与先天性听力损失相关的ACY1剪接位点变异：临床、生化及斑马鱼功能研究证据

《Biochemical Genetics》：A Splice-Site Variant in ACY1 Associated with Congenital Hearing Loss: Clinical, Biochemical, and Zebrafish Functional Evidence

　　

摘要

氨酰化酶1（ACY1）基因的变异与多种临床表型相关，但其在听力损失中的作用尚不清楚。本研究旨在探讨ACY1在听力损失中的潜在作用。我们对396名感音神经性听力损失患者进行了外显子测序，在一名5岁的女孩身上发现了一个纯合剪接变异c.1063-1G>A，该女孩患有先天性听力损失，但在4年的随访中发育指标正常。通过尿液有机酸分析以及在EB病毒转化的淋巴母细胞中检测氨酰化酶1酶活性等功能试验，确认了该患者存在氨酰化酶1缺乏症。体外剪接试验显示，c.1063-1G>A变异激活了一个隐匿的剪接位点，从而导致异常剪接、移码以及过早出现终止密码子。通过morpholino介导的acy1基因敲低斑马鱼模型，发现其毛细胞数量显著减少且听觉功能受损，而野生型人类ACY1 mRNA可有效挽救这些表现，突变型则无法。此外，通过荧光活化细胞分选结合RNA测序对斑马鱼听觉毛细胞进行转录组分析，发现包括gfi1ab和atoh1a/b在内的关键内耳发育基因表达下调，这一结果也通过RT-qPCR得到了验证。这些结果为ACY1 c.1063-1G>A变异的功能影响及其在先天性听力损失中的作用提供了临床和实验依据。我们的研究结果支持将ACY1视为遗传性听力障碍的候选基因，不过仍需更多无关患者样本及独立验证，以进一步确立该基因与疾病之间的关联。

图形摘要