健康犬、接受胫骨平台水平截骨术犬及脓毒症犬体内再生蛋白3E（REG3E）与C-反应蛋白（CRP）的动态变化规律研究

《Veterinary Clinical Pathology》：Kinetics of Regenerating Protein 3E and C-Reactive Protein in Healthy Dogs, Dogs Undergoing Tibial Plateau Leveling Osteotomy, and Dogs With Sepsis

　　

背景：急性期蛋白（acute-phase proteins, APPs）的连续检测有助于监测人和犬脓毒症的发生与发展及预后恢复。迄今为止，犬炎症新型生物标志物——再生蛋白（regenerating protein, REG）3E 的动力学特征尚不清楚。 目的：本研究旨在评估不同犬群中 REG3E浓度在 48–72 h 内的变化，并将其与 C-反应蛋白（C-reactive protein, CRP）浓度进行对比。 方法：采用酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）检测 43 只犬连续 3–4 d 的血浆 REG3E浓度，其中健康对照组 12 只、接受胫骨平台水平截骨术（tibial plateau leveling osteotomy, TPLO）组 17 只、脓毒症组 14 只。犬 CRP 采用免疫比浊法（turbidimetric immunoassay）测定。 结果：对照组与 TPLO 组各时间点 REG3E浓度均处于低水平。TPLO 组 CRP 随时间呈轻度但显著升高。脓毒症组入院时 REG3E与 CRP 浓度均高于其他组，治疗开始后 72 h 内分别降至初始水平的 14％ 和 28％。2 只犬 REG3E（非 CRP）持续高值，其中 1 只发生脓毒症复发。两组总体及脓毒症组内两种急性期蛋白呈中度显著相关，TPLO 组内无相关性。 结论：综上，基于本犬队列，CRP 对术后轻微炎症更敏感；REG3E预测脓毒症发生或复发之潜能值得进一步研究。

论文解读：健康犬、接受胫骨平台水平截骨术犬及脓毒症犬体内再生蛋白3E（REG_3E）与C-反应蛋白（CRP）的动态变化规律研究

该论文发表于《Veterinary Clinical Pathology》。

研究背景与意义

脓毒症（sepsis）是犬常见危重疾病，病死率高，早期确诊与区分非感染性全身炎症反应综合征（systemic inflammatory response syndrome, SIRS）较困难，缺乏特异性快速诊断指标。C-反应蛋白（CRP）是犬最常用的正性急性期蛋白（positive acute-phase protein, pAPP），敏感性高但特异性不足；降钙素原（procalcitonin, PCT）在犬中对细菌性感染反应不一致，可靠性欠佳。人源再生蛋白（regenerating protein, REG）1A／REG3A（胰腺石蛋白／胰腺炎相关蛋白）被认为是脓毒症早期诊断及预后评估的新兴生物标志物。犬源 REG_3E为人 REG3A 同源物，既往研究发现败血症及急性胰腺炎时显著升高，但其生理功能、来源及动力学特征均不明。因此，研究人员拟通过观察健康犬、择期骨科手术犬及自然发生脓毒症犬连续数日血浆 REG_3E与 CRP 浓度的动态变化，明确其对炎症及感染的响应模式，探讨其作为犬脓毒症生物标志物的价值。

主要技术方法与样本队列

研究人员收集瑞士伯尔尼大学小动物诊所 2020–2024 年共 43 只犬的肝素抗凝血浆标本，分三组：健康犬（n=12，工作人员／军犬，体检及血常规生化正常，CRP 在参考区间内）、接受胫骨平台水平截骨术（tibial plateau leveling osteotomy, TPLO）治疗前十字韧带断裂的犬（n=17）、经细胞学／组织学／细菌培养／术中发现脓液证实感染且符合 SIRS 判定标准的脓毒症犬（n=14）。采样时间点为健康组 D0–D2、TPLO 组术前 D0 及术后 D1–D2、脓毒症组入院 D0 及 D1–D3。CRP 采用已验证犬特异性免疫比浊法测定；REG_3E采用已验证夹心 ELISA（sandwich ELISA），定量下限（lower limit of quantification, LLoQ）为 30 ng/mL。统计学采用 Kruskal–Wallis 检验、Friedman 检验、混合效应模型及 Spearman 秩相关分析。

研究结果

3.1 Demographic Data（人口统计学数据）

三组间年龄无显著差异（p=0.19），性别分布有差异（p=0.02），脓毒症组雌性居多。健康组含军犬，其 REG_3E中位数显著高于宠物犬（p＜0.05），军犬亚组个体内变异较小。脓毒症组 D0 的 REG_3E与 CRP 中位数均显著高于健康组及 TPLO 组（p＜0.01）。

3.2 REG_3EKinetics（REG_3E动力学）

健康犬三天内 REG_3E无显著变化（p=0.24），个体内日间变异系数均值 24％，个体间变异系数均值 64％。TPLO 组 REG_3E呈轻度非显著性下降（p=0.03），未随手术刺激升高。脓毒症组 D0 中位数 1361.5 ng/mL，治疗后 D1 降至 75％、D2 28％、D3 14％ 基线值；整体时间点差异未达显著性（p=0.22）。两例犬 REG_3E未降反升——1 例并发急性胰腺炎及急性肾损伤时持续高值，1 例后证实脓毒症复发并死亡；此两例 CRP 均下降。

3.3 CRP Kinetics（CRP 动力学）

健康犬各时间点 CRP 均低于 LLoQ（＜6.4 mg/L）。TPLO 组 CRP 随时间显著升高（p＜0.01），D2 中位数为 25.3 mg/L。脓毒症组 CRP 随时间显著下降（p＜0.01），D1 降至基线 72％、D2 39％、D3 28％；所有犬均下降，包括上述两例 REG_3E未降之犬。

3.4 Correlation Between REG_3Eand CRP（REG_3E与 CRP 的相关性）

全组所有时点两者呈中度正相关（r_s=0.5，p＜0.01），脓毒症组内亦呈中度相关（r_s=0.44，p＜0.01），TPLO 组内无相关性（p=0.19）。按单日分析，D0（r_s=0.67）与 D1（r_s=0.63）相关最强，D2 与 D3 无相关性。

讨论与结论总结

健康犬 REG_3E低且稳定，个体内变异小于个体间变异，提示连续监测同一犬的动态变化优于参照群体参考区间。TPLO 术后 CRP 升高而 REG_3E未升，提示 REG_3E对轻度无菌性手术炎症不敏感或响应延迟。脓毒症时 REG_3E显著升高且随治疗迅速下降，降幅较 CRP 更快；但并发胰腺或肾脏疾病也可致 REG_3E持续升高，使其对单纯脓毒症特异性受限。两例 REG_3E不降而 CRP 降的个案提示 REG_3E可能反映持续／复发性感染或合并器官病变，具预警潜能。CRP 对轻中度术后炎症更一致敏感，受合并症影响小，更适合常规炎症监测。

研究结论翻译：综上所述，基于本犬队列，健康状态及择期骨科术后 REG_3E维持低水平且较恒定，脓毒症犬入院时明显升高并于 48–72 h 内进行性下降。CRP 似更适于检测轻微术后炎症，但 REG_3E预测犬脓毒症持续存在或复发的价值值得进一步研究。