中国抗癌协会肠道微生物群技术指南（2025年版）

《Holistic Integrative Oncology》：Guidelines for gut microbiota technology of the chinese anti-cancer association (2025 Edition)

　　

肠道微生物群（GM）已成为癌症发生、治疗效果和治疗相关毒性的关键调节因子。尽管测序技术快速发展，但GM分析在肿瘤学中的临床应用缺乏标准化的技术和解释框架。为满足这一需求，中国抗癌协会肿瘤与微生态专业委员会制定了《肠道微生物群技术指南（2025年版）》。该指南为GM检测技术提供了标准化建议，包括16S rRNA基因测序、宏基因组测序和基于纳米孔的方法，覆盖了标本处理、实验室流程、生物信息学分析、质量控制和结果解释。指南还总结了GM评估在癌症患者中的临床相关性，特别是在化疗、免疫治疗和造血干细胞移植的背景下，并提出了将GM检测整合到肿瘤学实践中的实用考虑。这些建议旨在促进GM技术在癌症护理中的标准化和整合性应用。

论文《中国抗癌协会肠道微生物群技术指南（2025年版）》发表在《Holistic Integrative Oncology》，系统阐述了肠道微生物群（Gut Microbiota, GM）在肿瘤发生、疗效及毒性调控中的关键作用。目前，尽管测序技术发展迅速，但GM分析在肿瘤学临床应用中缺乏标准化技术与解释框架，制约其转化应用。为此，中国抗癌协会肿瘤与微生态专业委员会制定了本指南，旨在为GM检测提供规范化流程，推动其在癌症诊疗中的整合应用。研究人员基于大量文献回顾与多中心临床证据，提出了涵盖标本采集、核酸提取、文库构建、测序分析、生物信息学处理及结果报告的完整技术路径，并明确了16S rRNA基因测序、宏基因组测序（Metagenomic Sequencing）及基于纳米孔（Nanopore）的全长基因测序等方法的适用场景与质控要求。此外，指南深入探讨了GM在化疗、免疫治疗及造血干细胞移植（Hematopoietic Stem Cell Transplantation, HSCT）中的损伤机制与干预策略，尤其是粪菌移植（Fecal Microbiota Transplantation, FMT）的洗脱技术（Washed Microbiota Transplantation, WMT）及其在癌症治疗并发症管理中的应用。研究结论强调，GM技术作为非侵入性诊断工具和微生态干预手段，有望提升癌症疗效、减少治疗相关毒性，并为精准肿瘤学提供新方向。

**研究背景与问题**
肠道微生物群（GM）已成为调控癌症发生、发展、治疗反应及毒性的关键因子。大量证据表明，GM失衡与消化道肿瘤、代谢综合征、免疫相关疾病及多种癌症密切相关。然而，尽管二代测序（Next Generation Sequencing, NGS）等技术的进展揭示了GM在化疗、免疫检查点抑制剂（Immune Checkpoint Inhibitor, ICI）及HSCT中的调控作用，临床实践中仍缺乏统一的检测技术标准、生物信息学分析流程及结果判读规范。不同实验室在样本处理、测序平台、数据库选择及报告格式上存在显著差异，限制了GM技术的临床转化与跨研究比较。为应对这一挑战，中国抗癌协会肿瘤与微生态专业委员会制定了2025年版指南，旨在建立涵盖全流程的标准化体系。

**技术方法概述**
本指南采用的核心技术包括：16S rRNA基因测序（主要针对V2-V9高变区），宏基因组鸟枪法测序（覆盖细菌、真菌、病毒及寄生虫），以及基于纳米孔的16S全长基因测序（可区分近缘菌种）。技术流程包括：标本采集（多点取样，使用GM保存液稳定菌群），核酸提取（推荐商业化DNA提取试剂盒，需评估浓度、纯度及完整性），文库构建（酶切法、超声中断法或转座酶法），上机测序（Illumina、Thermo Fisher或MGI平台），生物信息学分析（包括OTU聚类/ASV去噪、物种组成、α/β多样性、LEfSe差异分析等）。质量控制要求每批实验包含内参、阴性及阳性对照，并定期参加室间质评。报告需展示测序深度、菌群丰度、有益/致病菌相对比例及疾病风险关联。

**研究结果**
**1. GM检测技术标准化**
指南明确了16S rRNA测序（成本低、普及广）与宏基因组测序（菌株级分辨、功能挖掘）的适用场景：16S测序适用于群落组成概览，宏基因组适用于深度功能解析。纳米孔测序在区分近缘种、识别重复区域和结构变异上具有优势，但需注意其错误率随着技术进步逐步改善。通过对样本处理、核酸提取、文库制备等环节的规范，确保了结果的可重复性。

**2. GM与化疗相关损伤**
化疗药物可破坏GM多样性，导致口腔黏膜炎、化疗相关腹泻（Chemotherapy-Related Diarrhea, CRD）及中性粒细胞减少性肠炎。指南推荐对CRD患者进行粪便培养（包括艰难梭菌检测），采用洛哌丁胺、奥曲肽阶梯治疗，并评估GM变化。对于粒缺伴发热，需尽早启动广谱抗生素，但需注意抗厌氧菌药物会降低GM多样性，增加移植物抗宿主病（Graft-Versus-Host Disease, GVHD）风险。

**3. GM与造血干细胞移植（HSCT）**
预处理和抗生素使用导致GM多样性骤降，肠球菌等机会菌占优势，易引发艰难梭菌感染（Clostridioides difficile Infection, CDI）和急性胃肠道GVHD。通过益生菌、益生元（如寡糖）或洗脱菌群移植（WMT）可恢复菌群多样性，降低GVHD相关死亡率。研究数据显示，HSCT后GM低、中、高多样性组的3年生存率分别为36%、60%和67%（p=0.019）。

**4. GM与结直肠癌（Colorectal Cancer, CRC）**
CRC患者粪便中具核梭杆菌（Fusobacterium nucleatum, Fn）、厌氧消化链球菌（Peptostreptococcus anaerobius）等富集，而丁酸产生菌（如酪酸梭菌）减少。这些菌群可通过基因毒性（如大肠杆菌产生的colibactin）、炎症（NF-κB通路激活）、免疫抑制（Fap2蛋白抑制NK细胞）及代谢（次级胆汁酸促癌）等机制促进癌变。粪便微生物标志物（如Fn与clbA+细菌组合）诊断CRC的AUC可达0.95，联合FIT可提升灵敏度至92.3%。

**5. 洗脱菌群移植（WMT）的临床规范**
WMT通过自动化净化设备去除杂质，降低不良事件。供体筛选需经问卷、实验室检测（HIV、HBV、HCV、梅毒等）及监测四阶段。推荐结肠经内镜肠道植管术（Colonic Transendoscopic Enteral Tubing, TET）作为首选输注途径，不良反应发生率最低。适应证包括：影响抗肿瘤治疗决策的肠道感染、难治性ICI相关肠炎、放射性肠炎及HSCT后GVHD相关腹泻。禁忌症为非绝对，需根据肠梗阻、活动性出血等情况个体化决策。剂量方面，基础治疗单位（1 U）约含10 cm³菌群沉淀，儿童总液量为10–50 mL，≥7岁患者为50–150 mL，输注速度为50 mL/1–2 min。

**讨论与结论**
本指南首次系统整合了GM技术从实验室到临床的标准化方案，强调了GM检测在肿瘤精准诊疗中的枢纽作用。研究结论指出：GM多样性维持是宿主免疫稳态和抗癌疗效的关键；化疗、放疗、免疫治疗及HSCT均会破坏GM平衡，而通过益生菌、益生元及WMT干预可逆转菌群失调，改善治疗结局。特别地，WMT作为创新的菌群移植技术，在控制难治性肠炎、降低GVHD风险和增强ICI疗效方面展现出广阔前景。指南呼吁建立多学科协作团队，加强GM技术的质量控制与临床研究报告规范（推荐采用PRIM 2024清单），推动其从科研走向临床常规应用。