与市售试剂盒及无细胞DNA检测方法相比，自主研发的抗原B ELISA在诊断人类囊型包虫病方面具有更高的效能

《Scientific Reports》：High efficacy of an in-house antigen B ELISA for diagnosing human cystic echinococcosis compared with a commercial kit and a cell-free DNA assay

　　

摘要

囊性包虫病在流行地区仍构成严重的动物源性疾病威胁。虽然血清学诊断被广泛使用，但存在抗原变异性和敏感性随疾病阶段变化等难题。本研究的目的是利用从严格意义上的Echinococcus granulosus中分离出的12-kDa抗原B亚单位，开发并评估一种自制ELISA检测方法，同时将其性能与市售ELISA试剂盒以及基于无细胞DNA的PCR检测方法进行比较。该12-kDa AgB组分是从羊的包虫囊液中分离出来的，用于构建一种自制的IgG ELISA检测方法。通过ROC分析评估了其诊断性能，研究共纳入51例经手术及CT确诊的囊性包虫病患者和50名健康对照组。通过针对COX1基因的PCR技术提取血浆中的cfDNA并进行扩增，运用Cohen’s kappa系数和Spearman相关系数来判断不同检测方法之间的一致性。自制12-kDa AgB ELISA的敏感性为90.2%，特异性为100%，AUC值为0.936；市售ELISA试剂盒的敏感性为92.2%，特异性为100%；而基于cfDNA的PCR检测方法能识别88.2%的病例，特异性也为100%。自制ELISA试剂盒与市售试剂盒的结果一致性非常好（κ=0.878），血清学检测方法与分子检测方法的结果一致性也在0.78–0.81之间。这种自制的12-kDa AgB ELISA是一种非常可靠且经济高效的囊性包虫病诊断工具，其性能可与市售ELISA试剂盒及基于cfDNA的PCR检测方法相媲美。未来的研究应重点开发标准化的重组亚单位，以提高基于AgB的诊断方法的可靠性及其在流行地区的可及性。此外，直接检测包虫组织中的DNA也是一种更具敏感度和稳定性的分子检测模板，有望克服血清学检测和血浆cfDNA检测方法的局限性。