褪黑素调节人类胎儿膜中的炎症：一种离体研究方法

《Scientific Reports》：Melatonin modulates inflammation in human fetal membranes: an ex vivo approach

　　

摘要

绒毛膜羊膜炎是导致早产的重要原因，它会通过释放促炎细胞因子和趋化因子来引发人类胎儿膜的炎症反应。褪黑素是一种由松果体及胎盘产生的神经激素，具有明确的抗炎作用；不过其免疫调节效应在胎儿膜中的作用此前尚未被研究过。本研究的目的是评估褪黑素在经脂多糖刺激的组织中发挥抗炎作用的能力，同时探讨TLR4/NF-κB通路在这一过程中的可能作用。研究使用了足月剖宫产获取的胎儿膜组织（n?=?12），在双腔系统中进行培养。绒毛膜羊膜层和羊膜层分别用1nM浓度的褪黑素处理24小时，每6小时重复一次处理，之后再用500 ng/mL浓度的脂多糖继续刺激24小时。在脂多糖处理期间，这两个区域仍需每6小时重复一次褪黑素处理。通过ELISA方法检测细胞因子（TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10）和趋化因子（CCL5、CCL3、CCL2）的分泌量，通过qPCR方法检测相应mRNA的表达水平，而TLR4和NF-κB蛋白的水平则通过ELISA和西方印迹法测定。脂多糖刺激会增加绒毛膜羊膜层和羊膜层中细胞因子及趋化因子的分泌，上调TNF-α、IL-1β和CCL5的mRNA表达，同时提高TLR4、MyD88和NF-κB的蛋白水平。而褪黑素处理则显著降低了绒毛膜羊膜层和羊膜层中所有检测到的细胞因子以及CCL5和CCL3的分泌量。综上所述，褪黑素可通过调节TLR4/NF-κB通路来减轻胎儿膜中的感染诱发性炎症，这为其在预防炎症相关早产中的作用提供了依据。