Hymenoscyphus corni-maris 和 H. corni-sanguineae 新种（Helotiaceae）在欧洲和亚洲的 Cornus 木乃伊化果实上

《Mycological Progress》：Hymenoscyphus corni-maris and H. corni-sanguineae spp. nov. (Helotiaceae) on Cornus mummified fruits in Europe and Asia

　　

两种形态相似的果生真菌在此被归入 Hymenoscyphus 属。然而，它们显示出高度的遗传分化。它们在 Cornus spp. 的落地果核上形成短至长柄的子囊盘。其中一种，H. corni-maris，迄今仅在 C. mas 上发现，而 H. corni-sanguineae 在欧洲的 C. sanguinea 和中国的 C. controversa 上被记录。这两个物种共有外囊盘被由 textura prismatica(-porrecta) 组成，活的侧丝含有折射性液泡小滴（refractive vacuolar guttules），Hymenoscyphus 型的真淀粉质子囊顶环（euamyloid ascus apical rings），以及大小相似、脂质含量低的 ciborioid 子囊孢子。Hymenoscyphus corni-maris 与 H. corni-sanguineae 的区别在于盘呈白色 vs. 黄赭色，以及子囊分别产生于钩状结构（croziers） vs. 简单隔膜（simple septa）。在纯培养中未观察到两种物种的产孢。文献中存在两个同义名称。来自捷克 C. mas 上的 Sclerotinia corni 是不合法的（Art. 3.1），因为它是现被认为 Monilinia corni 的物种的晚出同名。来自中国 C. controversa 上的 Lanzia glandicola var. cornicola 仅在变种水平发表。通过对主模式（holotypes）的重新检查以及 L. glandicola var. cornicola 的 DNA 序列分析，这两个同义关系得以澄清。基于研究人员对 ITS?+?LSU rDNA 的系统发育分析，H. corni-maris 聚集在一个高支持率的子支中，该子支包含不同的无性型（anamorph）和有性型（teleomorph）类群，这些类群最近被认定为一个新科 Tricladiaceae。Hymenoscyphus corni-sanguineae 位于另一个高支持率的支中，该支包含 H. repandus 和 H. menthae 等物种，以及两个单型属：闭囊壳的 Amylocarpus 和无性型的 Goniopila。除了后两个类群，所有这些支都具有形态相似的子囊盘，很难基于其有性型将它们分为不同的类群。因此，研究人员倾向于采用广义的、并系（paraphyletic）概念的 Hymenoscyphus。

Hymenoscyphus 属（Helotiaceae，Helotiales）的分类历史复杂，其界限在不同时期被广泛调整。过去，Cudoniella、Phaeohelotium 等属被视为独立类群，但系统发育研究揭示了复杂的网状关系，许多形态相似的类群在分子上呈现高度分化。当前存在的主要问题是：严格基于单系（monophyly）的分类框架导致属级分类的剧烈膨胀，难以处理形态相似但遗传距离大的物种。本研究的目的是对 Cornus 属木乃伊化果实上的两种真菌进行形态与分子整合分析，澄清其分类学和命名法，并寻求一个合理的广义属概念。

研究人员基于欧洲和亚洲多个地点的采集标本（包括中国、日本、捷克、斯洛伐克、波黑、波兰、德国、比利时、法国等地），通过活体材料显微观察、纯培养（PDA培养基上从子囊孢子分离）、核糖体DNA ITS 和 LSU 区域扩增与测序、以及系统发育分析（MAFFT比对、IQ-TREE最大似然法、ModelFinder模型选择、5000次超快速bootstrap），结合主模式（holotype）复核和同义名澄清，描述了 Hymenoscyphus corni-maris 和 H. corni-sanguineae 两个新种。研究得出以下结论：这两种真菌形态极为相似，但遗传距离高达 16.5–18.3%（ITS 区域），在系统树上分属两个高支持率的不同分支——H. corni-maris 位于包含 Tricladiaceae 科成员（如 Cudoniella indica、H. imberbis、H. vernus 及多种无性型类群）的子支中；H. corni-sanguineae 则与 H. repandus、H. menthae 以及两个单型属 Amylocarpus（闭囊壳型）和 Goniopila（无性型）聚成另一强支持分支。此外，研究澄清了两个名称的同义关系：Sclerotinia corni（亦名）为非法晚出同名（Monilinia corni 的异名），以及 Lanzia glandicola var. cornicola 被确认为 H. corni-sanguineae 的异名。该研究强调了在 Helotiaceae 科中采用并系（paraphyletic）概念的合理性，主张保持广义的 Hymenoscyphus 属，以避免不必要的属级分裂。论文发表在《Mycological Progress》。

主要关键技术方法为：活体显微研究（依 Baral 2020 和 Baral & Polhorsky 2019 的方法，以新鲜标本为主）；子囊孢子培养（PDA 平板）；DNA 提取（DNeasy Plant Mini Kit，裂解 3 h）；PCR 扩增 ITS（引物 ITS5/ITS4）和 LSU rDNA（引物 LR0R/LR5）；测序（Eurofins Genomics）；系统发育分析（MAFFT E-ins-I 比对，IQ-TREE 2.2.0 最大似然法，ModelFinder 自动选择模型，5000 次超快速 bootstrap）；样本来源于欧洲（捷克、斯洛伐克、波黑、波兰、德国、比利时、法国）和亚洲（中国四川、日本）的多处田野采集。

**结果部分**：

**Hymenoscyphus corni-maris**：通过形态学描述和分子分析，研究人员确认该种仅发生在 Cornus mas 的木乃伊化果核上，子囊盘呈白色，子囊基部具钩状结构（croziers），子囊孢子 ciborioid 型、脂质含量低（OCI 0–1）。纯培养中未观察到无性型。其族群在 ITS 和 LSU 系统树上以高支持率与 Cudoniella indica、H. imberbis、Tricladiaceae 科成员聚为子支。

**Hymenoscyphus corni-sanguineae**：通过形态学描述和分子分析，研究人员确认该种分布于欧洲的 C. sanguinea 和亚洲的 C. controversa 上，子囊盘呈黄赭色，子囊基部具简单隔膜（simple septa），无钩状结构；子囊孢子形态和脂质含量与 H. corni-maris 相似。其 ITS 和 LSU 序列在系统树上与 H. repandus、H. menthae、Amylocarpus 和 Goniopila 聚为另一强支持分支。

**Morphological similarity in distantly related lineages**：比较形态学研究表明，尽管这两种真菌在宏观和微观特征（如子囊盘大小、侧丝液泡、子囊孢子形状与脂质）上极为相似，但遗传距离巨大（ITS p-distance 16.5–18.3%），说明形态趋同进化在 Helotiaceae 中普遍存在。此外，H. corni-maris 与其姊妹类群（如 Prunus padus 果核上的未鉴定采集物）也表现出形态高度相似。

**Other genera resembling the two species on Cornus fruits**：通过形态对比，研究人员指出这两个 Cornus 上的物种可能被误认为 Gloeotinia（子囊顶环不淀粉质）或 Symphyosirinia（子囊孢子更大），从而厘清了与 Sclerotiniaceae 科成员的混淆。

**Anamorph diversity in Helotiaceae s. l.**：通过培养实验（未观察到两种新种产孢）及文献回顾，研究人员总结了 Helotiaceae 科内无性型的多样性，包括 Gloeotinia 的 Myrioconium 型、Symphyosirinia 的束丝型、Bisporella 的链孢型，以及 Tricladiaceae 科内多种水生丝孢菌型，但强调了无性型分类价值有限，尤其在 H. fagineus 和 Chaetopsis canovae 这一对近缘种中显示无性型差异巨大。

**Phylogenetic results**：基于 ITS?+?LSU rDNA 的系统发育分析（81 个序列，含外群）显示，两种新种位于 Helotiaceae 科内的不同强支持分支中。H. corni-maris 位于 Tricladiaceae 科对应的子支，该支还包括 Cudoniella 属、Graddonia 属及其他无性型类群；H. corni-sanguineae 则与 H. repandus、H. menthae 及 Amylocarpus、Goniopila 聚为另一支。分析还发现 Cudoniella acicularis 与 Graddonia coracina 形成独立子支，支持将这些属保留在广义 Hymenoscyphus 中。

**总结讨论部分**：研究人员在讨论中指出，严格遵循单系命名会导致属级分类严重膨胀，对于形态相似但遗传分化的物种尤为困难。因此，研究人员倾向于采用并系（paraphyletic）概念，将 Hymenoscyphus 维持为广义属，包含 Cudoniella、Graddonia 和 Phaeohelotium 等类群，但不包括 Amylocarpus 和 Roesleria（尽管后者在系统树上嵌于 Hymenoscyphus s. l. 中）。对于无性型属（如 Tricladium），由于大多数 Helotiaceae 物种的无性型未知，且近缘种无性型形态差异极大（如 H. fagineus 与 Chaetopsis canovae），研究人员认为基于无性型的分类系统不可靠。**翻译研究结论部分**：研究人员暂时倾向于采用广义的 Hymenoscyphus 概念，但避免进行任何新的分类组合。这一立场基于形态相似性重于遗传距离的分类原则，并承认在 Helotiaceae 科中，无性型分类价值有限，需要更多研究来获得关于无性型的全面信息。