GPATCH11的直系同源物Sap34通过与裂殖酵母（Schizosaccharomyces pombe）中的早期剪接体复合物相互作用来调控前体mRNA的剪接过程

《Scientific Reports》：GPATCH11 ortholog Sap34 regulates pre-mRNA splicing by interacting with early spliceosomal complexes in Schizosaccharomyces pombe

　　

摘要

前体mRNA剪接是基因表达调控中的关键步骤，这一过程由剪接体介导。剪接体是一种大型核糖核蛋白复合物，在每次剪接循环中都会经历结构和成分的动态变化。尽管剪接机制及主要剪接体组分的角色已经明确，但那些短暂结合在剪接体上的蛋白质的身份和功能仍不完全清楚。在本研究中，我们探讨了在Schizosaccharomyces pombe中一种结构尚未被充分研究的含有G-patch结构域的蛋白质SPAC6F6.19（以下简称Sap34，即34 kDa的剪接体相关蛋白）的分子功能。通过亲和纯化和酵母双杂交实验，我们分析了其相互作用网络并确定了其相互作用伙伴。此外，我们还利用长读长测序技术评估了Sap34对剪接效率的影响。研究发现，Sap34能与U2小核核糖核蛋白（snRNP）以及U4/U6 × U5三聚体snRNP的组分形成复合物，这些组分对于剪接体的早期组装和激活至关重要。进一步的研究还明确了Sap34与剪接蛋白之间的特异性相互作用：其C端区域对于与Sap61和Ini1的结合至关重要，而G-patch结构域则参与了其与ATP依赖性RNA解旋酶Prp43的相互作用，这表明Sap34的G-patch结构域可能参与调控早期剪接体中Prp43的活性。值得注意的是，删除基因会导致整体剪接效率下降，主要表现为内含子保留率的增加。综上所述，这些发现表明Sap34是一种此前未被认识到的、在裂殖酵母中调控前体mRNA剪接早期阶段的重要蛋白质。