通过NF-κB、IBA1和COX-2的调节机制，探究新型Smyrnium olusatrum提取物在胃保护及抗幽门螺杆菌方面的作用机制

《Journal of Ethnopharmacology》：Mechanistic insights into the gastroprotective and anti-Helicobacter pylori effects of novel Smyrnium olusatrum extracts through NF-κB, IBA1, and COX-2 modulation.

　　曼内尔·特尔贝切（Manel Terbeche）| 纳韦尔·德拉姆奇亚（Nawel Deramchia）| 内斯琳·乌达·阿马里（Nesrine Ouda Amari）| 娜塔莉亚·帕楚拉-哈努塞克（Natalia Pachura-Hanusek）| 安东尼·苏姆尼（Antoni Szumny）| 卡里姆·瓦达（Karim Ouadah）| 安娜·扎维拉克-帕夫利克（Anna Zawilak-Pawlik）| 雅库布·穆拉什科（Jakub Muraszko）| 托尔本·穆斯（Torben Moos）

阿尔及利亚莫斯塔加内姆大学自然科学与生命科学学院生物学系分子材料结构、制备与应用实验室
地址：国家公路11号Kharouba，27000莫斯塔加内姆

**摘要**
**民族植物学意义**
Smyrnium olusatrum L.（伞形科）在传统地中海民族医学中常被用于缓解消化系统疾病、胃部不适和炎症症状。然而，其胃保护作用及抗幽门螺杆菌（Helicobacter pylori）的特性尚未经过科学验证。鉴于氧化应激和炎症在消化性溃疡发病机制中起关键作用，并会加重幽门螺杆菌引起的黏膜损伤，研究这种传统使用的胃肠药物尤为重要。

**研究目的**
本研究评估了Smyrnium olusatrum提取物的胃保护作用及抗幽门螺杆菌活性，并探讨了其背后的抗炎机制。

**方法**
通过测定溃疡指数、分析胃分泌物及进行组织学检查来评估大鼠的胃保护效果。为阐明其胃保护作用机制，采用了针对核因子κB（NF-κB）和离子钙结合适配分子1（IBA1）的免疫荧光技术。通过LC–MS/MS鉴定出的主要植物成分进一步进行了与NF-κB和环氧化酶-2（COX-2）的分子对接分析。同时，还评估了其体外抗幽门螺杆菌活性。

**结果**
两种提取物均表现出显著的剂量依赖性胃保护作用（p < 0.001）：根提取物的溃疡指数降至5.96% ± 5.37，种子提取物的溃疡指数降至0.70% ± 0.39，有效保持了黏膜结构，减少了水肿和中性粒细胞浸润。NF-κB核转位及IBA1阳性巨噬细胞的募集显著受到抑制（p < 0.001）。对接分析显示，myricetin和luteolin与NF-κB及COX-2的结合亲和力较高。种子提取物具有选择性的抗幽门螺杆菌活性，而根提取物则无此效果。

**结论**
这些发现为Smyrnium olusatrum的传统胃肠用途提供了实验支持，表明其作为溃疡治疗候选药物的潜力。

**引言**
胃溃疡是一种病理状态，其特征是胃黏膜局部缺损，可延伸至黏膜下层，在严重情况下甚至可能穿透肌层（De Oliveira等人，2022年）。21世纪，消化性溃疡已成为重要的公共卫生问题，影响全球约10%的人口，并导致较高的发病率和死亡率（Arunachalam等人，2019年；Fahmy等人，2020年）。1990年至2021年间，消化性溃疡的全球发病率和患病率分别增加了11.1%和8.8%。尽管如此，与该疾病相关的死亡人数和伤残调整寿命分别减少了15.94%和27.8%，反映了诊断、治疗和医疗可及性的改善（Hao等人，2025年）。该病的发生与胃腔高酸度和消化酶有关，导致保护机制和生长因子功能下降（Arunachalam等人，2019年；Benvenutti等人，2020年）。这是多种病因因素（包括幽门螺杆菌感染）和药物相互作用的结果（De Oliveira等人，2022年）。非甾体抗炎药（NSAIDs）与生活方式及全身健康问题（如压力、烟草和酒精摄入）有关。幽门螺杆菌感染通过激活NF-κB信号通路并上调促炎和促侵袭性介质（如环氧化酶-2）促进胃黏膜损伤（Wu，2005年）。巨噬细胞是幽门螺杆菌诱导炎症的关键调节因子，但感染持续存在及其逃避巨噬细胞清除的能力会导致组织损伤（Wei等人，2024年）。在胃溃疡背景下，除了胃酸和胃蛋白酶等侵袭性因素外，氧化应激和活性氧（ROS）通过激活NF-κB依赖的炎症级联反应和COX-2在黏膜损伤中起关键作用（Abd-Ellatif等人，2024年；Raish等人，2018a；Yoo等人，2018年）。巨噬细胞通过驱动炎症和组织损伤显著促进溃疡发病，调节巨噬细胞功能可减轻炎症并促进愈合（Huang等人，2001年；Ni等人，2023年）。虽然传统疗法可通过缓解症状帮助恢复，但长期使用可能导致药物耐药性、症状复发及对胃肠道系统的负面影响（Arunachalam等人，2019年）。黄酮类化合物具有显著的抗炎作用，可降低溃疡风险，使其成为溃疡治疗的潜在候选药物（Zhang等人，2020年）。研究民族医学中使用的植物具有发现新生物活性化合物的巨大潜力，这些化合物不仅在治疗上具有价值，还在制药工业中具有重要意义（Rodrigues，2024年）。Smyrnium olusatrum（俗称野生芹菜）广泛分布于地中海沿岸国家，并在英国和爱尔兰自然化（Quassinti等人，2013年）。这种二年生草本植物因其药用价值在多种文化中有着悠久的历史传统，可用于治疗多种疾病。其根部被用作抗坏血病药物，根汁因其芳香特性、促进食欲、利尿和通便作用而被使用；其果实被认为对胃有益，可作为抗哮喘药物（M?lleken等人，1998年；Papaioannou等人，2010年），并具有抗炎、缓解胃肠不适和消化不良的作用（Sekkout等人，2024年）；茎部则被用作净化剂（M?lleken等人，1998年；Papaioannou等人，2010年）。Smyrnium olusatrum富含倍半萜类、黄酮类和抗坏血酸等生物活性化合物（Bencheraiet等人，2011年；Caprioli等人，2014年；Duran等人，2024年；M?lleken等人，1998年；Quassinti等人，2013年）。已有研究表明，其精油和某些提取物具有抗氧化、酶抑制、抗癌（Duran等人，2024年；Hamdi等人，2025年；Quassinti等人，2014年）、抗菌（Ersin Minareci，2012年；Quassinti等人，2013年）、抗炎和镇痛作用（El Youbi等人，2024年）。然而，Smyrnium olusatrum的胃保护潜力尚未得到充分研究，其对消化性溃疡的作用也未被探索，这构成了一个知识空白。为科学验证其传统用途，本研究在酸化乙醇诱导的胃溃疡大鼠模型中评估了其胃保护效果，并在体外评估了其抗幽门螺杆菌活性。尽管该模型常用于评估胃保护剂（Yoo等人，2018年），但它仅部分再现了幽门螺杆菌感染的多因素发病机制。据我们所知，这是首次同时评估胃保护作用和抗幽门螺杆菌作用的研究，也是首次对其根部和种子进行全面的液相色谱-串联质谱（LC–MS/MS）分析，揭示了其植物化学组成和潜在生物学意义。

**化学试剂**
使用纯化学试剂和分析级试剂：乙醇、甲醇、乙腈和甲酸（LC-MS级）来自Sigma-Aldrich（德国）；多酚标准和黄酮混合物来自MetaSci（加拿大）。体内实验使用0.9%生理盐水和5% DMSO（Sigma-Aldrich，德国）。安乐死使用乙醚（Sigma-Aldrich，德国）。胃液酸度通过酚酞滴定法测定（Biochem Chemopharma，法国）。

**提取效率**
SoRE的提取效率为22.28%，SoSE的提取效率约为17.2%。

**酚类化合物测定**
表1显示了两种提取物的总酚含量（TPC）和总黄酮含量（TFC）：SoSE的TPC为2.93 ± 0.07 mg GAE/g提取物，TFC为0.44 ± 0.01 mg QE/g提取物；SoRE的TPC为1.39 ± 0.03 mg GAE/g提取物，TFC为0.15 ± 0.04 mg QE/g提取物。总体而言，两种提取物中的酚类和黄酮化合物含量较低。

**LC–MS/MS结果**
LC–MS/MS分析显示Smyrnium olusatrum根部和种子的化学成分。

**讨论**
消化性溃疡仍是重要的公共卫生问题，需要改进诊断和治疗方法（Arunachalam等人，2019年；Fahmy等人，2020年）。传统治疗方法有效，但长期使用可能导致耐药性和不良反应（Arunachalam等人，2019年），因此需要寻找更安全的治疗方案。富含黄酮的植物具有强抗炎作用且溃疡风险低，是更有前景的安全替代品。

**作者贡献声明**
托尔本·穆斯（Torben Moos）：撰写、审稿与编辑、验证、资源管理、方法学设计、研究实施、概念构思。
曼内尔·特尔贝切（Manel Terbeche）：撰写初稿、软件使用、方法学设计、研究实施、数据分析、概念构思。
安东尼·苏姆尼（Antoni Szumny）：撰写、审稿与编辑、资源管理、方法学设计、研究实施。
卡里姆·瓦达（Karim Ouadah）：撰写初稿、验证、软件使用、方法学设计、研究实施、数据分析。
安娜·扎维拉克-帕夫利克（Anna Zawilak-Pawlik）：撰写、审稿与数据管理。

**数据可用性**
数据可应要求提供。

**利益冲突声明**
作者声明没有已知的可能影响本文研究的财务利益或个人关系。

**资助**
本研究由阿尔及利亚高等教育和科学研究部及PRFU项目（代码D01N01UN270120230001）资助。Wroc?aw环境与生命科学大学及波兰科学院Ludwik Hirszfeld免疫学与实验治疗研究所提供了开放获取资金支持。

**致谢**
作者衷心感谢Sekkal FZ博士（植物学家）对Smyrnium olusatrum L标本的准确鉴定和认证。同时感谢奥尔堡大学的Merete Fredsgaard和Ditte Bech Laursen在组织免疫荧光制备方面的技术支持。