《Journal of Ethnopharmacology》：Huo-Xue-Xiao-Zhong Decoction prevents thrombus formation of deep vein thrombosis by targeting SOAT2 to modulate the AKT and ERK pathways
编辑推荐：
李志正|杨丽娟|王荣毅|刘洋|叶国宇|文立成|龙伟标|李凡兵|宋恩云南中医药大学第一临床医学院，中国昆明市玉华路1076号，650500摘要民族药理学相关性活血消肿汤（HXXZ）是一种含有14种草本成分的传统中药制剂，在预防深静脉血栓形成（DVT）的临床试验中显示出显著疗效和良好
李志正|杨丽娟|王荣毅|刘洋|叶国宇|文立成|龙伟标|李凡兵|宋恩
云南中医药大学第一临床医学院，中国昆明市玉华路1076号，650500
摘要
民族药理学相关性
活血消肿汤（HXXZ）是一种含有14种草本成分的传统中药制剂，在预防深静脉血栓形成（DVT）的临床试验中显示出显著疗效和良好的安全性。然而，其治疗效果背后的分子机制仍有待阐明。
研究目的
本研究旨在探讨HXXZ预防DVT血栓形成的分子机制。
材料与方法
采用HPLC-Q-TOF-MS技术对HXXZ的化学成分进行了分析。在DVT小鼠模型（每组8只）和TNF-α诱导的人类脐静脉内皮细胞（HUVEC）损伤模型中评估了其治疗效果。通过整合网络药理学、分子对接和转录组分析的多方面方法，确定了HXXZ的潜在靶点。通过功能获得和丧失实验，使用ELISA、Western blotting和免疫荧光染色技术评估了与炎症、凝血和内皮损伤相关的标志物水平。
结果
HPLC-Q-TOF-MS分析确定了HXXZ中的38种主要成分。体内实验表明，中等到高剂量的HXXZ显著减少了血栓长度和质量，并调节了血浆和血栓组织中的IL-1β、IL-6、NO、vWF、P-Selectin、FXI、FVIII、TM、PC、eNOS和ICAM-1的水平。体外实验显示，HXXZ减轻了TNF-α诱导的细胞凋亡和内皮功能障碍，并降低了HUVECs中的总胆固醇、胆固醇酯和游离胆固醇水平。网络药理学分析发现了181种活性化合物和53个与DVT相关的靶点，主要集中在PI3K-AKT和MAPK通路。分子对接证实HXXZ成分与AKT1、ERK2、KLF11和KLF15之间存在有利的结合潜力。转录组分析表明CD14、SOAT2和MCL1是受HXXZ调控的关键基因。功能研究表明，SOAT2敲低增强了HXXZ对HUVECs的保护作用，而SOAT2过表达则产生了相反的效果。
结论
HXXZ通过多组分作用机制预防DVT血栓形成，其中核心机制是下调SOAT2并抑制AKT–ERK通路，揭示了一个以前未被认识的DVT治疗靶点。
引言
深静脉血栓形成（DVT）是一种由深静脉内异常血液凝固引起的血栓性疾病，最常见于下肢（Rayes和Brill，2024）。DVT的病理生理基础涉及血管内皮功能障碍、凝血系统激活和炎症反应之间的复杂相互作用。一线抗凝剂和溶栓剂（肝素、华法林、利伐沙班、rt-PA）能有效预防和治疗血栓；然而，它们具有较高的出血风险、个体间差异大、治疗窗口窄以及成本高昂（Cox和Roberts，2025；Watson等人，2024）。因此，迫切需要新的多靶点治疗策略，特别是来自天然药物的战略。基于“促进血液循环以消除血瘀”原则的传统中医（TCM）是一种潜在的治疗资源。
活血消肿汤（HXXZ）是一种含有14种草本成分的中药制剂，在预防和治疗DVT的临床试验中显示出显著疗效和良好的安全性（Tian等人，2022；Zheng等人，2017）。该方剂改编自富源活血汤（Bai等人，2026），并记录在《医学发明》（Song等人，2022）中。根据DVT的中医发病机制，即“血瘀”、“内热毒阻滞”和“经络阻塞”三要素，该方剂按照精制富源活血汤的原则和“君臣佐使”层次结构进行配伍，以实现全面的疾病改善（Wei等人，2018）。值得注意的是，其主要成分当归（Oliv.）、蛇床子 Makino、白芍 Pall.和丹参 Bunge在基础研究中已被证明可以改善DVT（Cao等人，2015；Li和Wang，2010；Liu等人，2019；Xu等人，2025）。尽管具有这些有希望的临床效果，但HXXZ预防血栓形成的具体药理机制仍不清楚。这一关键知识空白严重限制了其在国际上的认可度和在现代循证实践中的应用。
在这项研究中，我们旨在系统地阐明HXXZ预防DVT血栓形成的分子机制。采用化学分析、网络药理学、转录组学和功能验证的多方面策略，使用DVT小鼠模型和TNF-α诱导的HUVEC损伤模型进行研究。这项工作有望为HXXZ的临床应用提供坚实的实验证据，并为中药复方的现代化建立多维度、多层次的研究框架。
章节摘录
HXXZ的制备与组成
HXXZ是一种含有14种中药的汤剂，从云南中医药医院制剂中心购买（表1）。所有草药材料均经过云南中医药医院药学部鉴定，并通过TCMSP（Ru等人，2014）、TM-MC 2.0（Kim等人，2024）、Herb 2.0（Gao等人，2025）、ETCM 2.0（Zhang等人，2023）和HIT 2.0（Yan等人，2022）数据库进行了交叉验证。
HXXZ的HPLC-Q-TOF-MS分析
使用HPLC-Q-TOF-MS技术对HXXZ的化学成分进行了分析。HXXZ的正负离子质谱图如图1所示。根据NIST 17数据库的谱图分析，在正离子模式下共筛选出235种化合物，在负离子模式下鉴定出311种化合物。经过多个中医数据库的交叉比对，最终确定了38种化合物（正离子模式下24种，负离子模式下14种）（表3）。
HXXZ在DVT动物模型中减轻炎症并预防血栓形成
本研究
讨论
尽管抗凝剂和溶栓剂在临床上具有显著疗效，但它们的固有限制。HXXZ在DVT中表现出良好的安全性和治疗效果；然而，其作用机制 bisher 仅在通路水平上得到描述，限制了对其更广泛机制的理解和临床认可。在本研究中，我们确定了SOAT2作为HXXZ对血管内皮保护作用的新功能靶点。
结论
总之，我们认为HXXZ通过涉及多个组分、多个靶点和多个通路的整体调节机制发挥抗DVT作用，包括SOAT2、CD14、MCL1、IL1B、MMP9、IL6、KLF11等，其中SOAT2是一个以前未被认识的中介因子。其核心机制涉及通过SOAT2–AKT–ERK通路调节内皮功能障碍和炎症反应。然而，SOAT2并非唯一的中介因子；还有其他
CRediT作者贡献声明
杨丽娟：撰写 – 审稿与编辑、可视化、验证、方法学、研究、数据分析、概念化。李志正：撰写 – 初稿、可视化、验证、项目管理、方法学、研究、资金获取、数据分析、概念化。刘洋：撰写 – 审稿与编辑、验证、方法学、研究、数据分析、概念化。王荣毅：撰写 – 审稿与编辑、可视化
数据可用性
数据可应要求提供。本手稿/数据或其部分尚未提交给其他期刊发表，或者该工作之前已在其他地方发表。
资助
本研究得到了国家自然科学基金（82160101）、云南高层次人才健康培训项目（H-2024084）、云南省科技厅和昆明医科大学的优先联盟基金（202201AY070001-059）、云南振兴人才支持计划、云南中医药大学联合基金项目（XYLH202211）以及云南省基础研究项目（202401AT070180）的支持
利益冲突声明
? 作者声明他们没有已知的可能会影响本文报告工作的财务利益或个人关系。
