5′-末端尿苷衍生物的碱基修饰用于增强siRNA的效力

《Cell & Bioscience》：5′-end uridine-derived base modification for siRNAs potency reinforcement

　　

摘要

小干扰RNA（siRNA）在Argonaute的结合下，通过完全互补的碱基配对高效切割目标mRNA，从而实现强效的基因沉默。尽管化学修饰被广泛用于提高siRNA的稳定性和结合亲和力，但修改引导链的5′端核苷酸仍然是增强其效力的主要策略。在这项研究中，我们对RISC复合物的5′端结合口袋进行了结构分析，设计了一系列新的尿苷衍生物修饰，并筛选了包含001U-018U和vs30U在内的候选修饰序列。我们进一步通过体外RNA诱导的沉默复合物（RISC）在HepG2细胞中的加载以及体内RISC在小鼠中的加载，测试了这些修饰siRNA的结合活性。功能验证结果表明，与未修饰的对照组相比，修饰后的siRNA在基因沉默活性方面有显著提升。此外，初步的安全性评估显示这些修饰核苷没有可检测的细胞毒性或基因组插入风险。我们的发现扩展了siRNA修饰的化学空间，并为高效力siRNA药物的设计提供了新的见解。