1中添加Ca2?和Zn2?，向LysPM2中添加Ca2?和Mn2?后，其活性部分得以恢复。我们的研究证实了LysPM1和LysPM2是首次被实验表征的Proteus噬菌体溶菌酶，其中LysPM2还是首个被实验表征的含有单个CHAP结构域的革兰氏阴性溶菌酶。这些发现可能为进一步开发用于治疗Proteus感染的噬菌体衍生裂解酶提供指导。

图形摘要

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要点

• LysPM1和LysPM2是首次被实验表征的Proteus噬菌体溶菌酶。

• 它们都是单结构域溶菌酶：LysPM1含有Peptidase_M15_3结构域，LysPM2含有CHAP结构域。

• 它们的活性需要金属辅因子：LysPM1需要Zn2?，LysPM2需要Ca2?。