《Next Nanotechnology》:Role of methanolic extract of Trigonella foenum-graecum seeds as a stabilizer in enhancement of metal and polymeric nanoparticles synthesis
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稳定剂可影响纳米颗粒的粒径、形貌、稳定性及表面电荷等理化特征,进而影响其功能。植物提取物在银纳米颗粒(silver nanoparticles, AgNPs)绿色合成中可作为还原剂和稳定剂发挥重要作用。本研究假设葫芦巴(Trigonella foenum-gr
稳定剂可影响纳米颗粒的粒径、形貌、稳定性及表面电荷等理化特征,进而影响其功能。植物提取物在银纳米颗粒(silver nanoparticles, AgNPs)绿色合成中可作为还原剂和稳定剂发挥重要作用。本研究假设葫芦巴(Trigonella foenum-graecum, TFG)种子甲醇提取物(methanolic extract, ME)对金属及聚合物纳米颗粒均具有显著稳定潜力,并以吐温80(Tween 80, T80)为标准稳定剂进行对照。研究人员以ME为稳定剂合成AgNPs,并以聚(乳酸-羟基乙酸共聚物)[poly(lactide-co-glycolic acid), PLGA]为模型合成聚合物纳米颗粒。表征内容包括粒径分析、稳定性、形貌、结晶度、纳米颗粒产率及元素组成百分比。T80-AgNPs粒径(约4 nm)明显小于ME-AgNPs(约22 nm);而在PLGA纳米颗粒中稳定剂对粒径无显著影响。纳米颗粒形貌无明显差异。ME-AgNPs与ME-PLGA NPs在10 d孵育期内均保持稳定。ME显著提升AgNPs中银元素含量(约19%),高于T80-AgNPs(约13%)。T80-AgNPs产率可忽略不计,ME-AgNPs产率约为88%;ME-PLGA NPs与T80-PLGA NPs产率分别约为91%和81%。结果表明,ME对无机及聚合物纳米颗粒的理化表征均有显著影响。
论文解读:葫芦巴(Trigonella foenum-graecum)种子甲醇提取物作为稳定剂在促进金属及聚合物纳米颗粒合成中的应用
研究背景与目的
纳米颗粒因高比表面积而易发生团聚,合成过程中需加入相容的稳定剂以防止聚集。传统化学稳定剂如非离子表面活性剂吐温80(Tween 80, T80)或聚乙烯醇(polyvinyl alcohol, PVA)虽有效,但不具治疗活性。葫芦巴(Trigonella foenum-graecum, TFG)种子富含酚类、黄酮类等植物化学成分(phytochemicals),其甲醇提取物(methanolic extract, ME)在前期的光催化绿色合成中显示出金属还原及稳定潜力。目前TFG种子在纳米技术中的应用尚不充分,且常规绿色合成存在纳米颗粒产率低的问题。因此,研究人员假设TFG种子ME可替代传统化学稳定剂,兼具良好稳定效果并可能赋予纳米颗粒额外生物活性。本研究以NaBH4还原法合成银纳米颗粒(silver nanoparticles, AgNPs)为无机纳米颗粒模型,以溶剂沉淀法(nanoprecipitation)合成聚(乳酸-羟基乙酸共聚物)[poly(D,L-lactide-co-glycolic acid), PLGA]纳米颗粒为聚合物纳米颗粒模型,以T80为对照稳定剂,系统评价ME作为纳米颗粒稳定剂的效果。该研究成果发表于《Next Nanotechnology》。
主要关键技术方法
研究人员将市售TFG种子经清洗、干燥、粉碎后用甲醇浸渍提取、过滤、旋蒸浓缩并干燥得ME。AgNPs以1 mM AgNO3为底物,150 μM NaBH4为还原剂,分别加入1% T80或梯度ME作稳定剂合成;PLGA纳米颗粒以25 mg PLGA溶于丙酮后注入含1% T80或0.1% ME的水相中,经纳米沉淀法制备。两种纳米颗粒均经离心纯化。表征方法包括:紫外—可见分光光度计测吸收光谱评估稳定性;动态光散射(dynamic light scattering, DLS)测平均粒径及多分散指数(polydispersity index, PDI);扫描电子显微镜(scanning electron microscopy, SEM)观察形貌;附能谱(energy dispersive X-ray spectroscopy, EDX)分析元素组成;X射线衍射(X-ray diffraction, XRD)分析晶型;称质量法计算纳米颗粒产率;电导率仪测定透析后残余Ag+离子。所有实验设三次重复。
研究结果
3.1. Optimization of synthesis of silver nanoparticles and PLGA nanoparticles(银及PLGA纳米颗粒合成的优化)
经NaBH4浓度及ME浓度梯度优化,确定150 μM NaBH4与适宜ME浓度用于后续实验。加NaBH4后溶液立即由无色变为红棕色,表明AgNPs即时生成。ME及T80均能成功用于AgNPs与PLGA NPs的合成与稳定。
3.2. Stability studies of both silver and PLGA nanoparticles(银及PLGA纳米颗粒的稳定性研究)
于4℃避光保存,在第1天和第10天分别检测350–700 nm吸收光谱。T80-AgNPs、ME-AgNPs、T80-PLGA NPs及ME-PLGA NPs的吸收峰位和强度在10 d内均无显著偏移,表明四种纳米颗粒均具良好胶体稳定性,ME稳定效果与T80相当。
3.3. Particles size analysis of nanoparticles(纳米颗粒粒径分析)
DLS结果显示:T80-AgNPs第1天平均粒径约4.46±1.14 nm(PDI 0.634),第10天约4.57 nm;ME-AgNPs第1天约22.04±6.88 nm(PDI 0.389),第10天约27.18 nm;T80-PLGA NPs约62.62 nm(PDI 0.144),ME-PLGA NPs约65.96 nm(PDI 0.161),10 d内粒径基本不变。说明稳定剂种类显著影响AgNPs粒径(T80得极小核,ME得较大多分散颗粒),但对PLGA NPs粒径影响甚微;ME-AgNPs PDI<0.5,分散均匀性优于T80-AgNPs。
3.4. Study of the morphology and elemental analysis of the nanoparticles(纳米颗粒形貌及元素分析)
SEM显示四组纳米颗粒均为近球形,T80-AgNPs视感明显小于其余三组。EDX显示ME-AgNPs中Ag元素原子百分比约19%±5.45(T80-AgNPs约13.33%±8.15),C、N、O组成相近。表明ME中植物化学成分具金属螯合作用,可提高AgNPs中金属银负载量。
3.5. X-ray diffraction analysis of the nanoparticles(纳米颗粒X射线衍射分析)
ME-AgNPs在2θ为27.74°、32.16°、38.14°等处出现尖锐衍射峰,对应面心立方(face-centered cubic, FCC)结构的(111)(200)(211)(220)(311)(222)(321)(400)(420)(422)晶面(JCPDS 04–0783),估算平均晶粒尺寸约9 nm,结晶度约79%,证实其为纳米晶态;少量峰提示可能存在Ag2O或AgCl。PLGA NPs(T80及ME稳定)仅在10°–30°出现单一宽峰,符合无定形(amorphous)聚合物特征。
3.6. The percent nanoparticles yield of silver and PLGA nanoparticles(银及PLGA纳米颗粒产率)
ME-AgNPs产率约88%±0.21;T80-AgNPs因粒径极小、难以收集浓缩故产率近似零/无法定量;ME-PLGA NPs产率约91.84%±1.13,T80-PLGA NPs约81.20%±3.55。透析后残余Ag+离子电导率两组无显著差异。表明ME配合强还原剂NaBH4可获高产率AgNPs,且ME作PLGA稳定剂时产率优于T80。
讨论与结论总结
讨论部分指出,ME中含肉豆蔻酸(myristic acid)、棕榈酸、蔗糖、没食子酸等多类具纳米颗粒稳定能力的植物化学成分,可通过吸附包覆防止团聚。ME作稳定剂所得AgNPs粒径适中、分散好、银含量高、产率高且10 d稳定;PLGA NPs粒径与T80相当、产率更高,且ME表面含多官能团可供点击化学(click chemistry)表面修饰以实现主动靶向,优于仅提供负电基团的T80。天然提取物成分受产地气候影响系植物化学共同局限,未来需明确具体有效成分并拓展至其他纳米体系。
结论(Conclusion)翻译如下:
植物提取物因其还原与稳定潜力常用于金属纳米颗粒绿色合成,其所含多样植物化学成分与次生代谢物赋予双重功能;虽还原力不及抗坏血酸或NaBH4等标准还原剂,但其稳定能力与常规化学稳定剂/表面活性剂相当。本研究成功证明TFG种子甲醇提取物具表面活性剂潜能——以ME为稳定剂合成了AgNPs与PLGA NPs。粒径分析显示稳定剂可显著影响AgNPs平均直径而对PLGA NPs影响较小。银及PLGA NPs在10 d内的稳定性研究证明了ME的显著稳定作用。稳定剂亦影响AgNPs元素组成:ME-AgNPs银元素百分含量高于T80-AgNPs,归因于提取物的金属螯合潜能,更高的银含量意味着更显著的应用潜力。此外,ME作为PLGA NPs稳定剂可提供额外带电官能团用于表面功能化,可借以实现药物递送的主动靶向;加之TFG提取物本身具治疗潜力,可进一步提升PLGA NPs的治疗效果。