基于连续记录的束流图像位移技术实现的超快速冷冻电镜数据采集方法

《Nature Communications》：Ultra-rapid cryo-EM data acquisition method enabled by continuous recording based beam image shift

　　

摘要

由于需要大量数据才能获得高分辨率的重建图像，冷冻电子显微镜（cryo-EM）的数据采集工作耗时较长。在这里，我们采用一种名为连续记录束像移动法（CR-BIS）的技术，在进行束像移动采集时持续记录，从而消除了相机带来的延迟时间。结合K3和Falcon 4直接电子探测器以及常规的数据采集条件，该技术使得在单粒子分析模式下每24小时可获取约34,000张显微图像，在冷冻电子断层扫描模式下可获取约1,000组倾斜序列。对单粒子数据和断层扫描数据集进行的三维重建表明，CR-BIS不仅能够加快数据收集速度，还能保持数据质量。由于可通过脚本将其集成到现有的数据采集软件中，且无需对硬件进行改造，因此CR-BIS可广泛应用于高效的高分辨率冷冻电子显微镜成像工作中。