《Stem Cells International》：Enamel Matrix Derivative in Dental Pulp Regeneration: Biological Basis, Mechanistic Insights, and Translational Considerations
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釉基质衍生物（EMD）因其在调控牙髓愈合相关多种生物学过程中的潜在作用，在再生性牙髓病学领域受到日益广泛的关注。EMD来源于釉基质蛋白（EMPs），已被证实可参与调控干细胞/祖细胞迁移、成牙分化、血管生成活性及炎症反应。本综述系统总结了当前关于EMD在牙髓再生
釉基质衍生物（EMD）因其在调控牙髓愈合相关多种生物学过程中的潜在作用，在再生性牙髓病学领域受到日益广泛的关注。EMD来源于釉基质蛋白（EMPs），已被证实可参与调控干细胞/祖细胞迁移、成牙分化、血管生成活性及炎症反应。本综述系统总结了当前关于EMD在牙髓再生中作用的研究证据，重点阐述其生物学特性、潜在作用机制以及与生物材料体系的联合应用策略。现有研究表明，EMD可能通过调控细胞行为及细胞外基质相关进程，促进形成有利于再生的微环境；同时，基于生物材料的递送策略已被探索用于提高其稳定性及局部生物活性。然而，现有证据多来源于体外实验或非牙髓再生模型，支持功能性牙髓再生的直接证据仍然有限。此外，EMD、Emdogain、重组成釉蛋白（Am）及成釉蛋白衍生肽虽密切相关，但不应被视为可互换的干预措施。综上，EMD是再生性牙髓病学中具有生物学相关性但尚未完全验证的策略，仍需进一步研究以明确其在临床相关条件下的作用机制，并区分真正的牙髓再生与部分修复性结局。
引言
牙髓对于维持牙齿的生理功能及感觉感知至关重要。传统上，由感染或创伤导致的不可逆性牙髓炎或牙髓坏死多采用根管治疗（RCT）。尽管RCT可有效控制感染并缓解疼痛，但需去除牙髓组织，导致牙齿丧失活力、脆性增加且再感染风险升高。因此，恢复牙髓组织的血管化、神经支配及免疫功能已成为再生性牙髓研究的核心目标。基于组织工程学原理的再生性牙髓治疗（RET）旨在重建牙髓-牙本质复合体并支持牙根持续发育，为传统RCT提供了生物学替代方案。在多种生物活性分子中，釉基质衍生物（EMD）备受关注。EMD提取自妊娠约6个月的猪牙胚釉基质蛋白（EMPs），由Hertwig上皮根鞘分泌，是牙根发育过程中重要的上皮信号分子，并被证实在牙源性微环境中参与成牙分化调控。EMD可促进邻近间充质细胞向成牙本质细胞和成牙骨质细胞分化，这对牙根形成及牙周组织再生至关重要。自20世纪90年代末商业产品Emdogain（EMD与海藻酸丙二醇酯的复合物）问世以来，大量研究证实其在促进牙周再生方面的疗效。EMD通过调控多种生长因子表达及炎症介质水平，靶向参与牙周修复的细胞，从而促进牙骨质、牙周膜及牙槽骨的再生。EMD具有多重生物学功能，包括促进血管生成、抗炎、抗菌及加速组织愈合。鉴于牙周组织与牙髓组织在胚胎起源及再生调控上的相似性——均依赖上皮-间充质相互作用及生长因子信号传导，研究者认为EMD的生物活性可能不仅限于牙周组织，但其在牙髓特异性环境中的效应程度仍有待阐明。EMD还可能通过类似的信号通路调控干细胞行为，并促进牙髓微环境中的血管与神经再生。越来越多的实验及动物研究支持EMD在成牙本质细胞诱导、血管生成、免疫调节及与生物材料整合方面的积极作用。然而，现有证据的异质性较高，且多来自临床前或非牙髓模型。因此，EMD更应被解读为具有生物学相关性的候选分子，而非已确立的牙髓再生调控因子。本综述旨在批判性评估EMD在牙髓再生中的作用，重点关注其生物学特性、分子机制、与生物材料的联合策略及其临床转化潜力。当前争议包括EMD主要通过直接细胞信号传导还是基质重塑发挥作用，以及其效应是牙髓特异性的还是与牙周组织共享的普遍再生特性。
方法
本文为叙述性综述，采用结构化文献调研而非正式的系统评价方法。通过PubMed、Web of Science及Scopus等常用科学数据库检索与EMD及牙髓再生相关的文献。检索词灵活组合包括“釉基质衍生物”“Emdogain”“成釉蛋白”“成釉蛋白衍生肽”“重组成釉蛋白”“牙髓再生”“再生性牙髓病学”“成牙分化”“血管生成”“神经发生”“免疫调节”及“生物材料”。优先纳入英文发表且与EMD相关干预措施在牙髓再生中的生物学或转化作用相关的研究，文献类型涵盖体外研究、动物研究、临床前研究、叙述性综述及有限的临床相关报告。在文献筛选与综合过程中，依据其与牙髓再生的相关性进行解读，将证据分为两类：直接证据指涉及牙髓细胞、牙髓组织、根管再生或其他与牙髓再生直接相关的模型研究；间接支持证据指来自相关组织或再生场景（如牙周再生、骨修复、釉质再矿化及伤口愈合）的研究，可提供机制或生物材料相关见解，但未直接证明牙髓再生。仅聚焦于无关再生场景且无明确牙髓再生相关性的研究未在本综述主要讨论中强调。鉴于现有文献的异质性，本综述的目标并非定量合成，而是对当前证据及其潜在转化意义进行批判性与解释性概述。
釉基质衍生物的生物学特性
需注意，EMD、Emdogain、重组成釉蛋白（Am）及成釉蛋白衍生肽属于相关但不等同的干预措施，其生物学效应不可直接互换。EMD成分复杂，主要由成釉蛋白（Am）构成，同时含有少量非成釉蛋白（如釉蛋白、成釉细胞素及蛋白酶），以及报道与TGF-β1和BMP-2相关的生长因子样生物活性。Am是由成釉细胞分泌的疏水性细胞外基质蛋白，占EMD总质量的约90%。Am可刺激靶细胞分泌多效性生长因子与细胞因子，部分反映了牙发育过程中观察到的上皮-间充质相互作用，同时也提供调控基因表达的信号。Am参与调控细胞信号通路并促进组织再生，还参与釉质与牙本质基质的沉积及矿化。除Am外，釉蛋白与成釉细胞素等非成釉蛋白虽占EMD质量不足10%，但被认为参与细胞信号传导与矿化过程。综上，EMD可能作为一种具有生物活性的蛋白系统发挥功能，既调控细胞信号传导，又作为细胞外基质相关组分，为牙髓组织再生提供潜在的生物学基础，但EMD内各成分的单独贡献仍有待完全阐明。
釉基质衍生物促进牙髓再生的分子机制
EMD是一种包含多种蛋白成分的复杂生物活性系统，表现出类似生长因子的生物学活性。不同EMD组分具有特定的生物学功能：高分子量组分（>20 kDa）可诱导血管内皮生长因子（VEGF）及白细胞介素-6（IL-6）的分泌，从而促进血管生成反应；低分子量组分则与白细胞介素-8（IL-8）及单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的产生相关，参与白细胞招募与组织修复。此外，EMD还与TGF-β及BMP相关信号通路相关，这些通路参与调控关键细胞进程，包括BMP、VEGF及成纤维细胞生长因子（FGF）在内的生长因子被认为可调控细胞迁移、增殖、血管生成及成牙分化等关键过程。具体而言，TGF-β1与FGF参与细胞周期调控，VEGF与血管生成反应相关，BMPs与FGFs则参与牙本质形成相关信号传导。
4.1 EMD促进牙源性干细胞的迁移与增殖
干细胞的迁移与增殖是牙髓再生的关键。EMD被认为可通过调控多种信号分子的表达，为干细胞再生创造有利的微环境。值得注意的是，TGF-β1作为EMD的关键成分，在此背景下被认为是重要的调控因子。TGF-β1通过激活ERK1/2及AKT信号通路调控细胞周期与基因转录，可促进牙髓干细胞（DPSCs）及根尖乳头干细胞（SCAP）的增殖与迁移。研究显示，TGF-β1可增强SCAP的增殖并显著提高碱性磷酸酶（ALP）活性，同时上调I型胶原（COL1）、骨钙素（OCN）及牙本质涎磷蛋白（DSPP）的表达。此外，TGF-β1对DPSCs的作用呈剂量依赖性：低剂量（≤1 ng/mL）促进细胞活力及早期分化，而较高剂量（≥5 ng/mL）则通过诱导细胞周期阻滞抑制增殖。FGF作为重要的旁分泌信号分子，参与调控细胞增殖及干性维持。EMD可增强FGF表达并激活MAPK通路，从而提高DPSCs的增殖与代谢活性。研究证实，CEM水泥与EMD联用可显著改善SCAP的增殖与分化，尤其通过增加DSPP、牙本质基质蛋白1（DMP1）、骨唾液蛋白（BSP）及ALP活性，上调成牙/成骨相关基因表达。然而，这些观察结果大多来自体外或临床前模型，其与功能性牙髓再生的直接相关性仍有待阐明。这些机制共同为牙髓再生提供了细胞学基础。
4.2 EMD诱导成牙本质细胞分化与矿化
牙髓再生的首要目标是引导干细胞向成牙本质细胞样细胞分化。TGF-β1作为EMD的关键活性成分，已被证实可通过调控细胞周期与基因表达促进DPSCs的成牙本质细胞分化，且该过程通过TGF-β1与FGF-2的协同作用进一步增强，提示EMD中的多种生长因子可能通过整合信号网络协调细胞分化。EMD可增强DPSCs的活性，提高培养早期的ALP水平，并促进其向成牙本质细胞样细胞分化。EMD可激活包括MAPK、ERK及TGF-β/Smad通路在内的多条信号通路，导致ALP活性增加，上调DSPP、osterix（OSX）及runt相关转录因子2（RUNX2）的表达，并促进新生硬组织形成，从而增强成骨与成牙本质细胞分化能力。此外，EMD可通过激活Wnt/β-连环蛋白（Wnt/β-catenin）通路促进骨髓间充质干细胞（BMSCs）的成骨分化并提高其矿化潜能。实验结果表明，在成骨诱导培养基中加入EMD培养14天，可显著增强DPSCs的矿化能力，并上调ALP、DSPP、BMP1、骨桥蛋白（OPN）及OSX、RUNX2等转录因子的表达。进一步研究证实，在成骨诱导条件下，EMD可促进DPSCs矿化结节的形成，并提高OPN与DSPP的表达。然而，尚不清楚这些分子与细胞层面的变化是否能在体内条件下一致地转化为完全功能的牙本质-牙髓复合体再生。综上，EMD似乎在细胞层面发挥多重生物学效应，包括促进增殖、诱导分化及增强矿化潜能，这些效应通过多条信号通路的协同调控实现，为其应用于牙髓再生提供了坚实的生物学基础。从机制上讲，Wnt/β-catenin信号的激活可能涉及β-catenin的核转位及随后对成牙分化相关下游靶基因的调控。
4.3 EMD促进血管生成与神经再生
成功的牙髓再生不仅需要干细胞分化与硬组织形成，还需要血运重建与神经再支配。血管为牙髓提供必需的营养与氧气，而神经则恢复牙齿的感觉与防御功能，二者的同步再生对恢复牙髓生理功能至关重要。越来越多的证据表明EMD在促进血管生成与神经再生方面具有重要作用。在血管生成方面，体外研究显示EMD对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）具有强烈的趋化作用，可显著促进其增殖，上调VEGF表达，并增强血管生成能力。在分子层面，EMD结合葡萄糖调节蛋白78（GRP78），增强缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）与蛋白激酶A（PKA）的磷酸化，从而上调IL-8、MCP-1及IL-6等血管生成相关因子，促进内皮细胞迁移与新血管形成。动物研究进一步证实，EMD可促进结缔组织胶原纤维形成，加速口腔黏膜伤口愈合。这些发现表明，EMD可能在实验条件下支持血管生成过程，但其对牙髓特异性血管再生的贡献程度仍有待阐明。在神经再生方面，动物实验中检测到EMD治疗后再生牙髓组织中SRY-box转录因子2（SOX2）、外周蛋白、降钙素基因相关肽（CGRP）及胶质纤维酸性蛋白（GFAP）等神经分化标志物的表达。研究显示，应用重组釉基质蛋白（rM180）进行根管治疗后1个月观察到神经干细胞相关免疫反应，3个月后形成血管化的牙髓样组织。机制研究表明，EMD可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进牙髓血运重建与神经再生，引导干细胞向牙髓或成牙本质细胞谱系分化。然而，这些观察结果大多来自非牙髓或动物模型，其转化相关性需进一步研究。这种“血管-神经再生”概念可能在实验条件下有助于恢复牙髓的关键生物学功能，并为理解再生性牙髓治疗（RET）提供了有价值的视角。
4.4 免疫调节与抗炎效应
牙髓内的炎症微环境是再生治疗面临的重大挑战。感染或损伤引发的免疫反应会损害干细胞的再生潜能，导致组织坏死。因此，在炎症环境中维持或恢复干细胞活力是关键难题。近期研究强调了EMD的免疫调节与抗炎特性。在免疫调节方面，EMD通过多条通路抑制促炎反应。EMD可激活TGF-β信号通路，显著抑制脂多糖（LPS）诱导的RAW264.7巨噬细胞及原代巨噬细胞中IL-1β及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达。此外，EMD可减少口腔上皮细胞炎症趋化因子的分泌。其他研究证实，EMD可显著降低LPS刺激模型中TNF-α、IL-1β及IL-6等炎症因子的水平，进一步支持其在调控炎症反应中的作用。研究显示，EMD不仅降低这些炎症因子水平，还减少NOD样受体家族含pyrin结构域蛋白3（NLRP3）、半胱天冬酶募集结构域家族成员1（CAS1）及白细胞介素-18（IL-18）等细胞焦亡相关基因的表达，显著减弱LPS诱导的炎症反应。这些发现表明，EMD具有强效的抗炎作用，尤其在调控免疫反应及促进组织修复方面。在免疫细胞重塑方面，EMD可诱导巨噬细胞从促炎的M1表型向抗炎的M2表型极化，显著增加抗炎细胞因子白细胞介素-10（IL-10）的表达，促进组织修复与伤口愈合。此外，EMD上调抗炎基因如肿瘤坏死因子α诱导蛋白6（TNFAIP6）及超氧化物歧化酶2（SOD2），以及抗炎介质前列腺素E2（PGE2）的产生。通过PGE2/cAMP信号通路，EMD促进M2巨噬细胞极化，加速炎症消退与组织再生。另有研究表明，EMD通过抑制巨噬细胞表面MHC II类分子的表达，显著减少T细胞活化，从而降低免疫反应。部分研究提示，EMD在早期可能短暂增强局部炎症，作为一种潜在的“启动”机制，通过快速招募免疫细胞清除坏死组织与病原体，促进炎症及时消退与伤口愈合。这种双相调节作用凸显了EMD介导的免疫调节的复杂性，其效应很可能取决于具体的微环境与炎症阶段。总体而言，EMD似乎通过调控炎症因子产生、诱导免疫细胞表型转换及恢复炎症平衡来调节牙髓炎症微环境。这种免疫稳态的调控不仅减轻炎症性损伤，还为干细胞增殖、血管生成及神经再生创造了有利的再生微环境，是EMD促进牙髓再生的重要机制。本章所述的EMD多重生物学效应不太可能孤立发挥作用，而是作为协调调控网络的一部分相互作用。基于现有证据，可提出一个假设性相互作用模型：TGF-β/Smad信号参与成牙本质细胞分化，可能与BMP信号协同作用；FGF/MAPK通路有助于细胞增殖与代谢活性，为再生提供细胞学基础；Wnt/β-catenin通路被认为参与调控干细胞命运决定，但其确切作用可能因细胞环境而异。这些细胞过程进一步得到VEGF及相关因子介导的血管生成的支撑，提供代谢与结构支持。此外，EMD相关的再生微环境可能影响免疫反应，包括促进M2巨噬细胞极化。综上，这些观察结果为理解EMD在牙髓再生中的潜在作用提供了概念框架，但这些通路间的相对贡献与相互作用仍有待完全阐明。
EMD联合生物材料的应用前景
将EMD与不同类型的生物材料结合已成为增强牙髓再生的关键策略，旨在解决三大临床挑战：提供有效的三维支架结构、实现生物活性因子的可控释放、主动优化局部再生微环境。EMD单独使用可能无法完全满足RET对支架支撑、持续释放及微环境调控的需求。因此，EMD-生物材料复合材料成为组织工程的重要方向，旨在提高EMD的稳定性与递送效率，增强其调控细胞行为与组织再生的能力。但需注意，当前大多数研究基于实验性或非牙髓模型，其与牙髓再生的直接相关性可能存在差异。在支架材料方面，研究者尝试将EMD与无机或天然高分子材料复合，以获得兼具机械支撑与生物活性的复合体系。研究显示，磷酸钙/壳聚糖复合支架与重组人成釉蛋白（rhAM）联用可提高EMD的释放稳定性并形成缓释效应，从而促进口腔组织愈合并抑制病原微生物生长。其他研究表明，EMD与硅酸钙材料联用可显著增强矿化效应，提示EMD与矿化微环境之间存在协同作用。该复合体系可提供结构支撑，激活细胞分化与矿化相关信号通路，促进类牙本质组织形成，但这些发现主要来自非牙髓模型。在药物递送系统方面，负载多西环素（DOX）与EMD的电纺功能梯度膜（FGM）在牙槽嵴再生中显示出显著的抗菌与成骨效应。由于该模型并非牙髓组织特异性，应被解读为间接支持证据，这些结果提示EMD为基础的递送系统在牙髓再生中可能具有潜力。此外，负载EMD的核壳纳米纤维膜作为另一种创新递送策略，可通过生物活性因子的持续释放显著促进牙周膜干细胞（PDLSCs）的成骨分化，并增强矿化及成骨基因（OCN、RUNX2、ALP及OPN）的表达。与实心纳米纤维相比，核壳纳米纤维表现出更持久的释放特征并减少了突释效应，从而提高了治疗效果，为RET提供了新的药物递送策略。由于这些结果基于牙周模型，其对牙髓再生的适用性应谨慎解读。在水凝胶系统方面，EMD复合材料也展现出广阔前景。例如，合成的22氨基酸淀粉肽水凝胶（ADP-5水凝胶）可实现生物活性因子的局部持续释放，显著降低TNF-α表达并上调白细胞介素-11（IL-11）等抗炎因子水平。利用D型氨基酸构建的成釉蛋白衍生肽水凝胶（D-gel）显示出显著的生物学活性，可增强人DPSCs的成牙本质细胞分化与矿化能力，具有良好的生物相容性与稳定性。综上，水凝胶系统可能为牙髓再生提供有利微环境，但现有证据仍多为临床前阶段。另一有前景的复合系统是rhAM、透明质酸（HA）与植酸（PA）组成的水凝胶系统，该系统具有优异的机械性能、稳定性与导电性，充分利用了Am的促血管生成特性。HA与PA的协同作用显著增强了系统的生物相容性与功能特性，使其能够适应不同的伤口形态。该系统具有显著的抗炎、促血管生成及促细胞迁移能力，为糖尿病伤口修复提供了新的治疗策略，但该系统在牙髓再生中的相关性仍有待确立。此外，富含亮氨酸的釉基质蛋白肽（LRAP）在水凝胶中显示出巨大潜力。将LRAP掺入水凝胶不仅实现了药物的持续释放，还通过其微观结构促进再矿化。LRAP水凝胶在减少致龋菌感染、促进釉质修复与再生方面显示出临床潜力，进一步增强了EMD与生物材料联合应用的优势，但直接支持牙髓再生的证据仍然有限。同时，基于P26等成釉蛋白肽的水凝胶（如P26-CS系统）也被证明可促进矿化，这些水凝胶可促进钙磷晶体沉积，修复釉质与牙本质结构，为白垩斑病变（WSLs）与非龋性颈部缺损（NCCLs）的治疗提供了新思路，这些发现主要来自釉质或牙本质修复模型。此外，新型光响应rhAm递送系统整合了HA甲基丙烯酸酯（HAMA）水凝胶，通过光照实现rhAm的可控释放，增强成骨分化与组织修复，为牙髓再生提供了新的生物材料递送策略，但仍需在牙髓特异性模型中进行进一步验证。在矿化修复方面，纳米羟基磷灰石（n-HA）与EMD在琼脂糖水凝胶中联用可显著增强釉质再矿化过程中的矿物沉积，尤其是钙、磷及氟含量。因此，n-HA-EMD水凝胶在修复牙体损伤及提高釉质显微硬度方面具有巨大潜力，其联合效应优于单独使用EMD的水凝胶，为牙髓再生与牙齿修复提供了新策略，但这些发现来自釉质再矿化模型，应被解读为牙髓再生的间接证据。利用壳聚糖水凝胶递送EMP衍生肽（如P26与P32），可有效促进牙本质矿化并通过封闭小管及促进胶原矿化恢复其力学性能，为提高牙本质矿密度与弹性模量提供了新的治疗策略，但这些发现与牙髓再生的相关性仍是间接的。此外，通过添加抗污染与抗菌材料可进一步拓展EMD的应用潜力。将EMD与具有抗生物膜或免疫调节功能的材料结合，可有效维持口腔微生态平衡，减少细菌感染引起的再炎症反应，提高再生组织的长期稳定性，但对牙髓再生的长期效应仍需进一步研究。综上，EMD-生物材料复合策略在结构支撑、可控释放及微环境优化方面似乎提供了多重协同效应，可能增强EMD在牙髓再生中的转化潜力。然而，现有证据多为实验性，其在牙髓再生中的临床转化仍需进一步验证。EMD-生物材料复合系统在提供结构支撑、生物活性因子可控释放及再生微环境调控方面显示出潜在优势，但当前证据多来自体外或非牙髓模型，在牙髓再生中的直接验证仍然有限。因此，这些系统的转化潜力应谨慎解读。未来研究应进一步探索EMD与新型可注射水凝胶、3D打印支架及智能递送系统的结合，以实现精准可控的再生治疗。
临床应用与转化研究
在讨论临床转化之前，需批判性评估现有证据基础。现有研究在EMD成分、浓度、递送系统及实验模型方面存在显著异质性。此外，许多研究受限于样本量小、缺乏标准化结局指标及潜在的偏倚来源（包括盲法不充分与发表偏倚）。再者，EMD的专利性质及实验方案的变异性可能影响研究的重现性。尽管EMD在RET中的研究多处于实验与动物研究阶段，但临床前研究已展示了其临床应用潜力。大鼠模型评估显示，Emdogain凝胶可显著促进根尖周区域的组织修复，增强新牙骨质形成。将Am与富血小板血浆（PRP）联合应用于伴根尖周炎年轻恒牙，可显著促进牙周与牙髓组织再生，术后1个月与3个月的观察显示根尖孔闭合、牙骨质与牙槽骨沉积及血管化牙髓样组织形成。进一步研究证实，经EMD处理的根管在根尖区形成致密再生组织，根管与髓腔内形成新生血管网络，并伴有神经与感觉结构的再生。这些发现为EMD在牙髓修复中的潜在作用提供了初步的组织学与实验支持，但多数证据仍来自动物模型或有限的临床观察。重要的是，这些结果应谨慎解读，因为再生性牙髓研究的组织学证据表明，新生组织常为牙髓样、纤维状或矿化性质，并未完全重建天然的牙髓-牙本质复合体。真正的牙髓再生通常定义为恢复血管化、神经支配的牙髓组织，伴有成牙本质细胞样细胞排列与牙本质形成，而修复性结局通常涉及根尖闭合、矿化屏障形成或纤维组织长入，无完全功能恢复。这一区别在解读EMD相关发现时尤为重要，因为根尖闭合、矿化组织沉积或组织长入并不一定意味着恢复了天然牙髓的结构与功能。尽管动物实验结果令人鼓舞，EMD的临床转化仍面临若干挑战。首先，EMD效应的精确分子机制与信号网络尚未完全阐明，个体间生物学反应的差异可能导致疗效不一致。其次，关于EMD与传统根管治疗材料（如根管消毒剂、充填材料及载体支架）相互作用的系统研究仍然缺乏。此外，当前临床研究样本量有限，缺乏长期随访与随机对照试验数据。这些局限性凸显了实验发现与临床实施之间的差距。EMD还应置于更广泛的再生策略背景下解读。与PRP/PRF为基础的方法相比，EMD可能提供更标准化的生物制剂配方，而血小板浓缩物具有自体来源的实际优势，且在临床RET方案中更为熟悉。相比之下，细胞疗法可能在再生细胞成分方面提供更高程度的控制，但其细胞来源、扩增、递送及调控更为复杂。目前，现有证据不足以得出EMD优于PRP/PRF或细胞疗法的结论；相反，EMD更应被视为更广泛再生框架中一个潜在有用的生物成分。进一步的转化问题也应予以承认。需注意潜在的免疫学问题。由于EMD来源于猪EMPs，其异种起源可能引发对免疫原性的担忧，尤其是在根管系统内应用时。尽管EMD在牙周应用中显示出良好的安全性，但其在牙髓再生中的免疫学行为（包括潜在的抗体形成或宿主反应改变）仍未充分表征。由于商用EMD来源于猪EMPs，监管分类、批次一致性与产品标准化仍是未来临床应用的相关考虑因素。此外，成本效益尚未得到充分评估，这可能成为EMD为基础的方法能否整合到常规临床实践中的重要决定因素。尽管EMD在再生性牙髓病学中显示出有前景的生物学与临床前效应，但其临床转化仍受限于高质量证据的缺乏、研究设计的异质性以及未解决的监管与免疫学问题。需要进一步设计严谨的临床研究以确定其安全性、有效性及比较优势。
总结与未来方向
EMD已被证实具有一系列与再生性牙髓治疗相关的生物学效应，包括促进干细胞迁移与分化、支持血管生成与神经发生，以及通过免疫调节机制调控再生微环境。尽管这些效应令人鼓舞，EMD的临床转化仍面临若干挑战，包括因其动物来源导致的标准化问题、长期疗效与剂量-反应关系不明确，以及在不同病理条件下效应的差异。此外，当前大多数证据仍为临床前阶段，这些效应能在多大程度上转化为可预测的临床结局仍不确定。未来研究应聚焦于以下关键领域：深入探索分子机制，进一步阐明EMD的精确分子机制及其与细胞信号通路的相互作用；优化递送与控释系统，开发新型递送系统以提高EMD的稳定性与生物利用度，将EMD与可注射水凝胶、3D打印支架等生物材料整合，实现对生长因子释放的精确控制；开展严格的临床试验，进行多中心、随机对照临床试验，系统评估EMD的长期疗效、安全性及剂量-反应关系；促进跨学科合作，加强生物材料工程、免疫学与临床医学的合作，克服EMD临床应用中的挑战；明确再生终点与比较价值，未来研究应更清晰地区分真正的牙髓再生与修复性愈合，并直接比较EMD为基础的方法与PRP/PRF、细胞疗法及其他再生策略；解决转化可行性，未来工作还应评估监管要求、产品标准化及成本效益，这些因素将影响EMD能否超越实验前景并成为临床实用技术。随着生物材料技术与再生医学的进步，EMD可能代表一种有前景的牙髓再生策略；然而，其临床有效性与长期结局仍需进一步验证。持续的跨学科研究与技术开发有望支持EMD为基础再生方法的优化。
