《Animal Research and One Health》：Modulation of Animal Gut Health by Milk Oligosaccharide
乳寡糖（MOs)是母乳中一类含量丰富、结构多样且复杂的碳水化合物，日益被认为是生命早期肠道健康的关键决定因素。其组成和结构多样性在不同哺乳动物物种间存在显著差异，从而塑造宿主-微生物相互作用并促进肠道屏障稳态。本综述系统总结了不同哺乳动物MOs的组成和结构变异，并基于结构分类框架讨论了其在肠道稳态中的调控作用。这些作用通过其对肠道微生物菌群组成和功能、肠上皮屏障及免疫功能的协同效应而介导。通过整合这些维度，本综述概述了MO-宿主相互作用的概念框架，并强调了MO衍生营养策略在支持哺乳动物生命早期肠道健康方面的潜力。
**1 引言**
维持幼龄畜禽健康是现代畜禽生产的核心挑战，直接影响动物生长性能和养殖场经济效益。在全球范围内，每年约有1000万头仔猪因水肿和断奶后腹泻死亡。实践中，病原体暴露、断奶应激和高密度饲养等多重应激源频繁破坏新生动物的肠道稳态。肠道对于营养消化、吸收和分布至关重要，同时作为宿主的主要防御屏障。肠道健康在很大程度上取决于黏膜屏障的完整性，该屏障由微生物、物理、化学和免疫组分共同构成，协同维持动物肠道稳态和宿主健康。生命早期营养干预在支持肠道健康方面显示出相当潜力。
MOs是存在于乳汁中的一类复杂多样的寡糖总称。在人乳中，MOs是第三丰富的固体成分，浓度为5–20 g/L；而在猪乳(6.9 g/L)、牛乳(100 mg/L)和山羊乳(100–350 mg/L)中浓度相对较低。尽管动物乳中MOs浓度较低，但其具有独特的唾液酸化和岩藻糖化结构，能有效调节幼龄动物肠道健康。与蛋白质、脂质等不同，大多数MOs在胃和小肠中抵抗消化，以完整形式到达结肠发挥益生元效应。与其他碳水化合物相比，MOs能特异性促进益生菌生长并抑制病原体增殖，还能增强肠上皮细胞(IEC)增殖、减少凋亡并加强抗炎反应，从而维持肠道稳态。
多项研究表明，MOs能够调控肠道微生物菌群、促进肠道健康并增强免疫应答。例如，MOs使婴儿肠道中双歧杆菌属(Bifidobacterium)丰度增加2.8倍，短链脂肪酸(SCFAs)水平升高113%。在小鼠模型中，MOs逆转脂多糖(LPS)诱导的结肠缩短并降低促炎细胞因子水平。在仔猪试验中，唾液酸乳糖显著降低腹泻发生率和大肠杆菌(Escherichia coli)丰度，增加盲肠中双歧杆菌属和乳酸杆菌属(Lactobacillus)丰度，并使21日龄窝重提高7.5%。此外，2'-岩藻糖基乳糖(2'-FL)显著增强仔猪外周血单个核细胞中干扰素-γ(IFN-γ)分泌，并使回肠隐窝深度增加9.5%。
**2 MOs的组成和结构特征**
**2.1 MOs的结构特征**
MOs通常由3–10个单糖单元通过糖苷键共价连接形成具有还原醛基末端的游离寡糖。由于这些分子的结构复杂性，MO组成和结构的全面表征仍然有限。当前研究主要集中于人乳寡糖(HMOs)和牛乳寡糖(BMOs)，而对猪乳寡糖(PMOs)的研究较少。MOs主要由五种单糖组成：葡萄糖、半乳糖、N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)、岩藻糖(Fuc)和N-乙酰神经氨酸(Neu5Ac)，它们以特定组合组装形成复杂且高度有序的分子结构。结构上，乳糖作为MOs的核心骨架和还原端，可通过依次添加β-连接的Galβ1-3GlcNAc或Galβ1-2GlcNAc单元进行延伸。这些延伸过程可重复多达25次，产生具有不同链长度和构型的线性或分支寡糖，从而形成MOs显著的结构多样性。
目前已在人乳、猪乳、牛乳和山羊乳中鉴定出多种MO结构，其中六种为常见共享的MOs。根据其化学性质和结构特征，这六种MOs可分为三大类别：酸性唾液酸化MOs、中性岩藻糖化MOs和中性非岩藻糖化MOs。酸性唾液酸化MOs包括3'-唾液酸乳糖(3'-SL)和6'-唾液酸乳糖(6'-SL)；中性岩藻糖化MOs包括2'-FL和3-岩藻糖基乳糖(3-FL)；中性非岩藻糖化MOs包括乳糖-N-四糖(LNT)和乳糖-N-新四糖(LNnT)。
**2.2 MO组成的种属特异性变异**
MOs的组成和相对比例在不同哺乳动物物种间存在显著差异。HMOs中，酸性唾液酸化、中性非岩藻糖化和中性岩藻糖化MOs分别约占12%、39%和49%。相比之下，成熟母猪乳以酸性唾液酸化MOs为主(约56%)，其次为中性岩藻糖化MOs(33%)和中性非岩藻糖化MOs(9%)。BMOs中酸性唾液酸化MOs占主导(约70%)，而中性岩藻糖化和中性非岩藻糖化MOs分别贡献约25%和5%。山羊初乳中，中性非岩藻糖化MOs约占51%，酸性唾液酸化MOs约45%，中性岩藻糖化MOs约4%。
**2.3 MOs的基因型依赖性变异**
同一物种内MO组成和相对丰度存在显著的个体间变异，主要由遗传因素驱动。在人中，由分泌型基因(Se)和Lewis基因(Le)表达所定义的母体表型在塑造HMO谱中起核心作用，这些基因分别编码α-1,2-岩藻糖基转移酶2(FUT2)和α-1,3/4-岩藻糖基转移酶3。基于Se和Le基因表达，母体表型可分为四组(Se
+Le
+、Se
?Le
+、Se
+Le
?和Se
?Le
?)，每组具有特征性的优势HMO谱。
其他哺乳动物中也存在MO组成的基因型相关异质性。在奶牛中，Ayrshire牛乳中性和岩藻糖化MOs占总MOs的63.8%，而Northern Finnish牛乳中仅占46.7%。Yorkshire猪乳富含中性PMOs(70%–80%)，而Landrace猪乳含有更高比例的唾液酸化PMOs(60%–80%)。这些观察结果强调了MO组成和比例的显著基因型和物种特异性差异，表明MO合成受到严格的遗传调控。
**3 MOs与肠道微生物菌群的相互作用**
胃肠道微生物群的早期定植对肠道屏障功能发育和黏膜免疫系统调节至关重要，对哺乳动物肠道健康和生长性能具有长期影响。作为乳汁的关键营养成分，MOs在此期间塑造肠道微生物生态方面发挥重要作用，包括选择性富集有益分类群如双歧杆菌属、乳酸杆菌属和瘤胃球菌科(Ruminococcaceae)。
**3.1 MOs对肠道微生物黏附的影响**
黏附素是介导细菌附着于宿主细胞的特化表面结构或相关蛋白。MOs通过上调各种黏附相关因子促进有益细菌在宿主肠道中的定植。2'-FL可上调双歧杆菌属中分选酶依赖性菌毛、兼职蛋白和黏附相关基因(tal、eno、tuf和groL)的表达，以及Akkermansia muciniphila中的纤连蛋白结合自转运黏附素的表达，从而增强其在体内的定植效率和丰度。3'-SL和6】'-SL也促进婴儿双歧杆菌(B. infantis)表面分选酶依赖性菌毛的表达，显著增强其对HT-29细胞的黏附率。
除促进益生菌定植外，完整的MOs还可作为信号分子直接抑制病原体黏附。MOs的岩藻糖化结构与IEC表面H抗原的核心结构高度相似，提示MOs可能通过与凝集素样黏附素结合来降低大肠杆菌和空肠弯曲杆菌(Campylobacter jejuni)的黏附能力。2'-FL已被证明可将小鼠小肠和结肠中的大肠杆菌定植减少约90%，并降低大鼠肠道中肠杆菌科(Enterobacteriaceae)的丰度。MOs的唾液酸化结构对应于细胞受体和黏蛋白上的唾液酸，竞争性结合细菌表面黏附素从而干扰病原体黏附。3'-SL模拟唾液酸化受体阻断幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)对胃上皮细胞的黏附，6'-显著抑制大肠杆菌与Caco-2细胞的结合并降低仔猪结肠中潜在致病性肠杆菌科的丰度。此外，MOs还可通过促进黏蛋白-2(MUC2)分泌和增强防御素表达来限制病原体与IECs的结合。
**3.2 肠道微生物菌群对MOs的降解和利用**
与广谱益生元不同，MOs仅支持有限数量细菌物种的生长。主要MO利用菌包括双歧杆菌属、拟杆菌属(Bacteroides)和A. muciniphila，且菌株间MO利用能力存在差异。其中，双歧杆菌属是主要的MO降解菌，采用两种不同的机制：细胞内和细胞外糖苷酶依赖性降解。
细胞内降解主要见于婴儿双歧杆菌和短双歧杆菌(B. breve)。在婴儿双歧杆菌表面，多种特异性底物结合蛋白识别MOs并通过ABC转运蛋白复合体将其转运至细胞内，由糖苷水解酶(GHs)包括GH29和GH95初步降解为单糖。在短双歧杆菌中，lnt(Bbr_0526–0530)和nah(Bbr_1554–1560)位点参与LNT和LNnT的摄取和分解代谢。lnt位点编码LNT特异性转运蛋白，将LNT和LNnT水解为半乳糖和乳糖-N-三糖II(LNT II)；nah位点促进LNT和LNnT的摄取并编码从LNT II切割GlcNAc的β-N-乙酰葡糖胺酶，留下乳糖以供后续降解。双歧双歧杆菌(B. bifidum)则采用细胞外糖苷酶依赖性策略，分泌胞外GHs在细胞外降解MOs。
除双歧杆菌属外，拟杆菌属物种携带编码多糖利用位点(PUL)的基因簇，其编码参与肠道黏蛋白降解的水解酶。鉴于黏蛋白主要由Neu5Ac、Fuc、GlcNAc和半乳糖组成，与MOs结构相似，推测拟杆菌属在MO降解中也发挥重要作用。多形拟杆菌(B. thetaiotaomicron)对MOs具有高代谢能力，通过PUL编码的转运蛋白识别、结合和转运MOs，随后进行细胞内降解并释放葡萄糖、半乳糖、Fuc和GlcNAc。与拟杆菌属相似，A. muciniphila具有强大的黏蛋白降解能力，其编码的GHs可从黏蛋白中去除末端Neu5Ac和Fuc，从而高效利用MOs作为碳源支持生长和SCFA产生。
**3.3 微生物菌群介导的MOs代谢转化**
MOs的降解和利用涉及广泛的微生物交叉喂养，其中微生物代谢产物作为其他微生物生长所需的营养或能量，从而促进微生物群落中的互利合作。体外共培养研究表明，双歧杆菌属和拟杆菌属对MOs的主要降解产物包括葡萄糖、半乳糖、Fuc、Neu5Ac和乳糖，可被Anaerostipes caccae和Eubacterium hallii利用产生丙酸盐和丁酸盐等SCFAs。
从岩藻糖化MOs释放的Fuc由Bifidobacterium kashiwanohense通过岩藻糖代谢基因簇(fum)编码的一系列酶代谢。通过fumB-fumF的序贯催化，Fuc转化为中间体并最终裂解为L-乳醛和丙酮酸，随后由FumG编码的还原酶还原为1,2-丙二醇，而丙酮酸进入中心代谢途径，促进乳酸和SCFAs的产生。Neu5Ac通过单独途径代谢，由Neu5Ac代谢相关基因簇编码的一系列酶(NanA、NanK、NanE、NagA和NagB)催化，通过裂解、磷酸化、异构化、去乙酰化和去氨作用，最终生成果糖-6-磷酸。
**4 MOs-微生物菌群相互作用在调节肠黏膜屏障功能中的作用**
肠黏膜屏障由多层微生物、化学、物理和免疫组分构成，是抵御病原体入侵的主要防线。研究表明，MOs能够增强化学屏障的防御能力、维持物理屏障的结构完整性，并促进肠道免疫屏障的平衡和反应性。本节系统综述MOs与肠道微生物菌群相互作用影响哺乳动物肠黏膜屏障功能的具体机制。
**4.1 MOs对化学屏障的调控作用**
肠道化学屏障主要由黏蛋白和抗菌肽组成，共同阻止微生物菌群与IECs的直接接触。MUC2主要由杯状细胞产生，是黏液层的主要结构成分，而TFF3与MUC2协同作用维持黏膜屏障完整性。体外研究表明，2'-FL显著增加LS174T杯状细胞中内质网伴侣蛋白的mRNA表达水平，包括结合免疫球蛋白蛋白、蛋白质二硫键异构酶、TFF3、高尔基体定位磺基转移酶半乳糖-3-O-磺基转移酶2和碳水化合物磺基转移酶5，从而催化MUC2的磷酸化和二硫键形成，最终促进黏蛋白分泌。与单一的体外环境不同，肠道环境高度复杂。2'-FL选择性富集噬黏蛋白的Akkermansia菌，上调宿主肠道MUC2合成和相关糖基转移酶的基因表达，共同促进黏液层的产生、修饰和生理更新，从而抑制小鼠中病原体对IEC的黏附。
抗菌肽也是肠道化学屏障的主要成分，包括防御素、组织蛋白酶和溶菌酶等，其中防御素对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均具有杀菌活性。LNT II促进Caco-2细胞分泌β-防御素-1并恢复厚壁菌门/拟杆菌门(Firmicutes-to-Bacteroidetes)比值从而缓解炎症。3-FL增强β-防御素-2分泌，减少Caco-2细胞中侵袭性大肠杆菌数量达99%并改善细胞存活。此外，MOs还可通过其代谢产物SCFAs发挥作用，SCFAs结合IEC表面的G蛋白偶联受体(GPRs)，激活哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和信号转导与转录激活因子3(STAT3)信号通路，从而促进IEC中β-防御素表达。
**4.2 MOs介导的肠道物理屏障调控**
肠道屏障由紧密连接(TJs)和IECs组成。肠上皮经历快速自我更新，约每3–5天完全更新一次。这一过程由隐窝底部的肠干细胞(ISCs)驱动，其沿隐窝绒毛轴不断增殖和分化以替换衰老和脱落的IEC，从而维持上皮完整性和屏障功能。本节从三个方面总结MOs在调节肠道物理屏障中的作用和机制：IEC增殖和凋亡的调控、TJ蛋白表达和分布的调节，以及ISC增殖和分化的控制。
**4.2.1 MOs对IEC增殖和凋亡的调控作用**
IEC形成沿肠绒毛隐窝轴的连续单层上皮屏障，构成抵御病原体和有害物质入侵的第一道物理防线。增殖与凋亡之间的平衡对维持幼龄动物肠道稳态至关重要。缺氧条件下，MOs促进IECs增殖并减少凋亡，效果优于低聚果糖和低聚半乳糖。研究表明，3'-SL和6'-SL促进上皮细胞增殖、抑制凋亡并预防坏死性小肠结肠炎造成的肠道损伤，但其具体调控机制不同。6'-SL通过上调Caco-2细胞中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)促进肽聚糖识别蛋白3的表达和活性，从而激活核因子κB(NF-κB)抑制因子亚基α，抑制NF-κB的核转位，减少促炎细胞因子水平并降低凋亡率。PPARγ的激活可能与6'-SL的唾液酸化结构与半乳凝素-3的结合有关。2'-FL通过抑制STAT3激活发挥抗凋亡作用，上调抗凋亡基因B细胞淋巴瘤/白血病2(Bcl-2)并下调促凋亡基因Bcl-2相关X蛋白(Bax)和半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3(caspase-3)。
**4.2.2 MOs对TJ蛋白表达和分布的影响**
TJ蛋白通常分为跨膜蛋白(包括claudin家族和occludin)和细胞质支架蛋白(如zonula occludens蛋白)，共同维持肠道物理屏障的完整性。2'-FL和3-FL均被证明可显著恢复ZO-1、occludin和claudins的表达。具体而言，2'-FL可通过减少结肠组织中肿瘤坏死因子受体相关因子6的表达、抑制STAT3-NF-κB的磷酸化并上调ZO-1和occludin蛋白水平来修复肠道损伤。该效应可能归因于其末端α1,2-岩藻糖基结构被IEC识别，从而抑制CD14表达。3'-SL和6'-SL也直接上调ZO-1基因表达，但其调控机制与2'-FL不同。酸性唾液酸化MOs的半乳糖和唾液酸结构可与产肠毒素大肠杆菌结合，减少细菌-细胞相互作用，从而阻断TLR4/MyD88/NF-κB通路的激活并抑制促炎信号，最终增强上皮屏障功能。
MOs还可被微生物菌群降解利用生成SCFAs和乳酸，从而调节TJ蛋白的表达和分布。乳酸和丁酸盐可促进ZO-1表达增加，而乙酸盐和丙酸盐显著增加IPEC-J2细胞中claudin-4的表达。此外，丁酸盐可通过激活AMP激活蛋白激酶，抑制肌球蛋白轻链激酶/肌球蛋白调节轻链2信号通路和蛋白激酶C β2磷酸化，促进Caco-2细胞中TJ蛋白的重组装。
**4.2.3 MOs介导的ISC增殖和分化调控**
ISCs可增殖并分化为多种上皮谱系，包括杯状细胞、潘氏细胞(Paneth cells)和肠细胞，共同形成绒毛隐窝结构，协同支持肠道消化、营养吸收和屏障维持的核心功能。研究表明，MOs补充增加仔猪和大鼠空肠绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度比值，增强隐窝细胞增殖，从而促进上皮更新。肠道类器官模型进一步证明，MOs通过抑制TLR4/NF-κB通路激活增加肠道隐窝中增殖细胞数量并上调ISC标志物Lgr5的表达，从而促进肠上皮再生。此外，MOs通过激活mTOR和PPAR信号上调肠细胞分化标志物如醛酮还原酶家族1成员C1、MUC13和载脂蛋白A4的表达。
关于单个MOs对ISC增殖和分化影响机制的研究较少。例如，LNnT促进小鼠结肠ISCs的增殖和分化，并调节肠道微生物菌群以促进早期肠道发育。3'-SL和6'-SL提供唾液酸，促进多唾液酸合成，介导胶质细胞源性神经营养因子信号，并调节cAMP反应元件结合蛋白的磷酸化，从而促进ISCs增殖并分化为IECs、杯状细胞和潘氏细胞。
肠道共生菌降解MOs产生的代谢产物也参与调控ISC增殖和分化。由共生菌降解2'-FL产生的Fuc可通过上调FUT2表达介导缺氧上调蛋白1的岩藻糖化，选择性抑制内质网应激下促凋亡信号IRE1/TRAF2/ASK1/JNK通路，最终维持ISCs的存活和自我更新，驱动上皮修复和再生。Fuc补充可增加小鼠中Akkermansia的丰度并增加丙酸盐和乙酸盐的产生，从而以Gpr41/Gpr43依赖性方式激活Wnt/β-连环蛋白信号通路，促进ISC分化。乳酸作为MOs的重要代谢产物，可结合潘氏细胞和肠道基质细胞表面的Gpr81，激活Wnt/β-连环蛋白信号通路，增加小鼠和猪中Lgr5
+ ISC数量。
**4.3 MOs对肠道免疫功能的调控作用**
MOs通过与免疫受体相互作用、调节免疫细胞通信和减轻炎症反应来发挥免疫调节作用。研究表明，哺乳期仔猪口服补充唾液酸乳糖可增加血清IgG并降低肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平，突显MOs摄入与免疫调节之间的潜在关联。
**4.3.1 MOs对免疫细胞模式识别受体的调控**
MOs与免疫受体特别是Toll样受体(TLRs)和凝集素的相互作用，在幼龄动物肠道免疫系统的发育和功能中发挥关键作用。TLRs主要表达于肠上皮屏障附近的树突状细胞(DCs)表面，可诱导T细胞分化并促进T和B细胞之间的相互作用。MOs通过TLRs调节肠道免疫，不同类型的MOs对TLRs产生不同的调节效应。在唾液酸化MOs中，6'-SL可与激动剂ssRNA40协同增强TLR8。中性岩藻糖化MOs中的3-FL含有适合TLR2结合口袋的α1-3连接Fuc结构，可激活TLR2，但2'-FL不能。相反，LNT II具有末端GlcNAc结构，可与多种TLRs的保守富含亮氨酸重复序列结合，广泛激活TLRs。2'-FL、3-FL、6'-SL和LNnT均抑制TLR4、TLR5和TLR7，可能是因为其糖链干扰配体与TLRs的结合，从而减少凋亡、维持免疫稳态并缓解肠道炎症。
MOs还可与表达于免疫和上皮细胞表面的凝集素相互作用，从而调节免疫反应。研究表明，LNnT、LNT、LNFP II、LNFP III和LNDFH II等中性MOs含有β-半乳糖苷结构，可作为半乳凝素受体配体，与半乳凝素高特异性结合从而发挥免疫调节作用。酸性唾液酸化MOs通过其唾液酸化糖链结构与唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素(Siglecs)结合，传递抑制信号并调节先天和适应性免疫系统。3'-SL和6'-SL结合Siglec-5和Siglec-9，调节T细胞趋化和活化，同时抑制抗肿瘤免疫应答。
**4.3.2 MOs对免疫细胞的激活作用**
MOs激活包括巨噬细胞、DCs和中性粒细胞在内的多种免疫细胞以发挥免疫调节作用。配方奶中补充MOs混合物显著增加仔猪外周血中自然杀伤细胞和嗜碱性粒细胞数量，以及肠系膜淋巴结中记忆效应T细胞数量，效果优于益生元。在无菌小鼠模型中，MOs上调肠道黏膜中免疫调节基因如FOXP3和CCL20的表达，增加调节性T细胞(Treg cells)和浆细胞比例，从而展示出不依赖于肠道微生物菌群的免疫调节效应。
单个MOs可通过调节免疫细胞的增殖、分化和迁移独立调控免疫应答。3'-SL和6'-SL结合Siglecs，促进LPS处理DCs分泌促炎因子(IL-12p70、IL-23和TNF-α)以及抗炎因子(IL-6和IL-10)，从而促进Th1和Th17应答。此外，3'-SL和6'-SL通过NF-κB/MAPK信号通路激活巨噬细胞向M1表型极化，促进活性氧释放并增强吞噬能力。3'-SL还可竞争性干扰选择素-配体(含Neu5Ac)相互作用，从而抑制中性粒细胞黏附和迁移，有助于先天免疫应答。
中性岩藻糖化MOs对肠道免疫稳态的影响与酸性唾液酸化MOs不同。2'-FL增强DCs分泌IL-15，诱导T细胞向Th1和Th2表型分化，产生混合T细胞免疫应答。2'-FL促进STAT6磷酸化，影响巨噬细胞激活状态，增加M2巨噬细胞数量并减少M1巨噬细胞数量。2'-FL减少小鼠结肠中巨噬细胞炎性蛋白-2的表达，该蛋白可招募中性粒细胞至炎症部位并与中性粒细胞表面的CXC趋化因子受体2结合，增强其吞噬和杀菌能力。
MOs被共生菌代谢为SCFAs，随后作用于免疫细胞调节宿主免疫应答。丁酸盐抑制表皮生长因子受体(EGFR)/STAT1信号通路，下调CXC趋化因子配体10(CXCL10)和CC趋化因子配体2(CCL2)的表达，抑制巨噬细胞向促炎M1表型极化，从而缓解肠道炎症并恢复免疫功能。此外，丁酸盐可能通过结合GPR41受体并抑制组蛋白去乙酰化酶，上调辅助T细胞和先天淋巴细胞中缺氧诱导因子1α和芳香烃受体的表达，最终促进IL-22分泌，从而维持肠道免疫稳态并抵抗炎症损伤。
**5 总结与展望**
作为母乳中的重要生物活性成分，MOs通过多种机制在维持幼龄哺乳动物肠道健康方面发挥重要作用。本综述系统总结了当前关于不同哺乳动物物种MOs组成和结构多样性的知识，并从肠道微生物菌群调控、肠道屏障功能(包括化学和物理屏障)以及免疫调节三个相互关联的角度，重点阐述了MOs调控肠道稳态的机制。尽管MOs研究取得显著进展，仍有若干问题尚待探索：首先，单个MOs作用机制的研究仍然有限，未来研究应整合结构生物学以阐明其功能的关键结构决定因素；其次，当前关于MOs介导免疫细胞及其受体调控的机制见解主要来自体外研究，强调了在生理相关动物模型中进行更系统验证的必要性；最后，MOs的许多生物学功能依赖于微生物降解和代谢转化，而肠道微生物组不仅包括细菌，还包括真菌和病毒，未来研究应考虑跨界相互作用的综合作用。
