基于NOTA的抗体片段标记剂的开发，该标记剂可降低肾脏早期的放射性水平

《EJNMMI Radiopharmacy and Chemistry》：Development of NOTA-based antibody-fragment labeling agent that reduces early renal radioactivity levels

　　

摘要

背景

镓-68（⁶⁸Ga）和铜-64（⁶⁴Cu）是用于核医学成像和治疗的放射性金属。化合物1,4,7-三氮杂环壬烷-1,4,7-三乙酸（NOTA）能与这些放射性金属形成稳定的复合物。然而，用⁶⁸Ga/⁶⁴Cu标记的低分子量蛋白质在肾脏中的放射性水平较高。为了解决这个问题，最近设计了一种名为NOTA-偶联的Met-Val-Lys（MVK）-马来酰亚胺（Mal）（NOTA-MVK-Mal）的试剂，以降低肾脏的放射性水平。该试剂通过肾脏刷状缘酶的作用将放射性金属-NOTA-蛋氨酸释放为放射性代谢物来实现这一目标。由于⁶⁸Ga和⁶⁴Cu的半衰期较短，因此从注射后早期开始降低肾脏的放射性至关重要。基于这一分子策略，本研究设计并合成了一种新的基于NOTA的放射性金属标记剂，即NOTA-偶联的Phe-Gly-Lys（FGK）-Mal（NOTA-FGK-Mal），它在注射后早期阶段能够降低肾脏的放射性。

结果

鉴于FGK序列是肾脏刷状缘酶的底物，将异硫氰酸苯基-NOTA通过FGK连接基团与抗体Fab片段偶联，生成[⁶⁷Ga]Ga-NOTA-FGK-Fab。使用低分子量的[⁶⁷Ga]Ga-NOTA-FGK衍生物评估了酶对该连接基团的识别能力。将[⁶⁷Ga]Ga-NOTA-FGK-Fab注射到小鼠体内后，其放射性分布与[⁶⁷Ga]Ga-NOTA-MVK-Fab进行了比较。结果发现，刷状缘膜酶能够识别FGK连接基团，并释放出[⁶⁷Ga]Ga-NOTA-Phe-Gly。这表明[⁶⁷Ga]Ga-NOTA-FGK衍生物中的FGK序列实际上是被识别为GK序列，而非预期的FG序列。当将[⁶⁷Ga]Ga-NOTA-FGK-Fab注射到小鼠体内时，其肾脏放射性水平低于[⁶⁷Ga]Ga-NOTA-MVK-Fab，且肿瘤的放射性水平没有降低。

结论

这些结果表明，NOTA-FGK(Mal)是一种有用的放射性金属标记剂，适用于低分子量蛋白质，可以从注射后早期就开始降低肾脏的放射性水平。这种分子设计不依赖于抗体的类型或其构建方式，预计NOTA-FGK(Mal)也适用于多种目标分子。