α,β-不饱和甾体螺内酯的合成、核磁共振（NMR）表征及X射线结构分析；同时对其细胞毒性和抗炎活性进行了评估

《Steroids》：Synthesis NMR characterization and X-ray structure of α,β-unsaturated steroid spiroketal lactones. evaluation of cytotoxicity and anti-inflammatory activity

　　

Juan E. Hernández-Martínez | Nimsi Campos-Xolalpa | Salud Pérez-Gutiérez | Marcos Flores-álamo | Martín A. Iglesias-Arteaga

墨西哥国立自治大学化学系，墨西哥城大学城，墨西哥

摘要

在BF₃·Et₂O存在下，不同甾体皂苷元与丙酮酸发生醛醇缩合反应，生成了含有α,β-不饱和螺内酯侧链的甾体化合物。这些化合物能够显著降低LPS刺激的巨噬细胞中一氧化氮的生成，表明其具有潜在的抗炎活性。其中一种化合物对HeLa宫颈癌细胞表现出强烈的细胞毒性。

引言

螺甾烷类皂苷元（SSS）是一种易于获得的起始材料，可从多种陆地和海洋植物中分离得到。这些化合物的特殊反应性使得人们能够开发出合成避孕药以及天然存在的或经过修饰的肾上腺皮质激素和性激素的合成方法[1]、[2]、[3]。

此外，SSS还被用作合成具有强抗癌活性的螺内酯类化合物的起始材料，例如hippuristanol [4]、cephalostatines和ritterazines [5]（图1）。

对SSS侧链反应性的持续研究产生了具有有趣生物特性的新化合物家族。

作为我们关于SSS及其修饰侧链生物活性研究的延续，本文描述了五种含有不同结构修饰的α,β-不饱和螺内酯的合成过程及其细胞毒性和抗炎活性。

章节摘录

实验部分

实验条件：所有反应均通过TLC在Alugram SIL G/UV254板上进行检测，该板预先浸泡在含有香草醛（1克）的乙醇（150毫升）和H₂SO₄（1毫升）溶液中，并加热至显色。NMR谱在CDCl₃溶液中使用JEOL JNM-ECZ600R 600 MHz光谱仪记录，以7.26 ppm和77.00 ppm处的溶剂信号作为¹H和¹³C的参考。2D NMR谱采用标准脉冲序列和参数进行记录。

合成

将乙酰化的甾体皂苷元9a-e的CH₂Cl₂溶液与丙酮酸（PA）和BF₃·Et₂O反应，生成相应的α,β-不饱和螺内酯10a-e。反应机制包括六元F环的开环形成外环烯醇醚，随后与丙酮酸发生醛醇缩合，再经过F环闭合，这一过程遵循我们之前描述的反应路径以及其他相关文献[6]、[7]、[8]、[9]、[10]、[11]、[12]。

结论

我们建立了合成含有α,β-不饱和螺内酯侧链的甾体的简便方法。所有研究化合物在LPS刺激的巨噬细胞中的一氧化氮抑制试验中均表现出显著的抑制效果，这被认为是抗炎活性的良好指标。其中，化合物11b的抑制效果最为显著，其抑制效果超过了用于治疗炎症的常用药物地塞米松。

CRediT作者贡献声明

Juan E. Hernández-Martínez：实验研究。Nimsi Campos-Xolalpa：初稿撰写及实验研究。Salud Pérez-Gutiérez：初稿撰写、实验研究及方法指导。Marcos Flores-álamo：初稿撰写、实验研究、数据整理。Martín A. Iglesias-Arteaga：审稿与编辑、方法指导、实验研究、资金申请、数据分析及概念构思。

利益冲突声明

作者声明不存在可能影响本文研究的已知财务利益或个人关系。

致谢

作者感谢学术人员事务总局（项目编号IN202026）和墨西哥国立自治大学化学系（PAIP-5000-9063）提供的财政支持。作者同时感谢Nayeli Balbiaux（USAII-FQ）协助进行NMR数据采集。JEHM感谢SECIHTI提供的奖学金（编号CVU 1082149）。