《Blue Biotechnology》:Temporal dynamics of the larval microbiota in hatchery-raised white seabass (Atractoscion nobilis) under probiotic and live feed manipulation
工厂化繁育白海鲈(*Atractoscion nobilis*)仔鱼及活饵系统中的微生物负荷通常通过选择性培养方法进行偶发性监测,但利用下一代测序工具进行全面微生物表征和追踪的工作尚未开展。在本研究中,研究人员在益生菌处理、活饵选择和时间等不同参数条件下,对仔鱼白海鲈及其养殖水体中的微生物群进行了评估。通过16S rRNA(核糖体RNA)扩增子测序对样本中的细菌微生物群进行表征,平均每样本测序深度达到164,413条reads。对仔鱼微生物群变异贡献最大的因素是时间(加权UniFrac:n=71,R2=0.202,p=0.001)。其次,仔鱼微生物群与其周围养殖水体存在差异(加权UniFrac:n=60,R2=0.063,p=0.001)。INVE水产公司的Sanolife? MIC益生菌处理导致该益生菌被整合到微生物群落中,但并未影响其他细菌分类群的存在或丰度。益生菌处理对仔鱼生长或存活率无影响。首次投喂时用轮虫替代卤虫对仔鱼或养殖水体微生物群无显著影响。在整个仔鱼发育过程中,鱼体中最主要的细菌门为变形菌门(Pseudomonadota,原Proteobacteria)和拟杆菌门(Bacteroidota,原Bacteroidetes)。弧菌属(Vibrio spp.)在仔鱼早期投喂阶段(5–18 dph,孵化后天数)达到峰值,并与细菌α多样性的波动同时发生。Tenacibaculum属(白海鲈的可能机会性病原菌)最初在养殖水体中过度富集,但直到46 dph才在仔鱼中出现。弧菌属和Tenacibaculum均未表现出致病性或导致死亡。该研究有助于表征水产养殖中的微生物模式,从而确定需要在连续生活史阶段进行监测的细菌种类。
水产养殖苗种繁育中,工厂化繁育环境为探索、调控和识别影响仔鱼微生物组的因素提供了独特机会。微生物组是指占据特定生境的微生物群体,包括细菌、病毒和真菌等。与鱼类类似,微生物积极调控其代谢过程、应激反应、信号传导和稳态维持,这些过程也可能干扰宿主的相应功能。仔鱼微生物组在很大程度上受初始环境微生物暴露的塑造,如水体、饵料或养殖池生物膜中的微生物,这些暴露进而可能影响鱼类健康和生产性能。例如,已有研究表明海洋蟹类溞状幼体和大西洋鳕仔鱼的初始定殖分别被活饵来源的细菌主导,证明了早期微生物暴露中饵料的重要性。微生物多样性和组成的差异已被证明会影响仔鱼生长,如通过粪菌移植调控大黄鱼仔鱼微生物群可提高其生长速率、增重及消化酶(淀粉酶和脂肪酶)活性。然而, keye 证据表明,随着肠道成熟,其微生物组逐渐特化于宿主本身,而较少受外部因素支配。
益生菌的使用可能在适当条件下成功调控微生物组。益生菌是指作为补充剂投喂的活体培养细菌或细菌混合物,用于改善宿主体内微生物平衡,其功能包括与病原菌竞争、刺激免疫反应以及促进消化和营养吸收。研究表明,益生菌对水产养殖中仔鱼的存活率、应激抵抗、生长及消化具有积极影响。然而,益生菌的效果可能因菌株、剂量、宿主物种、靶向病原、温度、盐度、pH等环境条件或其他因素而波动,需要在新的物种和系统中进行验证研究。益生菌亦可引起鱼类微生物组的改变,例如在罗非鱼仔鱼中,枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)益生菌在暴露期间及之后均显著改变了肠道微生物组。
白海鲈(*Atractoscion nobilis*)分布于美国加利福尼亚中部至墨西哥下加利福尼亚海域,深受游钓渔业重视,但其捕捞量自1950年后急剧下降。海洋资源增殖与苗种繁育项目(OREHP)于1983年启动,旨在评估恢复加利福尼亚本地物种自然种群的可行性,重点开展白海鲈的资源增殖。该项目繁育野生亲鱼后代,并测试新的方法和技术以改善白海鲈的整体健康、福利和生产效率,使该物种成为探索仔鱼微生物组发育和测试益生菌效益的理想对象。在白海鲈养殖系统中,弧菌属(Vibrio)过去曾与仔鱼培育阶段的死亡率升高相关,这类死亡事件虽近期已不常见,但仍需研究技术以降低该风险。因此,研究人员在仔鱼白海鲈养殖中试用了一种旨在抑制机会性弧菌生长的益生菌,期望通过维持低弧菌丰度来稳定微生物群落。
本研究的目标是评估市售益生菌Sanolife? MIC(INVE水产公司)对仔鱼白海鲈生长、存活及细菌多样性和动态的影响。Sanolife? MIC是由三种芽孢杆菌(枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和短小芽孢杆菌)组成的益生菌,旨在改善仔鱼和幼体阶段生物的养殖环境。基于该益生菌在仔虾和幼鱼罗非鱼中的先前效果,研究人员假设其可通过竞争或抑制方式压制弧菌属生长并提高白海鲈生长速率。为收集工厂化繁育白海鲈微生物群的基线数据,本研究表征了苗种系统中仔鱼白海鲈的微生物群,将其与养殖水体微生物群进行比较,并监测微生物群落的动态变化。研究人员还假设仔鱼微生物群会随时间与海水微生物群分化,并受益生菌暴露影响;同时,鉴于饵料对仔鱼海洋微生物组成的影响,投喂不同活饵类型可区分最初定殖仔鱼白海鲈的微生物组成,因此比较了轮虫与初孵卤虫作为首次投喂饵料的效果。
该技术研究由Hubbs-SeaWorld研究所机构动物护理和使用委员会批准开展。白海鲈卵经100 ppm福尔马林消毒1小时后,以30枚/L密度(每池9,000枚)投放至320 L玻璃纤维锥形池中,从卵阶段培育至60 dph。养殖系统由循环海水和来自加利福尼亚Mission Bay的补充海水混合供水,所有补充海水经砂滤、20 μm和1 μm cartridge过滤及紫外线(UV)消毒处理;循环海水则经移动床生物反应器(MBBR)处理、75 μm滤袋过滤、20 μm和1 μm cartridge过滤及紫外线消毒。光照强度1,500 lux,光周期14L:10D。水温、溶氧每日监测,总氨氮、亚硝氮和pH每周监测。16口仔鱼池随机分配至4个处理组(每组4口池重复):轮虫添加组(无益生菌,2–7 dph投喂富集轮虫,5–35 dph投喂富集二龄卤虫);对照组(仅卤虫,无MIC添加);益生菌+卤虫组(富集饵料,卤虫经MIC富集);益生菌+水体组(水体施用,MIC直接添加至养殖水体)。除轮虫组外,其余组4–7 dph投喂一龄卤虫,6–35 dph投喂富集二龄卤虫。卤虫收获后以5,000 ppm 35% Perox-Aid消毒10分钟。仔鱼18 dph开始用Otohime微颗粒饲料驯化,35 dph完全驯化。
研究人员测定了孵化率、首次投喂存活率、仔鱼生长(体长和干重)及56 dph存活率。一龄和二龄卤虫分别用于不同投喂阶段,益生菌每日制备:卤虫富集采用12.5 g MIC+1.0 g蔗糖+2.0 L灭菌海水,30 °C搅拌30分钟,消毒后静态浸泡20分钟;水体施用则采用1.3 g MIC+0.5 g蔗糖+2.0 L灭菌海水,停水后每池添加250 mL,静置20分钟。益生菌处理池的补充水取自同一集水坑,但不回流至循环系统,以避免与非益生菌处理混合。
在微生物分析方面,研究人员从各处理组采集养殖水体样本(50 mL),于1、5、11、18、27和49 dph在第三次投喂后1小时收集,经70 μm筛网过滤后真空抽滤于0.45 μm混合纤维素酯膜,接种于硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖(TCBS)培养基,24小时后估算菌落形成单位(CFU/mL)。微生物群样本于11和18 dph采集养殖水体(10 mL)过滤保存;于1、5、11、18和46 dph采集每池3尾 pooled 仔鱼样本,经MS-222安乐死后以无菌人工海水冲洗保存;于5、11和18 dph采集卤虫样本(1 mL)。所有样本-20 °C保存直至DNA提取。
DNA提取采用Zymo Quick-DNA Miniprep plus试剂盒,鱼样本先用Omni组织匀浆器匀浆,400 μL转移至bead beating管,水体滤膜和缓冲液及400 μL卤虫样本直接加入bead beating管,65 °C加热10分钟后以Omni Bead Ruptor最高速处理5分钟,后续按试剂盒说明完成蛋白酶K消化和提取流程。提取产物以Qubit dsDNA HS试剂盒定量,空白对照低于检测限。DNA送至加州大学戴维斯分校宿主-微生物系统生物学核心设施进行文库制备和测序。
文库构建采用两步PCR法扩增16S rRNA V4区。第一步PCR使用引物515F(TCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG-GTGTGYCAGCMGCCGCGGTAA)和806R(GTCTCGTGGGCTCGGAGATGTGTATAAGAGACAG-CCGGACTACNVGGGTWTCTAAT),各25 μL反应体系含1 Unit Kapa2G Robust Hot Start聚合酶、1.5 mM MgCl
2、0.2 mM dNTPs、0.4 μM各引物及1 μL DNA模板,反应条件:95 °C 3分钟;(95 °C 30秒,50 °C 30秒,72 °C 50秒)×35循环;72 °C 7分钟。引物包含Illumina标签序列、可变长度间隔序列(无间隔、C、TC或ATG)、接头序列及16S靶向序列。第二步PCR使用带独特8核苷酸条形码的正向引(AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACNNNNNNNNTCGTCGGCAGCGTC)和反向引物(CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATNNNNNNNNGTCTCGTGGGCTCGG),反应体系含1 Unit Kapa2G Robust Hot Start聚合酶、1.5 mM MgCl
2、0.2 mM dNTPs、0.2 μM各引物及1 μL第一步产物(1:10稀释),反应条件:95 °C 3分钟;(95 °C 30秒,58 °C 30秒,72 °C 30秒)×9循环;72 °C 3分钟。终产物以Qubit高灵敏度dsDNA试剂盒定量,等浓度混样后以Ampure XP磁珠纯化,经Agilent 2100 Bioanalyzer质检,以Element Aviti平台进行300 bp双端测序。
生物信息学分析在Qiime2(版本2025.7)中进行,使用DADA2生成去噪的扩增子序列变异(ASV)表,正向序列截至170 bp,反向序列截至100 bp,去除单例、线粒体和叶绿体序列。移除低序列数样本(n=22,包括所有对照卤虫样本和所有5 dph水体样本,因对照卤虫经消毒处理未能产生足够序列)。分类学注释采用GreenGenes2分类器,系统发育树采用sepp片段插入法构建。
α多样性分析在R(v4.5.1)中使用phyloseq和Microbiome包进行,rarefaction至22,180条序列,估计丰富度、Pielou均匀度和Shannon多样性,以Kruskal-Wallis检验后进行Dunn成对比较。分类学柱状图展示各样本类型最丰富的细菌科。β多样性分析采用核心微生物系统发育度量(采样深度22,180 reads),重点使用加权和非加权UniFrac(利用ASVs的系统发育相关性),主坐标分析(PCoA)以Emperor可视化,采用adonis及成对β多样性显著性检验(Benjamini-Hochberg校正p值),β离散度以permdisp检验。Venn图比较各样本类型(卤虫、鱼、水)的ASV分布。差异性丰度分析采用ANCOM-BC2(比较仔鱼与养殖水体、益生菌处理与非处理)和MaAslin2(仔鱼随时间变化),参数设置包括:属水平聚类、Benjamini-Hochberg校正、出现率阈值0.5等。
研究结果部分,仔鱼性能方面,总体孵化率和首次投喂存活率分别为66%和46%。试验末期存活率各处理组间略有差异(14.2–18.1%)但不显著(p>0.05)。轮虫投喂组仔鱼在14、21、28和35 dph时体长显著大于其他组(但体重无显著差异),但56 dph时差异消失。益生菌添加对仔鱼生长无影响。
微生物群分析显示,驱动仔鱼白海鲈及其养殖水体微生物组成差异的首要因素是孵化后天数(加权UniFrac;adonis;R
2=0.22,p=0.001),其次是活饵或益生菌处理(R
2=0.10;p=0.002)和样本类型(R
2=0.063,p=0.001)。仔鱼和养殖水体微生物组成从11到18 dph发生变化(非加权UniFrac;R
2=0.05,p=0.001)。养殖水体样本的加权UniFrac β离散度在11和18 dph间有变异(permdisp,p=0.03),但仔鱼样本无此现象。仔鱼微生物群无论加权与否均显著区别于养殖水体(非加权UniFrac;R
2=0.19,p=0.001)。
独特细菌ASV的62%存在于海水样本中,29%的卤虫ASV为卤虫独有(仅代表益生菌处理卤虫),33%的仔鱼ASV为仔鱼独有。仔鱼与水体样本间ASV重叠度高,但养殖水体细菌丰富度更高,仔鱼微生物分类群分布更均匀,Shannon多样性无显著差异。
仔鱼与水体样本在微生物组成上存在差异。多种分类群在仔鱼中过度富集,包括鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas)、嗜麦芽窄食单胞菌属(Stenotrophomonas)、中慢生根瘤菌属(Mesorhizobium)、伯克氏菌科(Burkholderiaceae)、黄色单胞菌科(Xanthobacteraceae)、Pelagimonas、罗尔斯通氏菌属(Ralstonia)、肠杆菌科(Enterobacteraceae)、Turicibacter、奈瑟菌科(Neisseriaceae)、双歧杆菌属(Bifidobacterium)、乳杆菌属(Lactobacillus)、毛螺菌科(Lachnospiraceae,具体为Kineothrix属)、Lawsonella、Aureispira、Akkermansia和Ligilactobacillus。相反,立克次氏体科(Rickettsiaceae)、γ-变形菌纲(Gammaproteobacteria,具体为Aliivibrio、Oceaniserpentilla、Salinisphaera、假单胞菌属Pseudomonas、希瓦氏菌属Shewanella、Coxiellaceae、Halieaceae)、浮霉菌科(Planctomycetaceae)、Phycispha测定主要涉及16S rRNA扩增子测序技术、加权与非加权UniFrac β多样性分析、ANCOM-BC2和MaAslin2差异性丰度分析、主坐标分析(PCoA)以及Venn图分析。样本来源为Hubbs-SeaWorld研究所机构动物护理和使用委员会批准的养殖试验,白海鲈卵经消毒后养殖于加利福尼亚Mission Bay水源的循环水系统中。
益生菌处理结果显示,芽孢杆菌科(Bacillaceae)ASV被整合至两种益生菌处理的养殖水体和仔鱼中,并在益生菌处理卤虫微生物群中占主导。该科在所有样本类型中均为前三最丰富科,在养殖水体中的相对丰度高于仔鱼。尽管处理类型解释了部分加权UniFrac距离变异,但非加权UniFrac分析显示处理间无显著差异(R
2=0.05,p=0.10)。β离散度在各处理组间无显著差异,仅18 dph水体施用益生菌组在加权UniFrac中例外(permdisp;p=0.003)。单独分析时,处理类型仅对养殖水体加权UniFrac距离为显著因素(R
2=0.17,p=0.005),对仔鱼样本则无显著影响(p=0.41)。差异性丰度分析显示仅芽孢杆菌属(Bacillus)和短芽孢杆菌属(Brevibacillus)在对照与益生菌处理间变化,活饵变化未引起任何分类群改变。α多样性和TCBS CFU/mL数据在各处理组间无差异。
仔鱼白海鲈微生物群随时间显著变化。观测ASV数在18 dph(投喂二龄卤虫+Otohime时)达到峰值,至完全驯化至Otohime时回落至首次投喂水平。α多样性(包括均匀度和Shannon多样性)在首次投喂后显著下降,随后增加并趋于稳定。最主导的门为芽孢杆菌门(Bacillota,原Firmicutes)、变形菌门(Pseudomonadota)、拟杆菌门(Bacteroidota)和弯曲菌门(Campylobacterota)。超过一半的仔鱼ASV与养殖水体共享。β多样性随时间显著变化,所有时间点间加权和非加权UniFrac均显著差异。18 dph时样本在加权UniFrac中聚类最紧密。MaAslin2分析揭示9个属随时间显著变化:副球菌属(Paracoccus)、Poseidonibacter、Psychrobium、Tenacibaculum、科尔韦尔氏菌属(Colwellia)和Polaribacter总体呈增加趋势,而Exiguobacterium、弧菌属(Vibrio)和Ligilactobacillus总体呈下降趋势。
讨论部分,研究人员指出益生菌作为水产养殖的组成部分正在增长,已在生长促进、消化酶活性提高、免疫反应增强、应激耐受改善及病原抑制等方面显示成功。市售益生菌通常由芽孢杆菌属等"一般认为安全"(GRAS)的细菌组成。Sanolife? MIC在先前的凡纳滨对虾养殖中已显示可降低弧菌负荷。本研究条件下,该益生菌显示较低效力:鱼体性能未受益生菌或活饵类型影响;微生物多样性和组成除芽孢杆菌丰度增加外未被益生菌改变;轮虫替代初孵卤虫对微生物群落无影响。研究目标之一是通过益生菌稳定微生物群落并保持低弧菌丰度,但早期仔鱼阶段的微生物丰富度、均匀度和多样性波动未被益生菌缓解,弧菌生长也未被抑制。
养殖水体微生物群在卤虫投喂阶段呈现高ASV丰富度,但较低均匀度表明许多细菌丰度较低而部分分类群占主导。养殖水体微生物组由海水输入微生物、池内生长微生物及活饵来源微生物组成。本试验中循环海水经消毒处理后回流,可能促进机会性细菌过度生长,解释了养殖水体丰富度高而均匀度低于仔鱼的现象。
仔鱼微生物群与养殖水体存在预期的重叠,但两者在11和18 dph时显著差异,且仔鱼微生物群随时间显著波动。先前研究表明活饵对仔鱼微生物组的贡献大于养殖水体,但本研究使用的卤虫经过氧化氢消毒处理,可能减少了共享ASV数量。大量ASV为仔鱼与水体共有,但仔鱼微生物群落丰富度较低且组成差异显著。许多在仔鱼中更丰富的分类群为常见脊椎动物或海洋肠道共生菌,包括Xanthobacteraceae、Turicibacter、Kineothrix、Lachnospiraceae和Akkermansia等;部分甚至被识别为潜在鱼类益生菌,如双歧杆菌属、乳杆菌属和Ligilactobacillus,尽管其并非来自商业益生菌混合物。养殖水体中更丰富的分类群则典型于海水或苗种系统,包括Oceaniserpentilla、Salinisphaera、Pseudomonas、Gammaproteobacteria、Pyruvatibacter、Litorimonas、Bacteroidia、Phycisphaerales、Mariniblastus、Eionea、Shewanella和Pseudahrensia等,部分可能因鱼类废物而作为氮循环菌被选择富集,如Polaribacter、Planctomycetaceae和Halieaceae。
部分在仔鱼中更丰富的分类群曾被标记为机会性病原,如Sphingomonas、Stenotrophomonas、Mesorhizobium、Burkholderiaceae、Pelagimonas、Ralstonia、Enterobacteraceae和Aureispira,但其存在本身并非健康不佳的指征,本研究中仔鱼未表现异常死亡。养殖水体中过度富集的Rickettsiaceae、Aliivibrio、Pseudomonas、Bacteroidia和Tenacibaculum等在与鱼类关联时最有机会发挥机会性作用。Tenacibaculum最初在养殖水体(11和18 dph)过度富集,但在后期生活阶段(46 dph)于仔鱼中变得更加丰富,且已知与幼鱼白海鲈皮肤损伤相关。
仔鱼白海鲈微生物群随时间显著变化,交换细菌并随发育成熟,此现象在罗非鱼、黑玛丽鱼、黄尾鰤和大菱鲆等其他工厂化养殖鱼类中常见。本研究仅表征至46 dph,但有研究显示罗非鱼微生物组即使在100日龄后仍持续变化。环境因子如水源、饵料和其他物理化学变化可能影响水体和仔鱼微生物组。本研究中仔鱼微生物群在每个独特投喂间隔采样一次:1 dph(未投喂)、5 dph(首次投喂)、11 dph(二龄卤虫,各处理一致)、18 dph(驯化至Otohime)、46 dph(仅投喂Otohime)。饵料变化是解释仔鱼微生物群随时间变化的一种假说;此外,发育变化可能对微生物群产生选择压力,而微生物群在肠道上皮发育中也起重要作用。白海鲈约在18–20 dph进行尾部骨骼弯曲,消化系统发育且酶活性在仔鱼期逐渐增加。虽然仔鱼3 dph即可消化吸收营养,但胃部约在16–18 dph完全发育。仔鱼中最常见的门为变形菌门、拟杆菌门、芽孢杆菌门和放线菌门,白海鲈仔鱼中优势门主要为芽孢杆菌门、变形菌门和拟杆菌门,弯曲菌门自18 dph起也变得普遍。Poseidonibacter(门:弯曲菌门)、Paracoccus、Psychrobium、Colwellia(门:变形菌门)和Polaribacter(门:拟杆菌门)随时间在仔鱼中增加,这些种类为海洋细菌,通常与宿主相关,可能对饵料复杂性增加和肠道功能成熟后的营养循环和消化重要。Colwelliaceae特别与黄尾鰤从活饵向配合饲料的过渡相关。弧菌属在5–18 dph达到峰值,随后急剧下降,可能被其他分类群竞争淘汰。其中Paracoccus来自红杆菌科(Rhodobacteraceae),已被鉴定为K-策略者,可直接与r-策略者的弧菌竞争。大菱鲆研究也发现弧菌在发育早期阶段支配微生物组。尽管弧菌在海洋生物中普遍存在,本研究中一ASV被鉴定为V. tapetis(马尼拉蛤已知病原),虽可能随时间被竞争淘汰;另一已知鱼类病原Tenacibaculum在18 dph出现并在46 dph增加。由于16S rRNA扩增子测序无法解析到种,Tenacibaculum maritimum(原Flexibacter maritimus)等多种Tenacibaculum是许多Tenacibaculosis病的病原,该病对全球水产养殖造成经济损失。与弧菌类似,该分类群在健康鱼中常见,但白海鲈仔鱼可能携带Tenacibaculum度过孵化场生活期,在操作、标记和运输等应激期间变得易感。Exiguobacterium和Ligilactobacillus(门:芽孢杆菌门)随时间减少,但可能促进初始生长、吸收和病原抑制,是重要的早期快速定殖者。
最显著的变化之一为首次投喂后多样性下降。大菱鲆仔鱼在10 dph均匀度下降后恢复,与白海鲈仔鱼模式相似。金头鲷、黄尾鰤和鳕鱼在5–17 dph的Shannon多样性也低于0–1 dph或更晚阶段。大菱鲆研究中均匀度下降被视为不稳定标志,与常见死亡阶段重叠。白海鲈中该现象发生在首次投喂后不久,伴随弧菌峰值。先前白海鲈试验中,首次投喂前后(1–4 dph)死亡率最高。养殖黄尾鰤仔鱼也在14–18 dph经历较高弧菌丰度和较低Shannon多样性后才趋于稳定。早期仔鱼阶段及伴随的首次投喂制度似乎相对后期有较低的细菌多样性,这是试用益生菌的原因之一,未来将继续探索缓解该微生物不稳定期的策略。
研究结论部分翻译如下:总之,仔鱼白海鲈被活饵相关、海水相关和宿主特化微生物的混合体所定殖,这些微生物在首次投喂后经历过渡期,并随着饵料从活饵向干微颗粒转变而部分稳定。本研究中测试的Sanolife? MIC益生菌未能改善仔鱼生长或改变微生物多样性及组成。作者希望探索在仔鱼循环水系统中更早、更高浓度地施用该益生菌以尝试降低弧菌负荷。首次投喂后的仔鱼期特征为微生物α多样性和均匀度的下降。随着仔鱼微生物群的成熟,微生物多样性趋于稳定,但组成继续随时间变化。这种变化以一些可能共生的细菌群增加为标志,但也出现了白海鲈已知病原Tenacibaculum的显著出现。此类机会性病原在海洋环境中普遍存在,通常以低水平存在,但在适当条件下可感染白海鲈并导致严重疾病、淘汰甚至死亡。这表明Tenacibaculum自早期仔鱼培养阶段即存在于系统中,即使在水体超滤系统中也可能影响白海鲈。