在缺氧-葡萄糖剥夺条件下，A2星形胶质细胞中外泌miRNAs的失调与神经元焦亡（pyroptosis）有关：miR-139-5p在靶向NLRP3过程中发挥作用

《Journal of Orthopaedic Surgery and Research》：Dysregulation of exosomal miRNAs in A2 astrocytes under oxygen-glucose deprivation is associated with neuronal pyroptosis: a role for miR-139-5p in targeting NLRP3

　　

摘要

背景

A2星形胶质细胞的外泌体与神经细胞的焦亡现象密切相关。在缺氧葡萄糖剥夺（OGD）条件下，检测到A2星形胶质细胞外泌体中miR-139-5p的表达水平降低。我们推测miR-139-5p通过调节神经元NLRP3焦亡蛋白的表达来加剧神经炎症。

目的

识别在OGD条件下A2星形胶质细胞中差异表达的外泌体miRNA，并评估它们在神经细胞焦亡中的潜在作用。

方法

向小胶质细胞施用白细胞介素-4（IL-4），收集上清液以诱导A2星形胶质细胞的生成，将其暴露于缺氧模型中以分离外泌体，然后将这些外泌体与健康神经元及处于OGD条件下的神经元共培养，以评估神经元中的焦亡程度。随后对外泌体进行miRNA测序，分析差异表达的miRNA及其相关通路。最后，使用双荧光素酶报告基因检测方法验证miR-139-5p与NLRP3之间的靶向关系。

结果

缺氧葡萄糖剥夺（OGD）降低了A2星形胶质细胞的存活率，其中1小时被认为是最佳持续时间（p<0.001）。来自OGD处理过的星形胶质细胞的外泌体被神经元内化，导致神经元存活率下降（p<0.001）和焦亡相关蛋白增加（p<0.01）。miRNA测序鉴定出133个差异表达的miRNA（62个上调，71个下调），其中miR-139-5p显著下调。双荧光素酶检测证实miR-139-5p直接靶向NLRP3（p<0.001）。

结论

在五种与焦亡相关的外泌体miRNA（miR-214-3p、miR-22-5p、miR-139-5p、miR-382-3p和miR-365-5p）中，miR-139-5p和miR-382-3p在OGD条件下表达下调，且miR-139-5p直接靶向NLRP3。因此，外泌体miRNA，特别是miR-139-5p，值得在包括退行性颈椎脊髓病在内的神经退行性疾病中进行进一步的治疗研究。

背景

A2星形胶质细胞的外泌体与神经细胞的焦亡现象密切相关。在缺氧葡萄糖剥夺（OGD）条件下，检测到A2星形胶质细胞外泌体中miR-139-5p的表达水平降低。我们推测miR-139-5p通过调节神经元NLRP3焦亡蛋白的表达来加剧神经炎症。

目的

识别在OGD条件下A2星形胶质细胞中差异表达的外泌体miRNA，并评估它们在神经细胞焦亡中的潜在作用。

方法

向小胶质细胞施用白细胞介素-4（IL-4），收集上清液以诱导A2星形胶质细胞的生成，将其暴露于缺氧模型中以分离外泌体，然后将这些外泌体与健康神经元及处于OGD条件下的神经元共培养，以评估神经元中的焦亡程度。随后对外泌体进行miRNA测序，分析差异表达的miRNA及其相关通路。最后，使用双荧光素酶报告基因检测方法验证miR-139-5p与NLRP3之间的靶向关系。

结果

缺氧葡萄糖剥夺（OGD）降低了A2星形胶质细胞的存活率，其中1小时被认为是最佳持续时间（p<0.001）。来自OGD处理过的星形胶质细胞的外泌体被神经元内化，导致神经元存活率下降（p<0.001）和焦亡相关蛋白增加（p<0.01）。miRNA测序鉴定出133个差异表达的miRNA（62个上调，71个下调），其中miR-139-5p显著下调。双荧光素酶检测证实miR-139-5p直接靶向NLRP3（p<0.001）。

结论

在五种与焦亡相关的外泌体miRNA（miR-214-3p、miR-22-5p、miR-139-5p、miR-382-3p和miR-365-5p）中，miR-139-5p和miR-382-3p在OGD条件下表达下调，且miR-139-5p直接靶向NLRP3。因此，外泌体miRNA，特别是miR-139-5p，值得在包括退行性颈椎脊髓病在内的神经退行性疾病中进行进一步的治疗研究。