罗萨辛（Rosavin）通过PPARG依赖性途径抑制p38 MAPK和IGF-1信号通路，从而改善酒精性脂肪肝疾病

《Biochemical Pharmacology》：Rosavin ameliorates alcoholic fatty liver disease through PPARG-dependent inhibition of the p38 MAPK and IGF-1 pathways

　　

沈 王|蔡 金辉|唐 自清|陈 瑞荣|陈 慧科|谭 雲娟|黄 瑞瑞|吴 敏华|吴 延霞|叶 小霞

广东医科大学药学院，中国广东省湛江市 524023

摘要

红景天素（Rosavin）是Rhodiola rosea L.中的特征成分，具有多种药理活性，包括抗氧化和抗炎作用。然而，其在酒精性脂肪肝病（AFLD）中的作用尚不清楚。本研究的目的是探讨红景天素对AFLD的保护作用并阐明其潜在的分子机制。研究发现，红景天素（体外浓度为25 μM和50 μM；体内通过口服给药，剂量为100 mg/kg/天，持续10天）能够显著减轻酒精引起的肝脏脂质积累，增强抗氧化能力，并缓解肝脏损伤，从而证明其在体外和体内的保护作用。通过网络药理学和分子对接分析，确定了红景天素在AFLD中的六个潜在靶点：一氧化氮合酶3（NOS3）、原癌基因酪氨酸蛋白激酶Src（SRC）、过氧化物酶体增殖激活受体γ（PPARG）、丝裂原活化蛋白激酶14（MAPK14，也称为p38α）、肿瘤坏死因子α（TNFα）和胰岛素样生长因子1（IGF-1）。RT-qPCR和Western blotting实验证实，红景天素可下调PPARG、TNFα和IGF-1的表达，并抑制p38的磷酸化。救援实验进一步表明，PPARG特异性激动剂美沙拉嗪可以逆转红景天素对PPARG表达的抑制作用，不仅抵消了红景天素的保护效果，还逆转了红景天素引起的MAPK14和IGF-1表达的变化。总之，红景天素通过下调PPARG并调节MAPK14和IGF-1信号通路来缓解AFLD。本研究首次证明了红景天素通过PPARG发挥保护作用，为其作为AFLD治疗药物提供了依据。

引言

酒精性脂肪肝病（AFLD）是一种由长期过量饮酒引起的常见慢性肝病[1]。其早期病理特征是肝细胞中甘油三酯（TG）和总胆固醇（TC）的过度积累，导致以大泡脂肪转变为特征的肝脂肪变性[2]。这一阶段是可逆的，及时干预可以恢复正常的肝组织结构。然而，如果病情得不到控制，可能会发展为脂肪性肝炎，可能伴有肝纤维化，最终发展为肝硬化甚至肝细胞癌，这通常是不可逆的[3]，[4]。研究表明，肝脂肪变性的程度与疾病的进一步发展密切相关[5]。因此，早期干预和治疗AFLD对于改善患者的生活质量、减少医疗负担和社会成本具有重要意义。

目前，AFLD的基本治疗方法仍然是严格限制饮酒[6]。临床辅助药物主要包括抗酒精依赖药物（如纳曲酮、阿坎普罗萨特）、促进酒精代谢的药物（如美他酮）和抗氧化剂（如水飞蓟素）等[7]，[8]，[9]。这些药物主要通过调节成瘾行为、促进酒精代谢或减少氧化应激来发挥作用；然而，有些药物有明显的副作用，如成瘾风险或潜在的肝毒性[10]。中医在治疗AFLD方面也积累了一定的经验，例如使用青肝化湿活血汤、健脾化浊汤等复方方剂[11]，[12]。近年来，更多研究探索了中药提取物在治疗AFLD中的治疗潜力，如Antrodia camphorata中的Antrosterol和Salvia miltiorrhiza中的Salvianolic acid A[13]，[14]。然而，目前尚缺乏高效、低毒且机制明确的单体药物用于临床治疗AFLD。

Rhodiola rosea L.是一种生长在高海拔缺氧环境中的传统药用植物，具有显著的抗逆性。现代药理学研究表明，其提取物具有多种生物活性，如抗氧化、抗炎、神经保护和代谢改善作用[15]。其中，红景天素（CAS编号：84954-92-7，分子式：C₂₀H₂₈O₁₀；分子量：428.43 g/mol）是Rhodiola rosea L.的特征成分，在其他红景天属植物中几乎不存在或含量极低，因此备受关注[16]。最新研究表明，红景天素具有多种生物活性，具有临床应用的潜力[17]。研究指出，红景天素不仅具有强抗氧化[18]，[19]，[20]和抗炎[21]，[22]作用，还能促进脂肪细胞凋亡和脂质分解，在高脂饮食喂养的小鼠模型中降低TG和TC水平，表明其在脂质代谢相关疾病中的潜在应用[24]，[25]。值得注意的是，最近的一项研究报道，红景天素通过调节Th17细胞分化来缓解小鼠的结肠炎，进一步凸显了其广泛的抗炎潜力[26]。然而，红景天素是否对AFLD具有保护作用尚未有系统的研究报道。

我们使用细胞和小鼠模型系统评估了红景天素对AFLD的改善作用。结合网络药理学和分子对接分析，进一步研究和验证了其核心靶点及相关信号通路，从而阐明了红景天素在AFLD中的干预机制。这些发现为红景天素作为潜在AFLD治疗药物的开发提供了理论基础。

章节片段

细胞和动物

正常小鼠肝细胞AML-12和人肝细胞HepG2购自Pricella（武汉，中国）。72只7周大的SPF级雄性C57BL/6J小鼠购自广州金伟生物科技有限公司（动物证书编号：99006400035029）。本研究已获得广东医科大学机构动物护理和使用委员会（IACUC）的批准，批准号为GDMU-2023-00056。所有动物实验程序均按照相关规范进行

红景天素在体外保护肝细胞免受酒精诱导的脂肪变性

使用乙醇（ETOH）诱导肝细胞脂肪变性。结果显示，随着乙醇浓度的增加，肝细胞中的脂滴数量逐渐增多（图2A），而细胞活力则以浓度依赖的方式下降（图2B）。当AML-12细胞暴露于3%乙醇、HepG2细胞暴露于2%乙醇时，细胞活力显著下降（P?50值，并确定

讨论

红景天素是红景天素总成分中最丰富的活性成分，是Rhodiola rosea L.的关键活性成分。深入研究其作用机制对其药理开发和应用至关重要。红景天素具有多种活性，包括抗氧化、降脂和抗疲劳作用，尽管其确切机制尚未完全明了。近年来，红景天素在阿尔茨海默病和辐射诱导的动物模型中显示出治疗潜力

CRediT作者贡献声明

沈 王：数据整理、方法学设计、验证、初稿撰写。蔡 金辉：研究设计、方法学设计、撰写——审稿与编辑。唐 自清：方法学设计、软件操作。陈 瑞荣：方法学设计、软件操作。陈 慧科：方法学设计。谭 雲娟：方法学设计、软件操作。黄 瑞瑞：数据整理、软件操作。吴 敏华：数据整理、撰写——审稿与编辑。吴 延霞：方法学设计、资源获取、撰写——审稿与编辑。叶 小霞：概念构思、资金筹集、方法学设计

伦理批准

本研究遵循《巴塞尔宣言》和ARRIVE指南进行。所有实验程序均获得广东医科大学实验动物伦理委员会的批准（许可证编号：GDMU-2023–00056）。

资助

本研究得到了广东省大学生创新创业培训计划[项目编号：S202410571044、S202510571061]和广东医科大学[项目编号：GDMU2023136、GDMU2025230]的支持。

利益冲突声明

作者声明他们没有已知的可能会影响本文工作的财务利益或个人关系。