《Veterinary Research Communications》：Seroprevalence of Leptospira in Lavradeiro horses, a semi-feral ecotype from the Northern Brazilian Amazon
编辑推荐：
钩端螺旋体病是一种被忽视的人畜共患病，对公共卫生和兽医健康具有重要影响，马匹可作为感染的潜在维持宿主。本研究旨在调查巴西北部罗赖马州（Roraima）土著社区半野生条件下Lavradeiro马中抗钩端螺旋体（Leptospira spp.）抗体的血清流行率。研
钩端螺旋体病是一种被忽视的人畜共患病，对公共卫生和兽医健康具有重要影响，马匹可作为感染的潜在维持宿主。本研究旨在调查巴西北部罗赖马州（Roraima）土著社区半野生条件下Lavradeiro马中抗钩端螺旋体（Leptospira spp.）抗体的血清流行率。研究人员共采集387份血清样本，采用显微凝集试验（Microscopic Agglutination Test, MAT），使用18个菌群的钩端螺旋体抗原进行检测。总流行率为15.8%（95% CI：12.3–19.8%），最常见菌群为Australis、Tarassovi、Autumnalis和Pomona。成年动物血清阳性率（17.6%）高于驹马（9.8%），但差异无统计学意义。性别间无显著差异，雌性阳性率16.8%，雄性14.7%。生活在可能洪水泛滥区域的马匹血清流行率更高（23.6%）。23匹马检出效价≥800，多数来自帕卡拉伊马（Pacaraima）市，其中Australis菌群最常见。本研究首次报道Lavradeiro马暴露于钩端螺旋体的证据，洪水易发区流行率更高且对非常见血清型有反应。结果强调了半野生马群中病原循环的存在，以及巴西北部亚马逊地区对Lavradeiro马进行一体化监测与保护的必要性。
论文解读：巴西巴西亚马逊北部半野生Lavradeiro马中钩端螺旋体血清流行率研究
一、研究背景与意义
钩端螺旋体病（Leptospirosis）是由钩端螺旋体属（Leptospira）螺旋体引起的一种全球性人畜共患病，对公共卫生与兽医健康影响显著。病原体可通过皮肤破损或黏膜接触受污染的水或土壤传播，慢性感染宿主可经尿液长期排菌，在潮湿环境中持续存在。在马科动物中，感染常呈亚临床状态，但也可引发发热、贫血、黄疸、肾衰竭及马复发性葡萄膜炎（Equine Recurrent Uveitis, ERU），妊娠期感染可导致晚期流产。拉丁美洲地区马匹钩端螺旋体血清流行率差异较大，受气候、环境与管理模式影响显著。
巴西北部罗赖马州（Roraima）的Lavradeiro马是一种自然适应热带稀树草原（lavrado）的半野生生态型马种，长期在土著社区中以低干预、半野生方式放养，频繁接触天然水源与季节性洪水区。考虑到其生态与社会经济重要性、与土著人群的密切接触及公共卫生意义，该种群中钩端螺旋体病的流行动态研究仍十分有限。因此，研究人员开展了此项研究，以明确Lavradeiro马中抗钩端螺旋体抗体的血清流行率，为区域监测、防控及独特生态型保护提供流行病学依据。本论文发表于《Veterinary Research Communications》。
二、主要关键技术方法概述
研究人员在罗赖马州多个土著社区的半野生Lavradeiro马群中，按95%置信度与5%显著性水平随机抽样，样本量按各市及社区马群规模比例分配，最终纳入387匹马（雌178、雄197，幼驹92、成年278、老年4）。通过颈静脉采血分离血清，－20 ℃保存。采用世界动物卫生组织（WOAH）推荐的显微凝集试验（MAT），使用涵盖18个菌群的23株活钩端螺旋体抗原（含Leptospira interrogans、L. borgpetersenii、L. noguchii、L. kirschneri、L. santarosai等）以1:100初筛，阳性样本倍比稀释至1:3200，以≥50%凝集判为阳性，最高稀释度为效价。按年龄、性别及是否位于洪水易发区分层，计算血清流行率及95%置信区间，并用R软件进行统计检验（p值）。研究队列来源于罗赖马州帕卡拉伊马（Pacaraima）、博阿维斯塔（Boa Vista）、穆卡雅伊（Mucajaí）、阿马雅里（Amajari）、邦芬（Bonfim）、坎塔（Cantá）、上阿莱格里（Alto Alegre）和诺曼迪亚（Normandia）等市的土著社区。
三、研究结果
Results（结果）
在387份Lavradeiro马血清中，总体钩端螺旋体血清阳性率为15.8%（61/387；95% CI：12.3–19.8%）。阳性动物中最常见菌群为Australis（21%）、Tarassovi（9%）、Autumnalis（8%）、Pomona（8%）及Djasiman（Sentot，7%）。以最高效价及单一反应推断的最可能感染血清型依次为Australis（16/56）、Autumnalis（7/56）及Pomona（5/56）。
按年龄分层，成年马血清阳性率17.6%（49/278；95% CI：13.3–22.6），幼驹9.8%（9/92；95% CI：4.6–17.8），老年马因数量少（n=4）未统计分析，年龄组间差异无统计学意义（p=0.073）。按性别分层，雌性16.8%（30/178；95% CI：11.7–23.2），雄性14.7%（29/197；95% CI：10.1–20.4），差异无统计学意义（p=0.566）。
23匹马抗体效价≥800（最高1:3200），多来自帕卡拉伊马（12/23）、阿马雅里（8/23）、博阿维斯塔（2/23）及邦芬（1/23）；高效价动物中以Australis菌群（10/23）最常见，其次为Pomona（4/23）。15例显示多血清型交叉反应。
按洪水易发区地理分类，洪水易发区马匹血清流行率23.6%（21/89；95% CI：5.2–33.8），非洪水区13.6%（40/295；95% CI：9.9–18.0），差异有统计学意义（p=0.023），提示环境条件可影响病原暴露风险。
四、讨论与结论总结
Discussion（讨论）
巴西马中传统相关菌群为Icterohaemorrhagiae、Australis和Pomona。本研究以Australis最常见（21%阳性动物），高效价动物中也以Australis为主（10/23），符合该菌群适应马属动物的流行病学特征。值得注意的是，同菌群的Bratislava血清型仅1%阳性，可能反映当地血清型循环差异或感染压力低。
Autumnalis与Djasiman（Sentot）的较高检出提示野生宿主参与传播的可能。Sentot血清型此前在巴西亚马逊及中西部马群中已有报道，Autumnalis亦常见于北巴西及智利军马中。Pomona的检出（4/23高效价）具流行病学意义，因其与马繁殖障碍相关，且野生猪科动物可为储主。
Icterohaemorrhagiae检出频率虽低，但因与人病例高度相关仍值得关注。Cynopteri血清型在马中不常见，本研究检出可能关联多物种共存环境（野生食肉目、灵长类、蝙蝠等），提示家畜与野生动物生境重叠时的暴露风险。Tarassovi（9%）在牛、鹿、羊及新西兰马中有记录，也在巴西亚马逊牛群中存在；多血清型反应可能源于连续暴露而非同时感染。
MAT本身存在局限：不能区分具体血清型而只能定菌群；急性感染以IgM为主时可产生异源高效价（悖论反应）；横断面研究缺配对血清，难分急性与康复期；慢性感染动物抗体可低于cut-off致假阴性，故MAT更适合群体水平评估。
洪水与淡水在致病钩端螺旋体传播中作用明确，实验显示其在模拟热带气候水中可保持毒力与活力≥20个月。本研究高效价动物多分布于帕卡拉伊马、阿马雅里等洪水易发区，支持环境暴露风险。半野生Lavradeiro马因频繁接触天然水源、洪泛区及野生动物，更易经污染水、饲料或感染动物尿液/生殖道分泌物染菌，可作为生态系统钩端螺旋体循环的环境哨兵。
Conclusion（结论部分翻译）
综上，本研究提供了Lavradeiro马暴露于钩端螺旋体的首份血清学证据，洪水易发区血清流行率更高，提示罗赖马稀树草原的环境可能影响传播。对较少报道血清型的反应性表明热带环境钩端螺旋体病生态复杂性，需进一步开展区域特异性调查。这些发现有助于理解半野生马群病原暴露情况，可支持巴西北部亚马逊土著领地未来监测工作，以及Lavradeiro生态型的保护策略。
