生成高表达的基于转座子的稳定抗体库，以生产（1+1）和（2+1）双特异性通用轻链抗体

《Biotechnology Progress》：Generation of high-expressing transposon-based stable pools to produce (1?+?1) and (2?+?1) bispecific common light chain antibodies

　　

摘要

双特异性和多特异性抗体可以通过实现新的生物学机制来提供有效的基于蛋白质的疗法。这些复杂的不对称抗体形式的短暂表达可能会成为提供足够数量的高质量材料以支持临床前发现和可开发性评估的瓶颈，从而影响候选药物的筛选。相比之下，基于转座酶的稳定细胞系生成方法被认为是一种可靠且快速的方法，可以用来评估从稳定细胞池中获得的产品质量。基于转座酶的系统能够将多个目标基因半定向整合到宿主细胞的基因组中，经过1-3周的选择阶段后，可以快速生成高表达（高达g/L水平）的稳定细胞池。在这里，我们评估了Leap-In?转座酶技术在IGI的1+1和2+1双特异性抗体表达中的应用，这些抗体基于IGI的专有BEAT?（基于T细胞受体的双特异性抗体结合）平台。为了生成表达IGI双特异性分子的稳定CHO细胞池，将表达共同轻链和两个重链基因的转座子构建体与Leap-In?转座酶mRNA共同转染到细胞中。根据收获物中不同链组合的比例，通过载体工程进一步优化了它们的表达水平，以促进异二聚体的组装并最大化生产效率。最佳细胞池在14天的连续培养中的滴度达到了2.33 g/L，其中异二聚体占表达物种的93.8%。纯化的抗体纯度为97.4%，这是通过SE-HPLC测定的；其结合目标的能力也在SPR和基于细胞的亲和力实验中得到了验证。

利益冲突声明

S.R.、T.M.、O.B.、A.R.、M.D.和A.S.是Ichnos Sciences或Ichnos Glenmark Innovation的现任或前任员工。S.K.和F.B.是ATUM的员工。

同行评审

为了保证透明度，与本文相关的同行评审文件可在以下链接查看：https://doi.org/10.1002/btpr.88517。

第二轮评审
编辑决定函	2026/04/22
第一轮评审
编辑决定函	2026/02/10
评审员1的报告	2026/02/10

数据可用性声明

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