《Nature Medicine》：Adjuvanted inactivated rabies virus-vectored Lassa virus vaccine in healthy adults: a phase 1 trial
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研究人员评估了一种名为LASSARAB的灭活狂犬病毒(rabies virus, RABV)载体拉沙病毒(Lassa virus, LASV；Josiah株)糖蛋白复合体(glycoprotein complex, GPC)疫苗。该项随机、对照、剂量递增(do
研究人员评估了一种名为LASSARAB的灭活狂犬病毒(rabies virus, RABV)载体拉沙病毒(Lassa virus, LASV；Josiah株)糖蛋白复合体(glycoprotein complex, GPC)疫苗。该项随机、对照、剂量递增(dose-escalation)Ⅰ期临床试验纳入54名健康成人，在第1天和第29天分别肌内注射(im)两剂含TLR-4激动剂3D-6-acyl PHAD-SE(aPHAD-SE)佐剂的LASSARAB（抗原量分别为700相对单位[rU]、1,400 rU、2,800 rU，n=15、15、14），或以已上市狂犬病疫苗作为对照组(n=10)。预设的中期分析报告了截至第61天的主要安全性评价及次要免疫原性评估，未预设假设或把握度计算。所有主要安全性终点均显示可接受的安全性特征：第1剂后，LASSARAB组局部征集性不良事件(adverse events, AEs)发生率为86.7%–100%，对照组为80%；全身征集性AE发生率为33.3%–71.4%，对照组为60.0%。第2剂后，局部征集性AE发生率为66.7%–86.7%，对照组为55.6%；全身征集性AE发生率为53.3%–71.4%，对照组为55.6%。不良事件多为轻度和自限性。非征集性AE发生率为28.6%–60.0%，对照组为20.0%。未发生严重不良事件(serious adverse event, SAE)、免疫介导疾病或感音神经性听力丧失(sensorineural hearing loss, SNHL)。安全性实验室异常发生率为13.3%–66.7%，对照组为30.0%（14例轻度、6例中度和0例重度）。接种两剂后，LASV GPC IgG ELISA血清学阳转（≥4倍升高）在LASSARAB受试者中为100.0%（44/44），对照组为0.0%（0/10）。狂犬病糖蛋白IgG ELISA血清学阳转（≥4倍升高）及快速荧光灶抑制试验(rapid fluorescent focus inhibition test, RFFIT)中和抗体血清保护率（≥0.5 IU ml?1）在所有组别（含对照组）均为100%。LASSARAB + 3D-6-acyl phosphorylated hexaacyl disaccharide (PHAD)-SE显示出良好的安全性及对拉沙病毒和狂犬病病毒的免疫原性。按方案的最终研究报告将包含截至第394天的安全性和免疫持久性数据。ClinicalTrials.gov注册号NCT06546709。
《Nature Medicine》发表的此项研究报道了首个人体中应用灭活狂犬病毒载体表达拉沙病毒(Lassa virus, LASV)糖蛋白复合体(glycoprotein complex, GPC)之双价疫苗LASSARAB联合TLR-4激动剂佐剂3D-6-acyl PHAD-SE(aPHAD-SE)的Ⅰ期随机、对照、剂量递增临床试验中期分析结果。拉沙热是西非地区重要的地方性人畜共患病毒性疾病，年估计感染达30万例，约5000人死亡，且约25%幸存者出现永久性感音神经性耳聋，孕妇感染病死率及胎儿丢失率高，但迄今尚无 licensed疫苗。LASV的保护性免疫机制尚未明确，幸存者主要产生结合非中和表位的抗GPC IgG及多功能性CD8+T细胞应答，而恢复期血清被动免疫无效，也无明确保护性免疫相关性指标(correlate of protection)。此前临床前研究显示该灭活狂犬病毒(RABV)载体疫苗在非人灵长类(NHP)中可诱导强效抗LASV及抗RABV抗体并实现完全保护，因此有必要在人体内验证其安全性与免疫原性。本研究旨在填补这一空白，为双重靶点的联合疫苗在流行区的应用提供循证依据。
主要关键技术方法：
研究于美国马里兰大学疫苗开发与全球健康中心开展单中心、随机、盲法、对照、剂量递增Ⅰ期试验。纳入54名18–50岁健康成人（筛选前RABV中和抗体＜0.5 IU ml?1），按队列序贯随机分入低剂量组（700 rU抗原＋5 μg aPHAD-SE，n=15）、中剂量组（1,400 rU＋5 μg，n=15）、高剂量组（2×1,400 rU＝2,800 rU＋10 μg，n=14）及已上市人二倍体细胞狂犬病疫苗(human diploid cell vaccine, HDCV；Imovax Rabies)对照组（n=10），第1天与第29天分两次肌内注射。安全性终点包括征集性与非征集性不良事件(AE)、严重不良事件(SAE)、特别关注的AE（如感音神经性听力丧失SNHL，采用Brighton协作组织方案经平板测听及标准测听评估）及临床实验室异常；免疫原性终点包括LASV-GPC及RABV糖蛋白IgG ELISA几何平均滴度(GMT)与血清学阳转率（≥4倍基线升高）、RABV中和抗体RFFIT滴度与血清保护率（≥0.5 IU ml?1，WHO标准），于第1、8、29、36、61天采血检测。统计分析采用描述性分析、Kruskal–Wallis检验、Wilcoxon符号秩检验、Fisher精确检验及Spearman相关分析，均为探索性。
研究结果
Clinical trial design and participants（临床试验设计与受试者）：
54名健康成人按预设四队列序贯入组并完成两剂接种（对照组1人退出第2剂但与监测），各组基线均衡。采用哨兵受试者先行接种并由安全审查委员会(Safety Review Committee, SRC)与独立安全监察员(Independent Safety Monitor, ISM)监督剂量递增。
Primary objective: safety（主要目标：安全性）：
第1剂后局部征集性反应（注射部位触痛72.7%、疼痛68.2%）与全身反应（不适43.2%、肌痛38.6%）在LASSARAB组常见，但均为轻至中度、自限性，峰值在第1–2天，第5–8天基本消失；第2剂反应谱相似，高剂量组局部中重度温热/触痛/瘙痒/疼痛略多（P＜0.05），余组无差异。非征集性相关AE 5例（3轻2中），无非征集性SAE、新发慢性病(NOCMC)、潜在免疫介导病(PIMMC)或SNHL。实验室异常以轻中度白细胞减低(11例)、血红蛋白轻度减低(5例)、ALT轻度升高(4例)为主，无重度异常。整体安全性特征与已上市HDCV相当。
Post hoc analysis: moderate solicited reactogenicity symptoms comparison（事后分析：中重度征集性反应比较）：
第1剂各剂量组间≥2项中重度征集性症状比例无差异；第2剂高剂量组局部温热、瘙痒、触痛及疼痛的中重度反应比例显著高于其他组（P＜0.05）。
Secondary objective: LASV-GPC binding antibody responses（次要目标：LASV-GPC结合抗体应答）：
基线LASV-GPC IgG GMT≤2.1 IU ml?1，第8天无升高；第29天LASSARAB各组GMT显著升高（A组8.8、B组6.4、C组13.4 IU ml?1），对照组无变化(1.4 IU ml?1)，此时血清学阳转率A组60.0%、B组33.3%、C组64.3%、对照组0%。第2剂后GMT进一步升至A组158.8、B组135.4、C组331.0 IU ml?1，对照组仍近基线(1.5 IU ml?1)，所有LASSARAB受种者第61天LASV-GPC血清学阳转率达100%。排除1例基线异常高值者不影响结论。三剂量组间第61天GMT无统计学差异，提示两剂方案均可获充分LASV-GPC抗体应答。
Secondary objective: RABV glycoprotein binding antibody responses（次要目标：RABV糖蛋白结合抗体应答）：
基线RABV糖蛋白IgG GMT≤0.1 IU ml?1；第29天各组GMT升高（A 5.9、B 8.6、C 19.0、D 1.7 IU ml?1），第36天达峰（A 45.0、B 73.2、C 170.3、D 26.5 IU ml?1），第61天略降但仍高于基线；所有组别第29天起血清学阳转率即达100%并维持。
Secondary objective: RABV-neutralizing antibody responses（次要目标：RABV中和抗体应答）：
基线RABV RFFIT GMT≤0.3 IU ml?1；第29天GMT A 0.8、B 0.7、C 1.2、D 1.5 IU ml?1，此时血清保护率A 53.3%、B 60.0%、C 85.7%、D 77.8%；第36天GMT A 10.0、B 12.8、C 20.2、D 29.7 IU ml?1，第61天GMT A 7.7、B 7.2、C 12.3、D 16.7 IU ml?1；第36–61天所有组别RFFIT血清保护率均达100%，符合WHO ≥0.5 IU ml?1保护相关性标准。
Post hoc analysis: dose–response of vaccine-induced LASV immunogenicity（事后分析：LASV免疫原性的剂量—反应关系）：
各LASSARAB剂量组间LASV-GPC IgG GMT在第29、36、61天均无一致剂量依赖性差异（除外个别基线异常者），两剂方案下三剂量组免疫应答相当。
Post hoc analysis: dose–response of vaccine-induced RABV immunogenicity（事后分析：RABV免疫原性的剂量—反应关系）：
RABV糖蛋白ELISA在第29、36天高剂量组GMT显著高于低/中剂量组，但第61天差异缩小；RFFIT仅第36天A与C组有差异，第29及61天各LASSARAB组间无显著差异，表明RABV中和抗体应答对剂量不呈持续梯度依赖。
Post hoc analysis: correlation between RABV glycoprotein IgG ELISA and RFFIT（事后分析：RABV糖蛋白IgG ELISA与RFFIT的相关性）：
同一受试者同时间点RABV糖蛋白IgG ELISA滴度与RFFIT中和抗体滴度呈强正相关（Spearman's ρ＝0.89，95% CI 0.86–0.91，P＜0.001），提示ELISA可作为RFFIT替代指标。
讨论与结论（翻译浓缩）：
本项LASSARAB + aPHAD-SE灭活狂犬病毒载体LASV-GPC疫苗Ⅰ期临床试验中期分析表明，该疫苗在两剂肌注后至第61天表现出可接受的安全性——征集性不良事件多为轻至中度自限性局部反应，无SAE、≥3级AE或SNHL，安全性特征与已上市狂犬病疫苗相当。所有LASSARAB受种者完成两剂后LASV-GPC IgG血清学阳转率达100%，且RABV中和抗体血清保护率（≥0.5 IU ml?1）亦于第二剂后达100%，符合WHO狂犬病保护性标准。LASV保护性机制与临床前NHP模型一致，依赖于非中和性结合抗体及Fcγ受体介导的效应功能而非LASV中和抗体，这与人类拉沙热幸存者免疫特征相符。RABV载体平台具有成熟的生产工艺（可在BSL-2条件下生产灭活制剂）、可冻干稳定储存（2–8℃常规冷链）及在流行区同时预防狂犬病与拉沙热的公共卫生价值。尽管本研究为样本量有限的Ⅰ期探索性试验且随访仅至第61天，结果支持推进该双价疫苗至流行区更大规模、长期随访的后续临床研究。若后期证实有效性，LASSARAB + aPHAD-SE有望成为同时应对两种WHO优先病原体(priority pathogens)的重要公共卫生干预手段。
